闻剑飞,滚军军,王 强,游永豪,袁玉鹏
(合肥师范学院 体育科学系, 安徽 合肥 230601)
大量研究证实,剧烈运动可使机体内源活性氧产生增多,脂质过氧化反应加强,进而攻击细胞膜,造成细胞结构与功能下降,是引起运动性疲劳损伤的重要原因之一[1-2].通过营养补剂提高机体抗氧化能力及促进疲劳的恢复仍是当前研究的热点问题之一.月季花色素(Rose Anthocyanin)是从月季花中提取的一种酚类色素,具有较强的抗氧化活性.本研究旨在观察补充月季花色素在递增负荷运动中的抗氧化作用,以期为研制一种新型的抗氧化营养补剂提供一定的实验依据.
雄性SD大鼠40只,体重(300±10)g,按照标准啮齿类动物饲养.湿度(50±5)%,室温22~25℃,每日自然光照.适应性饲养三天后,随机分成3组:安静对照组(Control Group,CG)、运动组(Exercise Group,EG)、运动+补药组(Exercise+Rose Anthocyanin Group,ER);EG、ER 按不同时刻又分别分为2个亚组,即运动后即刻组、运动后48h组,每组8只.ER组大鼠每日定时给予浓度为0.5%月季花色素灌胃,训练对照组灌胃等量蒸馏水.
采用动物跑台,EG、ER组进行坡度为0,初始速度为15m/min,每周递增5m/min,第1周持续30min/次,每周递增10min/次.连续进行4周,每周训练6次,周日休息.
分别在运动后即刻、48h腹腔注射戊巴比妥钠进行麻醉;主动脉生理盐水灌流后,迅速取同侧腓肠肌冰生理盐水清洗,滤纸汲干,置于塑料离心管中投入液氮冷冻,然后放入-30℃冰箱保存待测.
超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性测定采用黄嘌呤氧化酶法;丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量测定采用硫代巴比妥酸荧光(TBA)法,总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)测定采用比色法,试剂盒由南京建成生物工程研究所提供,严格按试剂盒流程操作.紫外-可见分光光度计(TU-1810)测定.
所有数值均以“均数±标准差”(X±S)表示.统计分析采用SPSS for Windows 12.0版统计软件.组间比较采用单因素方差分析(One-Way ANOVA),显著性差异水平为P<0.05.
表1数据显示,与CG组相比,EG组在运动后即刻、48h肌组织中MDA的含量均明显升高(P<0.05);ER组运动后即刻肌组织中MDA的含量也明显升高(P<0.05),但低于EG0组(P<0.05),ER48h组MDA的含量明显低于EG48h(P<0.05).
表1 各组大鼠骨骼肌中MDA的变化(n=8)
表2 各组大鼠骨骼肌中SOD、T-AOC的变化(n=8)
表2数据显示,与CG组相比,EG组大鼠在运动后即刻骨骼肌中SOD、T-AOC的活性均明显降低(P<0.05),运动后48h仍未恢复到安静水平(P<0.05);ER组大鼠运动后即刻骨骼肌中SOD、T-AOC的活性均明显降低(P<0.05),但明显低于EG组(P<0.05),运动后48h肌组织中SOD虽低于安静组,但无差异显著性(P>0.05).
运动过程中骨骼肌中的脂质过氧化反应加强,导致细胞结构与功能下降,是引起运动性疲劳的重要原因之一.实验结果表明,4周递增负荷跑台训练后,大鼠骨骼肌中MDA的含量明显升高(P<0.05),提示运动中内源性氧自由基生成增加,机体氧化与抗氧化系统失调,导致脂质过氧反应增强.本实验结果与以往研究相一致[3-4].组织中SOD的活性可反映机体清除氧自由基的能力,T-AO反映机体抗氧化系统的总体水平.在正常情况下,机体内氧自由基的产生与清除处于相对平衡状态.而运动中随着氧耗的增加,氧自由基大量生成,致使机体抗氧化酶活性下降已得到许多研究证实.Kostic等[5]研究表明,人体在进行大强度的体育运动后,氧自由基含量显著增加,血清中SOD、GSH-PX等抗氧化酶活性显著降低.Hwabg[6]研究表明,大强度运动训练后大鼠血清中ROS的产生大量增加,机体的抗氧化能力明显下降.本研究结果表明,递增负荷跑台训练后各组大鼠骨骼肌中SOD、T-AOC活性均明显降低(P<0.05),运动后48h仍未恢复至安静水平.
月季花色素是从月季花中提纯出来的一种花青素类物质,在代谢过程中不会对机体造成毒副作用,因此在健康食品的开发方面有很大的应用价值.Hurst等[7]研究表明,从蓝莓中提取的花青素可有效降低MDA的含量,提高小鼠SOD、GSH-PX、CAT活性,进而抑制由运动引起的骨骼肌细胞损伤.本研究结果表明,补充月季花色素组大鼠运动后骨骼肌中MDA含量明显降于EG组(P<0.05),而骨骼肌中SOD、T-AOC的活性明显高于EG组(P<0.05).提示补充月季花色素可抑制运动引起的脂质过氧化反应,降低机体内抗氧化酶的消耗,进而使机体的抗氧化能力保持在较高水平.
递增负荷运动可导致机体脂质过氧化反应增强,氧化-抗氧化系统失衡;补充月季花色素可有效降低大鼠骨骼肌组织中MDA含量,提高SOD活性及总抗氧化能力,进而保护骨骼肌细胞的结构与功能,提高运动能力.
〔1〕Baker JS,Bailey DM,Hullin D,et al.Metabolic implications of resistive force selection for oxidative stress and markers of muscle damage during 30 s of high-intensity exercise[J].Eur JAppl Physiol,2004,92(3):321-7.
〔2〕Close GL,Ashton T,Cable T,et al.Eccentric exercise,isokinetic muscle torque and delayed onset muscle soreness:the role of reactive oxygen species[J].Eur J Appl Physiol,2004,91(5-6):615-621.
〔3〕M cArdle A,van der Meulen JH,Catapano M,et al.Free radical activity follow ing contraction-induced injury to the extensor digitorum longusmuscles of rats[J].Free Rad Bio Med,1999,26(9-10):1085-1091.
〔4〕潘玮敏,杨建昌.不同负荷训练对大鼠骨骼肌细胞膜自由基代谢、膜流动性及Na+-K+-ATP酶活性的影响[J].西安体育学院学报,2004,24(3).
〔5〕Kostic N,Caparevi?Z,Marina D,et al.Impact of acute exercise on antioxidant enzymes activity and lipid status in blood of patients w ith hypertension[J].Vojnosanit Pregl,2009,66(9):695-9.
〔6〕Hwang HJ,Kwak YS,Yoon GA,et al.Combined effects of sw im training and ginseng supplementation on exercise performance time,ROS,lymphocyte proliferation,and DNA damage follow ing exhaustive exercise stressInt[J].JVitam Nutr Res,2007,77(4):289-96.
〔7〕Hurst RD,W ells RW,Hurst SM,et al.Blueberry fruit polyphenolics suppress oxidative stress-induced skeletal muscle cell damage in vitro[J].Mol Nutr Food Res,2009,54(3):353-363.