肾上腺髓质素在子宫腺肌病的表达及意义

李世杰，颜友良，林 霞，栾 峰

（南方医科大学附属中山市博爱医院妇产科，广东 中山 528400）

当子宫内膜腺体及间质侵入子宫肌层时，称为子宫腺肌病（adenomyosis）。大约70%患者有明显的临床症状，表现为继发性进行性加剧的痛经、月经量增多、经期延长，常继发贫血。发病机制仍不十分清楚，局部血供与新生血管形成可能在子宫腺肌病的发生发展中起着重要作用[1]。其中肾上腺髓质素（ADM）在血管生成过程中有重要的促进作用，可增加血管的通透性和血管生成[2]。本研究采用免疫组化方法检测ADM在子宫腺肌病病灶、在位内膜及正常子宫内膜中的表达情况,旨在探讨血管生成在子宫腺肌病发生、发展中的作用。

1 资料和方法

1.1 研究对象

1.1.1 腺肌病组

选择2008年1月至2011年9月在南方医科大学附属中山市博爱医院因子宫腺肌病行全子宫切除术，术后病理证实为子宫腺肌病的患者40例，取其子宫内膜及部分腺肌病病灶，其中增生期样本20例，分泌期样本20例。患者平均年龄（39.13±4.21）岁。

1.1.2 对照组

选择2008年1月至2011年9月于南方医科大学附属中山市博爱医院因宫颈癌前病变而行全子宫切除术的患者子宫内膜，其中增生期和分泌期各20例，患者术后病理检查已排除子宫肌层及子宫内膜病变。平均年龄（39.61±3.75）岁。

腺肌病组及对照组均为非绝经妇女，于取内膜样本前3个月内未接受过激素类药物治疗。各组患者的年龄无统计学差异。

1.2 研究方法

1）免疫组织化学技术检测方法：ADM兔抗人多克隆抗体由武汉博士德生物工程有限公司提供。光镜下观察子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞胞浆内出现棕黄色颗粒为ADM、免疫组化反应阳性，无棕黄色染色为阴性。使用图像分析系统分析检测结果：每张免疫组化染色切片随机选取3个视野，测试区域A的灰度级GA和面积（m+n），阳性反应产物a的灰度级Gа和面积n。

2）结果判定：采用阳性单位 PU值[3]作为 ADM的表达强度，结果用均数±标准差表示。计算公式：PU=100×︳Gа-GA︳/〔（1-AAа）·GMAX〕

式中 AAа＝n/（m+n），GMAX为测试仪器最大的灰度级256。

1.3 统计学方法

图像分析所得PU值的比较采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

光镜下观察免疫组化结果：在子宫腺肌病病灶内的腺上皮细胞、间质细胞胞浆出现ADM的阳性染色颗粒（封四图1-4）。经图像分析结果见表1。

表1 对照组子宫内膜与腺肌病组在位内膜及病灶ADM的表达 ±s，PU值

表1 对照组子宫内膜与腺肌病组在位内膜及病灶ADM的表达 ±s，PU值

△P<0.05与同组增生期比较，*P＞0.05与对照组比较；★P<0.01与同组在位内膜及对照组内膜比较。

组别分泌期（n=20） P n 增生期（n=20）对照组 40子宫内膜4.59±1.46 7.28±1.49△腺肌病组在位内膜 20 4.87±1.58* 7.91±0.97* P<0.05腺肌病病灶10.81±1.43★ P＞0.05 2011.51±2.03★

3 讨 论

3.1 子宫腺肌病与子宫血管的关系

子宫腺肌病的主要临床表现为痛经、月经过多和子宫增大等。腺肌病患者表层子宫内膜血管增生活跃。采用计算机形态学分析子宫内膜基底层血管，结果显示腺肌病患者的血管数量、面积于增殖期及分泌期均较对照组显著增加[4]。提示血管生成的改变可能为子宫腺肌病的发病机制之一。

3.2 ADM——一种新的内皮细胞生长因子

肾上腺髓质素（ADM）是首先从人嗜铬细胞瘤组织中分离得到的一种血管活性多肽。ADM通过cAMP依赖性蛋白激酶级联反应和细胞内钙离子迁移，抑制血管内皮细胞的凋亡，是一种新的内皮细胞生长因子，可促血管生成[5]。ADM分布广泛,以自分泌、旁分泌和胞内分泌的方式发挥其作用[6]。ADM免疫组化方法研究证实，在人类的子宫肌层和内膜中均分布有ADM及其特异性结合位点。人类子宫上分布着ADM及与其特异结合的位点。体外和体内的人类子宫内膜上均有ADM的免疫反应物质存在,CRLR和RAMR共同表达在相同的细胞上,ADM mRNA也均匀地出现在子宫各种类型细胞上,ADM可诱导内膜细胞cAMP的生成[7]。随着对ADM结构及作用的研究不断深入,越来越多的实验发现,ADM在人类生理和病理情况下均具有重要作用。

3.3 ADM在子宫内膜及子宫腺肌病的表达

子宫内膜血管生成发生在月经周期的不同阶段。子宫内膜的血管形成受各种细胞因子的调节。其中ADM在血管生成过程中有重要的促进作用,可增加血管的通透性和血管生成。以往研究发现，在子宫内膜ADM表达增强，则子宫内膜血管密度增加[8],说明ADM是子宫内膜血管生成的主要因素。在生殖系统,研究发现ADM在正常子宫内膜的增殖晚期开始出现,分泌期逐渐加强。本研究结果显示，ADM在正常对照组内膜及腺肌病组在位内膜的表达，分泌期较增生期明显增强，与Maybin等[9]的研究的结果一致，说明子宫内膜ADM的表达可能受到卵巢激素的调节,在黄体期孕酮可以促进ADM的产生，但是卵巢激素如何影响子宫内膜ADM的表达的具体机制至今尚未明确,有待进一步研究。有研究表明：子宫内膜异位症患者异位内膜ADM表达高于在位内膜,与本研究结果相似，可能是异位的内膜在局部内环境的影响下,生物学特性发生改变,使其更有利于生存、生长。但ADM在子宫腺肌病病灶内的表达，目前国内尚无报道。本研究希望通过研究ADM在子宫腺肌病病灶的表达，揭示子宫腺肌病的临床表现，是否因ADM在子宫腺肌病病灶的表达增强，导致病灶内血管生成增加，而引起子宫腺肌病患者子宫体积增大、痛经、月经量增多、经期延长。

3.4 ADM与子宫腺肌病临床症状的关系

本研究显示：子宫腺肌病病灶内ADM的表达较在位子宫内膜显著增强，并且不受月经周期的影响。腺肌病子宫肌层的血管数量和面积与子宫大小呈正相关，子宫腺肌病病灶内大量ADM的表达，可能增加血管的通透性和血管生成，增加病灶内血管密度，血管扩张，使病灶内血流丰富，充血明显，可能是引起子宫腺肌病患者子宫体积增大、痛经、月经量增多、经期延长的原因之一。

希望通过进一步的研究，来加以证实ADM与子宫腺肌病的发病及临床症状的关系。

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