抗新城疫免疫球蛋白IgA+IgY的疗效试验

范国英,陈桂香,王新华

（河南科技学院,河南新乡453003）

新城疫是危害养鸡业的重大疫病,尽管有较好的疫苗,由于多种原因该病仍时有发生,给养鸡场造成严重经济损失[1].对于新城疫目前尚无有效的化学药物可用于治疗.IgA+IgY制品的研制成功给养鸡场解除了后顾之忧,一旦发病及时治疗可获得良好的疗效,从而减少经济损失.IgA+IgY是良好的天然抗体球蛋白,是目前任何药物都无法取代的特异性生物活性物质,它能中和进入体内的病毒,可用于新城疫、禽流感等多种传染病的预防和治疗[2-3].本试验采用从高免蛋清和蛋黄中提取和纯化的免疫球蛋白IgA+IgY用于对比治疗人工感染和自然感染新城疫的雏鸡,研究免疫球蛋白IgA+IgY的治疗和预防效果.

1 材料与方法

1.1 试验动物

54日龄非免疫雏鸡,自养.

1.2 试验材料

速发型亲内脏性新城疫病毒株（VVNDV）为F48E10,河南省农业科学院畜牧兽医研究所提供.IgA+IgY滴度为28,自行制备.

1.3 试验方法

1.3.1 人工感染试验 试验动物176只,A组32只（预防试验组）；B组32（治疗实验-1）；C组25只（治疗实验-2）；D组35只（治疗实验-3）；E组20只（自然感染组）；F组32只（攻毒对照组）,动物隔离试验室分笼隔离饲养.试验期24 d[4].

试验前逐只检测NDHI滴度,NDHI滴度低于24的鸡可供试验用.A、B、C、D、E和F组每只鸡接种VVNDV（F48E10尿囊液）0.2 mL.A组于接种病毒的同时注射样品2 mL/只；B、C、D组于鸡只出现症状后（精神沉郁、食欲减退、腹泻等）分别注射样品1.0 mL/只、1.5 mL/只、2.0 mL/只,次日再注射1次.继续饲养观察到不再有病鸡.

1.3.2 自然感染试验 E组与B、C、D、F组同室饲养,不接种病毒使其自然感染,鸡没精神,采食量减少,拉稀,发病后用IgA+IgY进行治疗,每只鸡每天注射2 mL,连用2 d.继续饲养观察到不再有病鸡.

2 结果与分析

2.1 临床症状与病理变化

潜伏期：4月2日接种病毒,4月6日各组均出现精神沉郁、食欲障碍.潜伏期在72～96 h之间.人工感染组鸡群发病后6 d自然感染组突然死亡2只,次日全群发病,出现典型的新城疫症状和病理变化.

临床症状：病鸡精神沉郁、食欲减损或废绝.冠髯暗红,拉白色/黄绿色稀粪.发病2～3 d后部分鸡出现神经症状.

病理变化：剖检死亡鸡可见气管内有粘液,气管黏膜出血.腺胃黏膜出血,肠道黏膜出血,有局灶性溃疡.肾脏肿大,苍白,肾小管内有尿酸盐沉积.

2.2 死亡率和保护率

IgY+IgA对鸡新城疫的预防和治疗效果见表1.

表1 自然感染组、人工感染组死亡率和保护率Tab.1 The death and conservancy rate about natural infection group and artificial infection group

由表1可知,IgY+IgA对鸡新城疫的预防效果为96.87%；治疗试验组平均保护率为76.85%；治疗试验组平均死亡率为23.15%；对照组死亡率为87.50%；试验组平均死亡率比对照组死亡率下降72.49%；试验组平均保护率比对照组存活率提高391.68%.

3 讨论

人类的免疫球蛋白有5类：IgG、IgA、IgM、IgD和IgE.家禽的免疫球蛋白只有IgY、IgM、IgA+IgY,IgY相当于人类和哺乳动物的IgG,也有人把禽类的IgY称为IgG.IgY存在于血液中,是禽类的体液免疫系统的重要组成部分,它可经血液循环进入卵黄成为母原抗体.IgA是一种分泌性球蛋白,存在于呼吸道、消化道、眼结膜、泌尿生殖道的黏膜等处构成体液免疫的外部屏障.IgY在卵黄和血液中的含量相当,已被广泛应用,即所谓的卵黄抗体.近来我们发现鸡的蛋清中含有大量IgA,其含量有时超过卵黄中的IgY,这是由于输卵管黏膜上皮细胞分泌的大量IgA混入蛋清中所致.大量试验证实IgA+IgY有同样的生物活性,可用于治疗相应的疫病[5-6].本试验数据表明IgA+IgY对人工和自然感染新城疫有确实的治疗效果.预防试验保护率达96.87%；自然感染病例治愈率为94.44%.在本试验几种治疗剂量下,人工发病治疗保护率最高达到85.71%,安全可靠,疗效显著.IgA+IgY是良好的天然抗体球蛋白,是目前任何药物都无法取代的特异性生物制剂.它能中和进入体内的病毒,可用于新城疫、传染性法氏囊病、禽流感等多种传染病的预防和治疗.根据免疫学原理还可以制备出预防和治疗动物、禽类乃至人类传染性疾病的多种制剂[7-8].

目前市场上销售的所谓高免卵黄注射液只是简单地把蛋黄打碎,含有大量杂质和经蛋传递的病原微生物,往往有严重的不良反应.经过一年多的试验,我们研制出一套提取和纯化工艺,分别从蛋清和蛋黄中提取出IgA+IgY,经过纯化、浓缩和严格除菌,制备出注射用IgA+IgY制剂,经试验对新城疫的治疗效果十分理想.

[1]余传霖,叶天星,陆德源,等.现代医学免疫学[M].上海：上海医科大学出版社,1998.

[2]李翠,王在时,关孚时,等.鸡新城疫高免血清的制备[J].中国兽药杂志,2008,42（2）：30-31.

[3]王明俊.兽医生物制品学[M].北京：中国农业出版社,1997.

[4]武建国.实用临床免疫学检验[M].南京：江苏科学技术出版社,1989.

[5]李良铸,李明晔.最新生化药物制备技术[M].北京：中国医药科技出版社,2001.

[6]王彩虹,高齐瑜,孙斌,等.鸡新城疫疫苗点眼免疫后哈氏腺中IgA、IgM、IgG型浆细胞的数量变化及分布特点[J].畜牧兽医学报,2002,33（5）：504-507.

[7]董辉.鸡新城疫HI抗体水平及带毒状况调查[D].泰安：山东农业大学,2010.

[8]侯凯俪,翟利娟,葛佳静,等.黄芪、白术水煎剂对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响[J].中兽医医药杂志,2012（5）：25-27.