水飞蓟提取物对烫伤创面愈合作用的实验研究

卫 昊 万朝阳 王 莹 陕西中医学院（咸阳712046）

水飞蓟为菊科植物水飞蓟Silybum marianum（L.）Gaertn.的干燥成熟果实，具有清热解毒，保肝利胆等功效，其黄酮类成分如水飞蓟素、水飞蓟宾等生物活性广泛，临床多用于治疗各型肝病，外用治疗烫伤尚未报道，课题组前期对水飞蓟复方制剂进行了抗炎和镇痛作用研究，效果良好［1］。在此基础上本实验主要研究君药水飞蓟提取物对烫伤创面的治疗作用。

1 材料

1.1 试药和试剂 水飞蓟软膏剂的制备［2］准确称取水飞蓟500g，用65%乙醇回流提取两次（第一次七倍量乙醇提取1h，第二次六倍量乙醇提取40min）过滤，合并滤液，加热浓缩，回收乙醇。浓缩至800mL加适量水沉淀，静置3h，待沉淀析出抽滤。弃去滤液，滤渣置烘箱干燥2h，取出，研成细粉。称量约20g，即每1g 细粉相当于25g药材。准确称取10g水飞蓟提取物粉末，加入到20g熔融的凡士林和20mL 植物油中，搅拌均匀，精密称取0.5g羟苯乙酯作为防腐剂。美宝湿润烧伤膏（汕头市美宝制药有限公司生产，批号：1220303A），乙酰水杨酸片（西安美辰药业有限公司生产，批号：1210497.8）；凡士林、乙醇，硫化钠，水合氯醛，羟苯乙酯，二甲苯，CMC－Na；

1.2 实验动物 健康昆明小鼠120只，雌性，由西安交大医学院实验动物中心提供，体重18～22g，动物合格证号：SCXK（陕）2012－003。

1.3 实验器材 电热恒温鼓风干燥箱（DHG－9075A），调温电热套（ZNHW 型），电子天平GH－202（220／51g～0.1mg／0.01mg），打耳器（广州飞迪生物科技有限公司），手术刀，镊子。

2 方法与结果

2.1 水飞蓟对小鼠烫伤创面愈合作用的影响［3］取昆明小鼠60只，适应性饲养3d后按体重随机分为空白对照组、模型组、润湿烧伤膏组、水飞蓟组（140g／kg，70g／kg），用10%硫化钠进行背部脱毛，隔日除空白组外其余各组小鼠均以5%的水合氯醛腹腔注射麻醉，将3cm×4cm 铁棒置于沸水中10min，取出铁棒立即贴于脱毛小鼠背部无毛部位并持续10s，复制深Ⅱ度烫伤创伤面积约为1cm×2cm，伤后立即给药，1 次／d，连续给药20d。给药10d后参考文献［4］测创面愈合率待烫伤伤口基本愈合后，剪取愈合伤口组织称重，在80℃下烘干48h后再次称重，测定创面组织含水量。含水量＝（组织湿重－组织干重）／组织湿重×100%。结果与空白对照组比较，水飞蓟各剂量组能显著缩短伤口愈合时间，提高创面愈合率，水飞蓟大剂量组显著降低创面组织含水量（P＜0.05）。见表1。

表1 水飞蓟对小鼠烫伤创面愈合作用的影响（±s，n＝12）

表1 水飞蓟对小鼠烫伤创面愈合作用的影响（±s，n＝12）

注：与空白对照组比较，ΔP＜0.05（下同）

分 组剂量（g／kg）创面愈合时间（d）创面愈合率（%）创面组织含水量（mg）——模型组—17.51＋1.26 35 65.73＋1.44润湿烧伤膏组50 15.03＋1.71 70 62.44＋3.47水飞蓟大剂量组140 13.89＋1.53 75 60.69＋1.34Δ水飞蓟小剂量组空白对照组———70 15.27＋1.06 60 61.47＋1.25

2.2 水飞蓟对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响［4］取昆明小鼠40只，随机分为5组，每组8只。分别为为空白对照组，乙酰水杨酸组，水飞蓟大、中、小（140g／kg、70g／kg、35g／kg）剂量组。空白对照组给予等量生理盐水，其余各组灌胃水飞蓟混悬液，1次／d，连续给药3d，末次给药后1h，将二甲苯均匀涂于各组小鼠左耳前后两面，每只小鼠50μL，2h后将小鼠脱颈椎处死，沿耳廓基线剪下两耳，用直径9mm 打孔器在耳部同一位置打下圆形耳片，用精密电子天平称取耳片重量，计算小鼠耳廓肿胀度及抑制率。肿胀度（mg）＝左耳片重－右耳片重；抑制率（%）＝（生理盐水组平均肿胀度－给药组平均肿胀度）／生理盐水组平均肿胀度×100%。结果与空白对照组比较，水飞蓟140g／kg，70g／kg剂量组可明显减轻小鼠耳肿胀（P＜0.05）。见表2。

表2 水飞蓟对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的抑制作用（±s）

表2 水飞蓟对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的抑制作用（±s）

组 别动物数（只）剂量（g／kg）耳肿胀度（mg）抑肿率（%）空白对照组8—15.10＋1.54—阿司匹林组8 1.1 3.98＋0.63Δ 73.64水飞蓟大剂量组8 140 4.73＋1.31Δ 68.68水飞蓟中剂量组8 70 8.97＋1.72Δ 40.60水飞蓟小剂量组8 35 14.35＋0.43 4.97

3 讨 论 水飞蓟具有清热解毒之功效，其有效成分包括水飞蓟素、水飞蓟宾、异水飞蓟宾、β－谷甾醇等，其中水飞蓟素等黄酮类成分能直接清除活性氧，对抗脂质过氧化，维持细胞膜的流动性，对烫伤创面有较好的保护作用［5］。水飞蓟所含的β－谷甾醇等植物固醇类有一定的抗炎作用，而且没有可的松类激素药物的副作用，其预防炎症性反应与细胞内Ca2＋浓度失调相关；此外，β－谷甾醇等植物固醇还有一定的解热镇痛作用。本次实验结果表明，水飞蓟提取物可明显促进烫伤创面愈合，在缩短结痂时间和缩小疤痕面积方面更优于湿润烧伤膏，表明水飞蓟醇提物有良好的促进皮肤伤口愈合作用。

［1］ 郭惠玲，卫 昊，武可泗，等.烫伤灵对小鼠抗炎、镇痛作用的实验研究［J］.陕西中医学院学报，2008，31（6）：63－64.

［2］ 李玉山，王经安.水飞蓟素提取纯化工艺研究［J］.化学工程师Chemical Engineer，2009，58（2）：58－59.

［3］ 孙同柱，付小兵.重组人表皮生长因子促进兔烫伤创面愈合的实验研究［J］.实验动物科学与管理，2000，17（4）：12－14.

［4］ 刘小平，卢金刚，陈 谱，等，芦荟凝胶外涂对大鼠浅度烫伤创面愈合及其相关因子表达的影响［J］.陕西医学杂志，2006，35（6）：646－648.

［5］ 刘笃宽.水飞蓟的药理与临床研究概况［J］.陕西中医，1984，5（4）：37－39.