双黄连冻干粉针剂不良反应的研究进展

张 旗 崔秀荣 马海波 绪 扩 雷海民 李 强

(北京中医药大学中药学院，北京，100102)

双黄连粉针剂是注射用中药粉针剂，由金银花、黄芩、连翘3味中药按一定比例提取精制而成，具有清热解毒、疏风解表的功效，用于治疗外感风热所致的风热、咳嗽、咽痛等症，是具有抗病毒及抗细菌双重作用的药物，1992年12月被国家中医药管理局指定为全国中医院首批急诊必备中成药［1］。但是双黄连注射液引起的临床不良反应病例日趋增多，国家药品不良反应监测中心已在2001年和2009年两次通报了双黄连注射剂的超敏反应［2］。统计结果表明，双黄连注射液的变态反应的发生率达75%［3］。为了更好地合理利用和更有效地开发双黄连粉针剂，我们总结了近年来双黄连冻干粉针不良反应物质基础的研究结果。

1 不良反应

2007年6月以前有关双黄连注射剂不良反应的病例报告涉及28个省市，共有11 083例。其中一般不良反应(皮疹、瘙痒、发热、寒颤、腹痛、腹泻、恶心、呕吐、头痛、头晕、心悸等)有10 777例;严重不良反应(过敏性休克、过敏性哮喘、呼吸困难、昏迷、抽搐、重症皮疹、死亡等)有306例［4］。通过检索1978－2007年医药学期刊，收集双黄连注射剂不良反应详细病案422例，应用文献计量学和统计学方法分析，发现双黄连注射剂可引起多系统不良反应，其中以皮肤损害(40.32%)和全身性损害(17.79%)比例最高;患者中，男性227例(54.05%)，女性193例(45.95%);原患疾病以上呼吸道感染最多，为179例(74.27%)［5］。

图1 双黄连冻干粉针的主要有效成分

2 不良反应的物质基础分析

双黄连粉针剂是由金银花、黄芩和连翘3味中药精制而成，具有抗菌、抗病毒、解热抗炎、增强免疫功能等药理作用，临床应用广泛，但同时不良反应又非常突出，我们通过总结近年来不良反应物质基础研究，包括原料的化学成分、中间体、代谢组分与双黄连粉针剂不良反应之间的关系的研究，以及筛选致敏成分的最佳动物模型，为探索双黄连粉针剂不良反应真正的物质基础提供思路。

2.1 双黄连冻干粉针的主要有效成分

2010 版《中国药典》规定绿原酸、黄芩苷、连翘苷为注射用双黄连(冻干)质量检测的指标成分，含量限度分别为8.5～11.5mg/支，128～173mg/支，1.4～2.1mg/支［6］。

绿原酸、黄芩苷、连翘苷的结构式见图1。

2.2 不良反应与组分间的关系

2.2.1 主成分研究 1)绿原酸。国外学者早期就有对绿原酸致敏性做过研究，Freedman 等对已知的咖啡中的酚类化合物进行了系统的评价，经试验结果提示CA(绿原酸)可能是绿咖啡中的主要过敏原［7］。对CA的过敏性进一步研究，ASA 试验表明致敏家兔心内注射绿原酸攻击产生不平静、极度呼吸困难直到死亡，PCA 试验表明当抗血清稀释度为1∶10、1∶100、1∶1000时产生反应，稀释度为1 ∶5000、1 ∶10000 不产生反应［8］。然而，对CA 致敏性持反方观点的主要为Layton研究小组，通过以上试验Lyaton 等认为真正致敏原是高分子物质［9］。国内学者通过比较绿原酸和双黄连粉针剂的潜在致敏性，认为绿原酸对BN 大鼠致敏性低于含等级量绿原酸的双黄连粉针剂［10］。李瑾翡等通过对注射用双黄连与绿原酸进行了免疫原性比较研究，在大鼠、小鼠、豚鼠等同种动物、异种动物间PCA试验结果均显示注射用双黄连引起过敏反应的程度高于绿原酸，从而推测注射用双黄连作为一个复方引起不良反应的可能性大于绿原酸本身［11］。吴晓东、杨华蓉等通过全身主动过敏试验和皮肤被动过敏试验研究了不同纯度绿原酸提取物及其制剂的致敏性，证明了绿原酸不引起过敏反应，低纯度绿原酸提取物中共存的大分子物质与致敏性密切相关［12］。2)黄芩苷。通过薄层色谱法研究各工艺产品的成分时发现，样品的毒性反应与其成分汉黄芩苷有关，过敏反应与其成分黄芩苷有关［13］。运用酶联免疫双抗夹心法检测黄芩苷的致敏性，呈阳性反应;运用酶联免疫指纹图谱法检测黄芩苷的致敏性，致敏率为86.28%，证明了黄芩苷为双黄连注射剂的致敏原［14］。3)连翘苷。连翘含三萜皂苷，静脉给药易发生循环系统、呼吸系统、血液系统等的不良反应，并且皂苷与血液接触产生溶血作用［15］。

2.2.2 中间体研究 通过对双黄连粉针剂主要组成部分进行系统的化学成分研究，共分离鉴定了20个化合物，分属于黄酮、绿原酸、环烯醚萜苷、皂苷等类化合物，这与金银花原植物化学成分类型相同，实验表明制剂过程对化合物类型没有影响［16］。

2.2.3 代谢组分研究 通过比较研究大鼠灌胃双黄连粉针剂及各单味药提取物入血前后主要成分的变化，实验得出，灌胃双黄连后8个主要成分入血，随着给药时间的延长，绿原酸和黄芩苷等原型成分的相对含量逐渐减少，而它们的代谢物逐渐增加;未发现有明显连翘成分入血，提示双黄连粉针剂中直接加入金银花、连翘提取物可能导致直接注射入血的连翘苷、绿原酸含量过高，从而引发不良反应［17］。

2.3 筛选致敏成分的动物模型

屈会化等以中药注射剂中的绿原酸为指标，制备中药注射剂全组分过敏原特异性IgE 检测芯片，用来检测鉴定临床用药过敏患者血清中的过敏原［18］。徐国良等模拟双黄连注射剂进入体内后的致敏过程建立了双黄连注射剂的过敏症新西兰纯种兔模型［19］。郭姗姗等发现双黄连注射液能使BN 大鼠和豚鼠产生明显的全身性速发型超敏反应，以双黄连注射液为示范对中药源性致敏原所致过敏反应进行评价，说明BN大鼠的敏感性可能高于豚鼠［20］。梁爱华等认为Beagle 犬可作为临床前评价中药注射剂类过敏反应的动物模型［21］。赵玉斌等研究双黄连注射液主要致敏原与HLA－DRB 基因多态性、特异性IgE 抗体的相互关系，在分子水平上明确有关双黄连注射液过敏反应的基因位点［22］。

3 讨论

双黄连注射剂的不良反应除了与致敏性物质基础相关之外，还与生产工艺、质量控制、临床不合理用药、附加剂等多种因素有关。近年研究双黄连注射液不良反应的原因成为热点，主要从原料、中间体以及代谢成分与双黄连冻干粉针剂不良反应的关系进行研究，但尚未明确真正致敏的化学成分。因此，研究双黄连冻干粉的不良反应物质基础的工作至关重要，同时需要筛选出能够评价中药注射剂过敏反应的最佳的动物模型，为阐明双黄连注射液过敏反应机制、预防其过敏反应提供科学依据。

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