外界温度和放置时间对网织红细胞及其参数测定的影响

李玉芹，江峰锦

（1.四川省医学科学院·四川省人民医院检验科，成都 610072；2.重庆市渝北区人民医院检验科，重庆 401120）

网织红细胞是晚幼红细胞脱核后仍含有残留RNA的红细胞，用煌焦蓝染色后，根据RNA含量的多少着色呈点状及网状。其传统分型方法是在显微镜下进行分类计数（计数1 000个红细胞中的网织红细胞），根据形态将其分为4型，此种方法费时费力，受人为因素的影响较大。随着科学的不断发展，自动化血液细胞分析仪器的广泛使用，网织红细胞计数也由全自动血细胞分析仪逐步代替手工操作，并将网织红细胞精确分为高荧光强度网织红细胞（HFR）、中荧光强度网织红细胞（MFR）、低荧光强度网织红细胞（LFR）3部分。但影响血细胞分析仪计数的因素很多，除了仪器本身的精密度与准确性、试剂质量、操作者自身水平的高低、标本采集等因素外，标本采集后保存温度及放置时间也是很重要的影响因素。为此，笔者对53例不同温度下放置不同时间的静脉血标本测定其网织红细胞及其参数，以了解时间和温度对网织红细胞及其参数测定的影响，现报告如下。

1 材料和方法

1.1 材料

53例标本来源于我院门诊病人，标本收集以EDTA－K2盐抗凝真空管（BD公司生产）采集新鲜静脉抗凝全血。

1.2 仪器和试剂

日本希森美康公司生产的Sysmex XE－2100全自动血细胞分析仪及其配套试剂；质控品是Sysmex公司生产在线质控物，分为高、中、低3个水平。

1.3 方法

1.3.1 Sysmex XE－2100血细胞分析仪各项参数均经校准，每天用Sysmex公司生产高、中、低3个水平的质控品进行室内质控。

1.3.2 检测 将静脉血标本采集后立即上机检测（用手动方法，为保证结果的可靠性，减少人员操作误差，所有实验均由1人完成）网织红细胞及其参数（此次计数为0h结果），然后将标本均匀分成两组（用未加抗凝剂的空白管），一组放室温（24℃），另一组放冰箱（4℃），分别在2、4、6、8、10、12、24、48、72h测定网织红细胞及其参数。

1.4 统计学方法

采用SPSS 12.0软件进行统计学处理，统计数据以均数±标准差（±s）形式表示，运用配对t检验进行统计学计量分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 室温（24℃）不同放置网织红细胞及其参数测定结果

网织红细胞及其参数在12h内与即刻值比较差异无统计学意义（P＜0.05），12h之后与即刻值比较差异有统计学意义（P＜0.05）（见表1）。

2.2 冰箱（4℃）不同放置时间网织红细胞及其参数测定结果

与即刻值进行比较，网织红细胞百分率和HFR在72h内差异无统计学意义（P＞0.05），IRF、LFR、MFR值与即刻值比较，差异有统计学意义（P＜0.05）（见表2）。

表1 室温（24℃）不同放置时间网织红细胞及其参数测定结果

表2 冰箱（4℃）不同放置时间网织红细胞及其参数测定结果

3 讨论

网织红细胞是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞，是反映骨髓造血功能的重要指标。在贫血诊断、疗效观察、肿瘤化疗及骨髓移植等方面都有重要的临床价值［1－4］。

随着检验技术的不断发展，目前对网织红细胞的检测技术已由原先简单传统的手工计数法衍变成现在的血细胞分析仪检测，不仅能更精确地计数网织红细胞的个数，还能将网织红细胞精确地分为HFR、MFR及LFR 3部分，即“分群”。荧光越高，表示网织红细胞含核酸越多，细胞也就越幼稚。IRF为MFR和HFR之和（MFR＋HFR），表示幼稚细胞占总Ret的百分比。而对骨髓移植和肿瘤化疗病人主要是观察网织红细胞参数即“分群”的变化，特别是分析 HFR 或IRF的变化［5－8］.

网织红细胞的发育是从晚幼红细胞、HFR、MFR到LFR的动态变化过程。为探讨标本离体后温度和时间对网织红细胞及其参数的影响，我们进行了上述试验。从表1可以看出网织红细胞及其参数在室温（24℃）12h内与即刻值比较无统计学差异，12h之后与即刻值比较均有统计学差异；从表2可以看出，4℃ 保存的标本72h内网织红细胞百分率和HRF与即刻值比较差异无统计学意义，IRF、LFR、MFR值与即刻值比较24h内差异无统计学意义，24h之后差异有统计学意义。从表1、表2的均值可以看出，在4℃和24℃条件下，IRF均呈降低趋势，而LFR有升高趋势，其结果与丛玉隆等［8］报道有一定差异，与白壵等［10］报道一致。在4℃时网织红细胞及其参数在72h内均值改变不明显，而24℃时较明显，对于这种现象，我们认为可能是由于低温条件下，Ret成熟较慢，RNA消失延迟；还有可能是标本离体后，在较高温度条件下越幼稚的网织红细胞向成熟阶段发育速度越快，而到了较成熟阶段（LFR）发育速度有所减慢所致。

总之，为了保证检验结果的准确性，为临床提供可靠的网织红细胞及其参数结果，我们认为在测定网织红细胞及其参数时，标本离体后在室温12h、4℃24h内应完成检测。

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