系统性红斑狼疮患者血浆IL－17和IL－23的表达及意义

王 晓，华春秀，柴华旗

(1南阳市中心医院，河南南阳473009;2南阳医学高等专科学校;3苏州大学附属第一医院)

近年研究发现，Th17细胞在自身免疫性疾病发病过程中起着重要作用［1，2］。IL－17 和 IL－23 是与Th17细胞密切相关的两种细胞因子，类风湿性关节炎［3］、干燥综合征［4］、系统性硬化［5］等患者血浆和(或)病变组织中 IL－17 和(或)IL－23 表达增高，推测其可能参与了这些疾病的发病过程。但系统性红斑狼疮(SLE)作为常见的自身免疫性疾病，IL－17、IL－23是否也参与了其发病过程，这方面的研究鲜见报道，为此我们进行了相关的初步探讨。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 本文SLE患者33例，均符合1997年美国风湿病协会修正的SLE分类诊断标准。其中男3例、女30例，年龄18～56(36.52±11.82)岁。患者均排除近期感染、慢性阻塞性肺疾病、支气管哮喘、肝病、肿瘤等疾病和过敏体质者。根据SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分随机将患者分为活动组(SLEDAI评分≥10分)17例、非活动组(SLEDAI评分＜10分)16例;在诊断SLE的前提下，如患者伴有持续尿蛋白＞0.5 g/d，或多次尿蛋白≥+++，或细胞管型尿(可为红细胞、血红蛋白、颗粒或混合型管型)，或估算的肾小球滤过率小于60 mL/min，此类患者纳入肾炎组(15例)，无上述表现者纳入非肾炎组(18例)。以同期28例健康体检者作为对照组，其中男2例、女26例，年龄23～53(37.29±8.62)岁。

1.2 实验方法 采集所有受试者空腹静脉血2 mL，EDTA－K2抗凝，收集标本后30 min内1 000×g离心力离心15 min，分离获得血浆，－70℃低温冰箱冻存待测。IL－17和IL－23的检测采用ELISA法，试剂盒由上海西唐生物科技有限公司提供，操作严格按照试剂盒说明书进行。

1.3 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件，正态分布计量资料采用±s表示，比较采用独立样本t检验、单因素方差分析、双变量相关分析等。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组血浆IL－17、IL－23水平比较 见表1。

表1 三组血浆IL-17、IL-23水平比较(pg/m L，±s)

表1 三组血浆IL-17、IL-23水平比较(pg/m L，±s)

注:与活动组比较，#P ＜0.05，##P ＜0.01

组别 n IL－17 IL－23对照组 28 33.66 ±23.55## 76.11 ± 57.26##活动组 17 59.10 ±19.52 221.61 ±105.28非活动组 16 44.93 ±14.67# 101.32 ± 45.22##

2.2 SLE、IL－17、IL－23 水平与 SLEDAI评分的关系SLE患者血浆IL－17水平与SLEDAI评分呈正直线相关(r=0.39，P ＜0.05);IL－23 水平与 SLEDAI评分呈正直线相关(r=0.60，P ＜0.01)。

2.3 SLE患者血浆IL－17和 IL－23水平与肾脏损害的关系 见表2。

3 讨论

Th17细胞是新发现的一类CD+4T细胞，主要分泌 IL－17A、IL－17F、IL－22、IL－21 和 TNF－α 等细胞因子，其中IL－17A即IL－17是最主要的效应分子，具有很强的促炎作用;而IL－23主要由活化的抗原递呈细胞分泌产生，是IL－12家族的新成员，在分子结构上，与IL－12拥有共同的IL－12p40亚基，但二者分别具有独特的 IL－23p19 亚基和 IL－12p35 亚基，IL－23对Th17细胞的增殖存活起着重要作用［6］。动物实验表明，IL－17和IL－23在自身免疫性疾病的病理过程中起着重要作用［7，8］，深入地研究 Th17细胞及其相关细胞因子可能对于自身免疫性疾病的治疗有重要意义。

表2 SLE肾炎组与非肾炎组患者血浆IL-17、IL-23 水平(pg/m L，±s)

表2 SLE肾炎组与非肾炎组患者血浆IL-17、IL-23 水平(pg/m L，±s)

注:与对照组比较，#P ＜0.05，##P ＜0.01

组别 n IL－17 IL－23对照组28 33.66 ±23.55 76.11 ± 57.26肾炎组 15 51.63 ±20.25# 161.74 ±107.85##非肾炎组 18 52.73 ±17.54## 164.57 ± 98.33##

在狼疮鼠模型的实验研究中，Hsu等［9］发现，BXD2小鼠血清中IL－17表达和脾脏中Th17细胞数量均明显增加，BXD2小鼠可自发形成生发中心，使用IL－17抑制剂时可抑制生发中心的形成，加入外源性IL－17可促进生发中心的形成，并且能够促进IgM和IgG型自身抗体分泌。Dong等［10］对狼疮性肾炎患者外周血单个核细胞(PBMC)进行体外培养时也发现了类似现象，经 IL－17刺激后培养液中IgG、抗dsDNA抗体和IL－6表达明显增高，表达量与IL－17水平呈剂量依赖性，抗IL－17抗体可终止这种作用。两项研究结果提示IL－17可能通过直接或间接作用促进自身反应性B淋巴细胞激活，从而介导自身免疫的发生。

为阐明IL－17在SLE患者体内的表达水平及其与疾病的关系，本研究进行了初步的探索，实验表明，在疾病活动期，血浆IL－17表达明显增高，并且与疾病活动呈正相关性，但与肾脏损害与否没有明显关系;Wong等［11］也发现，SLE 患者血浆中 IL－17表达水平明显增高，且与SLEDAI评分具有明显的相关性;并使用酶联免疫斑点技术对SLE患者PBMC中能够分泌IL－17的细胞进行了检测，结果发现IL－17分泌细胞明显增多。但 Kurasawa等［12］对 16例SLE患者和24例系统性硬化患者进行研究时发现，系统性硬化患者血清IL－17表达明显增高，但其中9例SLE患者血清IL－17表达无明显异常(作者未注明SLE患者疾病活动性)。刘冠贤等认为，SLE活动期PBMC中IL－17 mRNA表达明显增高，但患者血浆IL－17水平正常，可能与IL－17释放至胞外后很快降解有关。

另外，本研究对IL－17上游的细胞因子IL－23进行了检测，发现SLE患者活动期IL－23的表达亦明显增高，与疾病活动性相关，与肾脏损害与否无关。Huang等通过RT－PCR方法亦检测到活动期SLE患者IL－23p19亚基和IL－12p40亚基表达比非活动期SLE患者高，但经激素或其他免疫抑制剂治疗的患者IL－23p19亚基和IL－12p40亚基明显减低。两项研究结果均表明，SLE患者活动期IL－23表达增高明显，提示IL－23可能参与了SLE疾病的发生发展过程，尤其是疾病活动期的病理过程。

［1］Cua DJ，Sherlock J，Chen Y，et al.Interleukin－23 rather than interleukin－12 is the critical cytokine for autoimmune inflammation of the brain［J］.Nature，2003，421(6924):744－748.

［2］Murphy CA，Langrish CL，Chen Y，et al.Divergent pro－and antiinflammatory roles for IL－23 and IL－12 in joint autoimmune inflammation［J］.JExp Med，2003，198(12):1951－1957.

［3］Kotake S，Udagawa N，TakahashiN，etal.IL－17 in synovial fluids from patients with rheumatoid arthritis is a potent stimulator of osteoclastogenesis［J］.JClin Invest，1999，103(9):1345－1352.

［4］Nguyen CQ，Hu MH，Li Y，et al.Salivary gland tissue expression of interleukin－23 and interleukin－17 in Sjögren＇s syndrome:findings in humans and mice［J］.Arthritis Rheum，2008，58(3):734－743.

［5］Komura K，Fujimoto M，Hasegawa M，etal.Increased serum interleukin 23 in patients with systemic sclerosis［J］.J Rheumatol，2008，35(1):120－125.

［6］McGeachy MJ，Bak－Jensen KS，Chen Y，etal.TTGF－beta and IL－6 drive the production of IL－17 and IL－10 by T cells and restrain T(H)－17 cell－mediated pathology［J］.Nat Immunol，2007，8(12):1390－1397.

［7］Lubberts E，Koenders MI，Oppers－Walgreen B，et al.Treatment with a neutralizing anti－murine interleukin－17 antibody after the onsetof collagen－induced arthritis reduces joint inflammation，cartilage destruction，and bone erosion［J］.Arthritis Rheum，2004，50(2):650－659.

［8］Yen D，Cheung J，Scheerens H，etal.IL－23 is essential for T cellmediated colitis and promotes inflammation via IL－17 and IL－6［J］.JClin Invest，2006，116(5):1310－1316.

［9］Hsu HC，Yang P，Wang J，etal.Interleukin 17－producing T helper cells and interleukin 17 orchestrate autoreactive germinal center development in autoimmune BXD2 mice［J］.Nat Immunol，2008，9(2):166－175.

［10］Dong G，Ye R，ShiW，etal.IL－17 induces autoantibody overproduction and peripheral bloodmononuclear cell overexpression of IL－6 in lupus nephritis patients.［J］.Chin Med J(Engl)，2003，116(4):543－548.

［11］Wong CK，Lit LC，Tam LS，et al.Hyperproduction of IL－23 and IL－17 in patientswith systemic lupus erythematosus:implications for Th17－mediated inflammation in auto－immunity［J］.Clin Immunol，2008，127(3):385－393.

［12］Kurasawa K，Hirose K，Sano H，et al.Increased interleukin－17 production in patients with systemic sclerosis［J］.Arthritis Rheum，2000，43(11):2455－2463.