胃肠舒片的溶出度研究＊

刘德胜，龙姣燕，张树平，刘孟安

(滨州医学院，山东 烟台 264003)

医院制剂胃肠舒片(批准文号为鲁药制字Z1620030009)是由大黄、枳壳、甘草等数种中药组成的复方中药制剂，经10多年临床使用及试验证明，其对胃肠动力障碍性疾病具有满意疗效[1－4]。体外溶出度测定法是一种模拟口服固体制剂在胃肠道中崩解和溶出的体外试验法，可更好地对药物在胃肠道中的溶出过程进行评价。目前，尚未见对该制剂体外溶出度进行考察的文献报道。为此，笔者采用高效液相色谱(HPLC)法，以方中大黄游离蒽醌和枳壳主要成分柚皮苷为指标，考察了胃肠舒片的体外溶出度，为评价和控制该制剂的质量提供依据。

1 仪器与试剂

TU－1901型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);Waters 600E型高效液相色谱仪(含有2468紫外可见分光检测器，在线脱气机以及Empower化学工作站，美国Waters公司);电子天平(梅特勒托利多仪器上海有限公司);SB2200－T型超声波清洗器(上海必能信超声有限公司);台式高速冷冻离心机(Biofuge Primo);RCZ－8A型溶出度测定仪(天津大学精密仪器厂);漩涡震荡仪(海门市其林贝尔仪器制造有限公司)。胃肠舒片由滨州医学院附属医院药剂科提供;芦荟大黄素(批号110795－201007)、大黄酸(批号 110757－200906)、大黄素(批号 110756－201010)、大黄酚(批号 110796－201017)、大黄素甲醚(批号110758－201013)以及柚皮苷(批号110722－200610)对照品均由中国药品生物制品检定所提供;甲醇为色谱醇，其他试剂均为分析纯，水为哇哈哈纯净水(脱气处理)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验[5－6]

色谱柱:Thermo BDS 柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流动相:乙腈 －水溶液(17 ∶83);检测波长:230 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:室温;进样量:20 μL。按照理论板数不低于1 500计，分离度不低于1.5。此色谱条件下，柚皮苷保留时间约为7.80 min，色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

2.2 溶出试验条件选择

溶出方法:取样品，以0.1%的盐酸水溶液为溶出介质，体积选用900mL(符合漏槽条件)，转速为100r/min，温度为(37±0.5)℃，依法操作。分别在不同时刻下取样，采用HPLC法测定。在该条件下，桨法的溶出效果明显优于转篮法，故选用桨法测定本品的溶出度。

溶出介质:由于所测指标成分5种游离大黄蒽醌及柚皮苷的极性差别较大，溶出介质对各组分的溶出影响较大，因此对溶出介质进行了选择，考察了胃肠舒片在水、人工胃液、人工肠液、不同pH的磷酸缓冲盐溶液和0.1%和0.5%的十二烷基硫酸钠中的溶出情况。结果表明，在0.5% 的十二烷基硫酸钠溶液样品中上述组分溶出最多，故选择0.5% 的十二烷基硫酸钠溶液为溶出介质。

转速:量取经脱气处理的0.5%的十二烷基硫酸钠900 mL，用转篮法，转速分别设定为50，75，100 r/min。取3批样品，精密称定，于 5，15，30，60，90，120，180，240，480 min 时取样 1.0 mL，滤过，同时补充已预热至(37±0.5)℃的溶出介质1.0 mL，依法测定，计算累积溶出百分率。结果显示，100 r/min转速的溶出速率相对较快且溶出的稳定性也较好，因此选用100 r/min的转速。

100% 溶出量测定:取本品10片，研磨，精密称取相当于平均粒重的样品量，置900 mL溶出介质中，(37±0.5)℃水浴，转速为100 r/min，6 h后，取适量，过滤，取续滤液，在上述色谱条件下测定芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚以及柚皮苷含量，作为胃肠舒片100% 溶出时芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚以及柚皮苷的量。

2.3 含量测定方法学考察

标准曲线制备:分别称取芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚以及柚皮苷对照品，用甲醇溶解制备成质量浓度分别为 240.0，150.0，100.0，190.0，100.0，400 g/L 的对照品贮备溶液。采用倍比稀释法制成系列质量浓度的溶液，在上述色谱条件下，取20 μL注入液相色谱仪，记录色谱峰面积。以峰面积(Y)为纵坐标、对照品质量浓度为横坐标(X)进行线性回归。结果见表1。

精密度试验:取6 h样品溶出液，重复进样5次，每次20 mL，记录色谱图面积。结果芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚以及柚皮苷的 RSD 分别为 1.0% ，0.7% ，1.1% ，0.8% ，1.3% 和 0.7%。

表1 各组分线性关系测定结果

重复性试验:取同一批样品，按溶出度测定方法重复测定6次。结果芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚以及柚皮苷的 RSD 分别为 1.2% ，1.0% ，0.8% ，0.9% ，1.5% 和0.8%(n=6)。

加样回收试验:取已知含量的样品粉末约0.5 g，精密称定，精密加入6种对照品的混合甲醇溶液适量，挥干，置900 mL溶出介质中，置(37±0.5)℃水浴中，不断搅拌6 h，取液，过滤，取续滤液，在上述色谱条件下测定各组分含量，计算加样回收率。结果见表2。

表2 6种成分加样回收试验结果(X ± s，n=6)

2.4 溶出曲线绘制

按照2.2项下方法制备样品溶液，依照拟订的色谱条件，测定各组分的峰面积，求出每粒的溶出量，再与100%溶出量比较得出每粒的累积溶出百分率。3批样品测定后取平均值，计算平均溶出量，以不同时间平均累计溶出率为纵坐标、时间为横坐标，使用Origin 8.0软件绘制溶出曲线。见图2。

图2 3批胃肠舒片累积溶出曲线

3 讨论

本试验中建立了胃肠舒片多种指标成分为溶出指标的溶出方法，采用HPLC法测定了大黄中的5种游离蒽醌:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚以及枳壳中的主要成分柚皮苷的溶出，方法简单，结果准确可靠，适用于胃肠舒片的溶出度以及质量控制。由于所测定的6种指标成分极性差别较大，溶出介质对各组分的溶出影响较大，通过对溶出介质的选择，结果表明，以0.5%十二烷基硫酸钠水溶液作为胃肠舒片的溶出介质最能体现其在体内的溶出情况。

[1]李 琼，刘同慎，刘孟安.胃肠舒片对胃肠功能障碍大鼠胃肠道乙酰胆碱及P物质的影响[J].中国中医急症，2010，19(1):96－98.

[2]李 琼，刘同慎，刘孟安.胃肠舒片对胃肠功能障碍大鼠乙酰胆碱的影响[J].辽宁中医杂志，2010，37(9):1 839 －1 841.

[3]郭金秀，刘孟安，王慧凯.中药胃肠舒片对胃肠动力障碍小鼠胃排空及肠推进影响的实验研究[J].辽宁中医杂志，2010，37(4):751－752.

[4]刘孟安，赵 岩，张树平，等.胃肠舒片的药理与毒理实验研究[J].时珍国医国药，2007，10(18):2 460 －2 461.

[5]刘德胜，吕青志，栾海云，等.胃肠舒片中总蒽醌及5种游离蒽醌的含量测定[J].中药材，2011，34(9):1 456 －1 459.

[6]董军伟，王华新，李国川，等.高效液相色谱法测定润降利膈颗粒中柚皮苷含量[J].中国药业，2011，20(13):25.