通脉降脂方对神经元胶质细胞共培养缺氧模型保护作用的研究*

徐 强，郑偕扣，李 烨，武重阳，江海涛，赵英强，孙兰军

（天津中医药大学第二附属医院，天津 300150）

缺血是临床上引起神经细胞损伤最常见的原因，缺血后神经元死亡是一个极其复杂的病理过程，主要表现为坏死和凋亡两种形式，其中凋亡可能决定了最终梗死面积。胶质细胞和神经元是中枢神经系统最主要的细胞成分，其中胶质细胞参与构成中枢神经元生存的微环境，对神经元的发育、生长及损伤后再生发挥着重要作用。由于神经保护剂可减少脑梗死面积，不引发出血，无溶栓、抗凝治疗出血的并发症，用前无需进行详细的病因鉴别诊断，使得早期治疗成为可能，因而神经保护剂的治疗效果和前景是令人鼓舞的。

中药作用的多途径性与脑损伤病理变化的多样性具有针对性效应，其作用靶点不仅在神经元，同时可通过其“伙伴细胞”——星形胶质细胞的介导发挥保护效应。目前已被动物模型和临床试验证实的中药保护剂有银杏、三七皂苷、人参皂苷、补阳还五汤等。通脉降脂方是天津中医药大学第二附属医院院内制剂，长期应用于临床，对于高血压、高脂血症及脑血管病有确切临床疗效，获得了显著的社会效益和经济效益。本方由鹿角、三七、人参、全蝎、水蛭按照 2∶2∶2∶1∶1 组成，具有滋阴益气、活血化瘀功效，前期药理研究证实通脉降脂方能降低血液黏度，增强红细胞变形能力，改善脑组织微循环。基于以上研究基础，本研究从细胞和整体两个方面探讨通脉降脂方神经保护的作用及机制，为临床上应用中药治疗脑血管疾病神经损伤提供实验依据。

本研究采用星形胶质细胞和神经元共培养模型，将神经元细胞接种在胶原包被的3.0 μm的Transwell PTFE微孔膜上，用含阿糖胞苷的培养基培养1周后，将此长满神经元的Transwell PTFE微孔膜转入长有星形胶质细胞的培养孔中，实现神经元和星形胶质细胞的共培养。此种共培养体系既能够较好地模拟在体时的脑内真实环境，反映神经元和星形胶质细胞之间的相互关系，又能够将两种细胞完全分离，避免了普通共培养方法无法将两种细胞分离的缺陷。在缺氧损伤条件下，使用通脉降脂方进行干预，结果显示通脉降脂方能促进神经元细胞和星形胶质细胞活力的提高，降低细胞早期凋亡率，明显减少乳酸脱氢酶的释放，神经元和胶质细胞共培养组疗效优于单独神经元组，并呈现较好的量效关系。

在此基础上，笔者应用干预自发性高血压（SHR）大鼠，从整体动物的层次进一步探讨其作用机制。SHR大鼠是一种被广泛认可的用于研究人类原发性高血压的遗传型动物模型。其在出生后前几个月时间内能够自行发展成为稳定的高血压，同时伴随出现高血压相关的包括脑组织在内的多种靶器官损伤。本研究显示，中药复方通脉降脂方在改善血压、血脂的同时，可明显减少神经元凋亡数目，结果与体外实验一致。提示通脉降脂方对于早期脑损伤的预防有一定价值，为开发促进内源性神经再生的适合于临床应用的药物提供实验依据。

本研究从细胞学和整体动物的不同层次，揭示了中药通脉降脂方综合的神经保护作用，并初步阐明其独特的作用机制，其神经保护作用可能部分通过星形胶质细胞达到保护作用。为临床应用中药治疗神经损伤提供新的依据，并为通脉降脂方进一步深入研究和开发提供了新的思路，对神经损伤的防治有比较重要的意义。