山女鳟人工繁育技术试验

唐敬伟 任 波

（龙江县水产技术推广站 黑龙江 龙江 161100）

（中国水产科学院黑龙江水产研究所 黑龙江 哈尔滨 150010）

前言：山女鳟（Oncorhychus masou masou）属于鲑形目、鲑科、鲑亚科、大麻哈鱼属，原产于日本，是马苏大麻哈鱼的陆封淡水河溪鱼类，属冷水性鱼类。我国于1996年引进，并成功进行了人工繁殖。该鱼特点是终生保留幼鲑斑，体态雍容，色彩典雅，肉质细嫩，品味鲜爽，深受消费者的喜爱，市场价格较高。

图1 山女鳟成鱼

在日本的20多种鲑科鱼类中，被公认为是肉质最好吃、淡水游钓最受欢迎的鱼类，售价相当于虹鳟的2-3倍。又因体形、颜色雍容高稚，历史上就倍受喜爱而被称为“山女鱼”或“山溪女皇”。至上个世纪90年代，日本的餐饮及游钓市场呈现出对山女鳟更加旺盛的需求趋势。而当时的我国养鳟业仅仅是虹鳟鱼单一品种养殖，品种的单一已经成为养鳟业持续发展的限制因素。

1 山女鳟人工繁殖技术研究

1.1 材料和方法

池养山女鳟2年性成熟，产卵排精后死亡率很高，寿命2—3年，多为2年，及少可达4年。山女鳟繁殖时间是10月至11月份，繁殖水温在13℃以下,水温15℃左右开始产卵，怀卵量与鱼体大小成正比例，多在300粒左右，卵重占鱼体重的23—24%。满2年的山女鳟大的可达500g左右。人工养殖条件下山女鳟1周年生长最高可达130g,平均值为56g。

1.1.1 查明性腺达完熟的年龄和完熟时期

黑龙江低温区（即黑龙江水产研究所渤海冷水性鱼类试验站）：每年10月中旬至12月上旬是完熟产卵时期，雄鱼早熟约半个月。22～24月龄的雄鱼100%发育完熟，雌鱼约70%发育完熟，30%的雌鱼需达35～36月龄发育完熟，人繁季节是10月中旬至12月上旬。完熟雌鱼约76%在10月中旬至11月中旬产卵繁殖，24%在11月中旬至12月上旬产卵繁殖。

1.1.2 亲鱼培育技术

在查明性腺发育规律、完熟时期及饲料质量对怀卵量的影响等问题的基础上，经多年时间逐步完善了亲鱼培育技术。

亲鱼培育技术的关键：

①从12-14月龄开始筛选培育后备亲鱼，卵母细胞径1mm左右，此时加强培育可以减少卵母细胞退化数量，增加完熟卵数。

②供筛选的群体尾数应为筛选尾数的3倍以上，这样可以保证优中选优，扩大遗传差异，避免种质退化。

③筛选规格应是中等至上中等的个体，因为大型个体中雄鱼多，小型个体怀卵少。

④选出的个体要体色鲜明，体表粘液多，无外伤。

⑤筛选数量要根据计划采卵数量和平均每尾亲鱼怀卵数量决定。每尾亲鱼怀卵数量根据表5，可认定为650粒，挤腹法采卵，平均每尾可采640粒，剖腹法采卵可采出690粒。

⑥根据池水交换率确定放养密度和放养重量，单位面积放养密度，放养重量应在商品鱼的三分之一以下。

⑦饲料中脱脂鱼粉含量应达到45%以上，粗蛋白50%以上，油脂10%以上。充足的营养可以保证成熟卵生成数量和质量，由于亲鱼培育水温及饲料等培育方法不同，育成的亲鱼规格也不同，尾均采卵数量也不相同。从早春开始用亲鱼专用饲料进行亲鱼专门培育，是提高采卵数量的重要方法。据报道，饲料质量可以影响成熟卵的生成数量。另外，亲鱼规格越大怀卵量越多。如果简单的投喂商品鱼饲料，其雌雄成熟率就会降低，导致产卵率及受精率过低，从而影响苗种的正常生产。

⑧.亲鱼培育池应放在水流上游，排出水溶氧应达6mg/L以上，原因是山女鳟耐污水的能力较其他鲑鱼低。

⑨.采卵前3个月的水温不超过13℃。

1.1.3 人工采卵受精技术

①采卵期的确认：

每年9月份22月龄（包括极少数的13月龄山女鳟雄鱼）鱼开始出现体色变暗，日食量减少的现象，这是亲鱼进入性成熟期的预兆。从此逐渐出现体色变黑、幼鲑斑形状变得不规则、雄鱼上下额变成弯曲状等副性征，部分鱼出现疖疮病、水霉病症状。9月下旬开始对培育的亲鱼进行成熟度检验，用挤腹法采卵，能采出卵，就认定为采卵期已经开始，用同样方法，查明采卵期结束的时间。通过一年的检测查明了采卵期。

黑龙江水产研究所渤海冷水鱼实验站水温低为低温区：10月上旬-12月下旬，此间22月龄以上的雌鱼约70%可采出完熟卵，约30%的雌鱼要待下一年的10月份发育成熟，22月龄雄鱼全部可以采出精液，极少数雄鱼12-13月龄即可以采出精液。采卵高峰是10月中旬至11月中旬。

②雌、雄鉴别方法及分池待产：

9月中旬，因副性征的出现，即可进行雌雄鉴别、分池饲育，这样可便于采卵、采精操作（表1）

表1 山女鳟雌、雄鱼鉴别

③亲鱼熟度鉴别及鉴别间隔期：

完熟雄鱼，轻压腹部即有精液流出，滴入水中即迅速散开。完熟雌鱼，手摸腹部可感到卵粒已经分离，轻压腹部即有卵粒流出。每7d进行一次熟度鉴别。

④采卵、采精方法及比例：

采卵时，一人端脸盆，一人挤卵。挤卵者一手套上纱布或线手套握住雌鱼尾柄，使泄殖孔面向脸盆，此时将亲鱼泄殖孔及附近的水分用毛巾擦干，一手轻压泄殖孔前方的腹部，只要轻轻施加压力，成熟卵随之顺势流出。挤卵过程避免进水，动作要轻快，尽量不要使亲鱼受伤。

采精方法和采卵一样也是用挤腹法人工采精，注意精液一定要避免沾水，因此采精前同样要用干净的毛巾将雄鱼身上的水擦净，同时避免将尿、粪等污物挤到精液里。

受精量为每1万粒卵（约900g）加精液5ml,相当于15尾雌鱼的采出卵加3～4尾雄鱼的精液。雌雄比例为 5∶1 左右。

在采卵时、采精时应根据己查明的怀卵量及怀精量取亲鱼的尾数，这样可以有效的避免授精不良、精液过多等问题，达到最好的授精效果，也可减少不必要的损失。

池养条件下的山女鳟2年性成熟，繁殖后大部分个体死亡，只有少部分个体可以成熟繁殖二次。为提高采卵率，日本对山女鳟采用剖腹法采卵。

⑤授精方式

干法授精 用一脸盆（擦干）接卵，再取精液覆盖卵上，然后用干净羽毛搅拌1分钟使精卵充分接触。慢慢加入一点清水，继续搅拌1min，静止1～2min使卵授精，然后用清水漂洗2～3次（主要是将剩余的精液和污物洗出），待授精卵静水膨胀后装入孵化桶。

湿法授精 把采到的卵、精同时倒入盛水的盆中，使卵授精。

在黑龙江水产研究所渤海冷水性鱼类试验站主要以干法授精为山女鳟主要授精方式。

⑥人工授精技术研发（参考资料）：

在虹鳟鱼人工授精技术基础上研发出新方法、新技术。

单盐等渗液洗卵法人工授精技术：将传统的三盐等渗液，改成NaCl单盐等渗液。实验表明用0.9-1.0%NaCl水溶液洗涤采出卵，具有与三盐等渗液相同效果，可以保证95%以上的受精率。该技术具有新颖性，简化了等渗液配制程序，便于生产应用。

受精卵微流水洗涤膨胀孵化连续作业技术：该技术简化了授精后清水洗卵、静水膨胀操作工艺。授精后不经洗涤将卵立即放入孵化桶内，利用桶内的上升水流洗除多余的精液，并使卵在桶内微流水环境中完成吸水膨胀过程。试验及生产应用证明，该技术具有减少授精后卵的震动次数、简化操作工艺的优越性。授精后1小时之内孵化桶内的上升水流量控制在3L/min以下，可以避免卵的震动，保证较高的发眼率。

单盐等渗液洗卵及授精卵微流水洗涤膨胀、孵化连续作业技术是鲑亚科鱼类人工授精技术的重要改进，具有创新意义。

开发出等渗液浸润卵受精技术，该技术的操作方法是用等渗液洗卵后，使卵浸润在少许等渗液中，等渗液量相当于卵量的一半即可，然后将精液加入，用手搅拌半分钟后加入清水，再用手搅拌1分钟后立即将授精卵移入微流水孵化桶内。该法可使受精率达95%以上。受精量为每1万粒卵（约900g）加精液5ml,相当于15尾雌鱼的采出卵加3-4尾雄鱼的精液。

综上所述，本研究推出的人工授精技术在传统的授精技术基础上，进行了合理的技术改进，推出简便高效的人工授精技术，其操作工艺程序如下：

将15尾雌鱼卵采入接卵网盒；

用0.9-1.0%NaCl水溶液500ml淋洗采出卵1-2遍；

将洗涤后的采出卵移入授精盆；

向盆内加入约相当卵量1/2的0.9-1%NaCl水溶液；

向盆内加入3-4尾雄鱼精液，用手搅拌0.5min；

向盆内加入清水，水量约为卵量的2倍以上，用手搅拌约1min；

将盆内的卵和NaCl水溶液同时移入桶式孵化器的孵化网盒上，一小时之内的注水量为不超过3L/min。

在低温试验基地（即：黑龙江水产研究所渤海冷水性鱼类试验站）利用鲑鳟鱼养殖常规设备如桶式孵化器，平列式出膜孵化槽，流水式稚鱼饲育槽等设备，结合生产进行了人工繁殖技术研究。在探明性腺发育规律、改进6项人繁技术的同时探讨了人工繁殖技术参数，人繁技术已达成熟，确立了山女鳟人繁新技术。

1.1.4 人工孵化及上浮稚鱼饲育技术

黑龙江水产研究所渤海冷水性鱼类试验站根据山女鳟发眼卵及孵化稚鱼规格均与虹鳟相似的原理，利用鲑鳟鱼养殖常规设备如桶式孵化器、平列式出膜孵化槽、流水式稚鱼饲育槽等设备，人工孵化采用了鲑亚科鱼类常规孵化及上浮稚鱼饲育技术。结合生产进行了人工繁殖技术研究。

孵化类型：孵化桶。

孵化用水必须是澄清无污染的水，溶解氧一般是饱和或接近饱和的，适时调节供水量是实施科学孵化饲育管理的主要技术措施。判断供水量是否适当的另一个简便方法是检测排水溶解氧量，达6.5mg/L以上，既为供水量适当。

应用于实际，每个孵化桶中可放受精卵6万～8万粒。

受精卵的发育阶段不同，所需要的温度也不同，温度的累积标志着受精卵的发育阶段。不同的季节，每天不同的温度，受精卵发育所需要的时间也就不同。如表2所示：

表2 山女鳟受精卵发育阶段积温

图1 发眼卵

图2 山女鳟孵化稚鱼

表3 ：渤海站山女鳟受精卵至发眼卵发育积温图

温度，单位∶℃,最大值∶13.40,最小值∶8.66,平均值∶10.88

除影响受精率的因素外，受精卵接触水后因操作引起的卵的震动，也会是造成死卵从而导致发眼率低的重要原因。据报导，受精后卵在水中经30～60min完成吸水过程，吸水过程中的卵，抗振力很弱，甚至会因为振动使卵黄膜破损而死亡。

1.1.5 上浮稚鱼饲育前的准备工作：

受精卵进入发眼期之后，便可从孵化桶中取出：

第一：取出的发眼卵，应先进行简单轻微的冲洗2～3次，将发眼卵上粘黏的污物冲洗干净，放入平列槽内。

第二：用卵盘盛卵，在水中将死卵（在水中经轻微震荡后变白或有白点的卵粒和卵粒无眼点透明的，都是死卵。）挑出。也可以将盛有发眼卵的卵盘取出在避光处挑卵，但是要勤将卵盘放入水中，保持卵的湿润度，这样可以避免发眼卵的缺氧。最好是在水中操作。

第三：将已处理好的发眼卵放在平列槽里，调好水流、水位，盖上盖板，避免光的直接照射，等待发眼卵孵化稚鱼即可。

注意事项：整个过程要保证发眼卵的湿润度，避免缺氧现象，避免光的直接照射，孵化稚鱼阶段要注意水流、水位的调整，观察温度变化，保证发眼卵的出苗率。

1.1.6 上浮稚鱼饲育技术：

以下叙述了稚鱼开始摄食的时间，开口稚鱼饲育方法及放养密度等问题，确立了上浮稚鱼饲育技术。其主要内容是：

① 孵化后积温达200℃.d前后，卵黄囊吸收约1/2时将稚鱼按2万尾/m2的密度分放到开食饲育槽（平列槽），供水量每万尾3.0L/min。

②孵化后积温达300℃.d前后，稚鱼卵黄囊吸收约3/5，开始在水中上层游动时,开始投饵驯饲。

③采用虹鳟用开口饲料，每天投喂6～8次。水温10℃以下日投饲量为稚鱼体重的5%。开口稚鱼尾重约0.12g,在10℃水温下驯饲一个月可达0.4g，稚鱼形成了主动摄食能力，此后即可开始当年鱼（苗种）饲育。

以上叙述主要推出不同水温条件下，受精至稚鱼开食后一个月期间的各发育阶段的孵化、饲育管理技术参数，包括放养密度、供水量、投喂量等，为人工孵化和开口稚鱼的驯饲提供了技术管理依据。

1.1.7 孵化稚鱼过程中的清污问题：

在整个的孵化饲育过程中，除了保证稚鱼的供氧量、供水量、放养密度、投喂量以及温度外，水质的问题也相当重要的，不容忽视的。水质的好坏也是决定稚鱼成活的重要因素之一。所以应及时清除水中污物（如：剩余饵料、已死的稚鱼等）保证水质清澈。

可用羽毛贴槽壁轻轻扫动，这时鱼苗和污物都会扫起，用小网把污物和死鱼捞出，这样可以保证水槽的透水性，把水槽中的水放走一半，可以放走部分污水，再待入水处注入新水便可。

2 结果

在山女鳟被重视的情况下,许多研究人员在繁殖技术上不断创新,研究出许多有效便捷的繁殖技术,但是渤海实验站为保留亲鱼采用的是挤腹采卵，采精法。

在整个繁殖过程中,每一个环节的谨慎都关系着山女鳟繁殖是否成功,重要的繁殖技术更是重中之重。

3 讨论

在本文叙述过程中，分别在采卵、授精的方法上提出了实施剖腹法采卵和单盐等渗液洗卵法，这是两个针对采卵、授精方面有效快速的方法。

山女鳟第1次性成熟后，绝大多数都要死亡，没有必要用挤腹法采卵，改用剖腹法采卵可以大幅度提高采卵效率，也可以将残卵率降至零。

单等渗液洗卵可以提高受精率，简化过程。

受精卵微流水洗涤膨胀孵化连续作业技术：该技术简化了授精后清水洗卵、静水膨胀操作过程，这样可以避免卵的震动，保证较高的发眼率。

单盐等渗液洗卵及授精卵微流水洗涤膨胀、孵化连续作业技术是鲑亚科鱼类人工授精技术的重要改进，具有创新意义。

结论

通过本次学习记录结果说明，山女鳟的亲鱼选择、授精方式、孵化条件等都是山女鳟人工繁殖的重要基础,首先要注重亲鱼的培育和选择，为人工繁殖山女鳟做好准备；其次授精方式恰当运用，直接影响着受精率的提高；再次，孵化条件的优良，决定着山女鳟人工繁殖阶段的成功与否。

山女鳟的繁殖，改变了我国原有的养鳟业品种单一现象，为国家的养鳟业的拓展，提供了基础。在今后的山女鳟繁殖技术中，应多多引用新的科学技术，采用有效新颖的繁殖手法，来提高山女鳟的繁殖率，这样可以大大的满足其社会需求，给山女鳟科研事业做出贡献。