陈建衡等
【摘 要】目的:研究和探讨中药水蛭素的药理作用,为临床开发应用提供理论依据。方法:取小鼠和大鼠,随机分模型对照组、中药水蛭素大剂量组、中药水蛭素小剂量组,连续灌胃给药6-15天。单核细胞吞噬活性实验,小鼠腹腔注射0.5%的鸡红细胞悬液,取腹腔洗液,电热恒温水浴箱中孵浴,丙酮、甲醇液固定,染色,油镜下观察单核细胞吞噬鸡红血球的数目。足跖肿胀抑制实验,最后一次给药1h后,于大鼠右后跖腱膜下注入1%角叉菜胶,分别测定致炎后不同时间内足跖肿胀程度。结果:各用药组与模型对照组相比较,具有显著性差异。结论:中药水蛭素能明显提高小鼠单核细胞的吞噬活性,具有促进细胞免疫的作用,同时水蛭素对角叉菜胶致炎的大鼠足跖肿胀具有较强的抑制功效。
【关键词】中药水蛭素;单核细胞吞噬活性;足跖肿胀
水蛭的应用在我国已有两千多年的历史,是传统医药中经典的活血化瘀中药,为环节动物水蛭科蚂蟥宽体金线蛭(Whitmania pagra Whitman)的全体, 其主要有效成分是水蛭素,广泛用于临床治疗各种疑难病症,且无明显的毒副作用。为了更深入的开发中药水蛭素的药理作用,我们对该药进行了基础实验研究,现报告如下。
1 实验材料
1.1 动物:昆明种健康小白鼠,雄性,体重20±0.5g,合格证号:动管质字(2010)第189号,山东省动物实验中心提供。Wistar大白鼠,雄性,体重150±5g,合格证号:动管质字(2010)第256号,山东省动物实验中心提供。
1.2 药品:中药水蛭素,山东省医学科学院中医药实验室提供。
1.3 试剂:丙酮溶液(分析纯),甲醇溶液(化学纯),山东新华制药总厂生产,批号20100802。角叉菜胶,广东宏发试剂有限公司生产,批号20090819。
1.4仪器:双目电子显微镜,江苏南京医疗器械公司生产。精密扭力天平,山东永远科技公司生产。电热恒温水浴箱,上海实验仪器总厂生产。
2 实验方法
2.1中药水蛭素对单核细胞吞噬活性的影响
① 动物分组:取雄性小鼠45只,随机分成3组,每组15只。模型对照组、
中药水蛭素大剂量组,中药水蛭素小剂量组。
② 动物用药:模型对照组给予同体积的生理盐水;实验大剂量组给予中药水蛭素2.8g/kg;实验小剂量组给予中药水蛭素1.4g/kg,每日灌胃给药1次,每次0.6ml。连续灌胃给药15天,于第16天小鼠腹腔注射0.5%的鸡红细胞悬液,次日处死动物,取腹腔洗液滴于玻璃片上,置37℃电热恒温水浴箱中孵浴30分钟,丙酮、甲醇液中固定,瑞氏液染色,电子显微油镜下观察单核细胞吞噬鸡红血球的数目,并计算吞噬指数及吞噬率。
2.1中药水蛭素对足跖肿胀的抑制作用:
① 动物分组:取雄性大鼠36只,随机分成3组,每组12只。模型对照组、中药水蛭素大剂量组,中药水蛭素小剂量组。
② 动物用药:模型对照组给予同体积的生理盐水;实验大剂量组给予中药水蛭素2.8g/kg;实验小剂量组给予中药水蛭素1.4g/kg,每日灌胃给药1次,每次1.5ml。连续给药6天,最后一次给药1h后,于大鼠右后跖腱膜下注入1%角叉菜胶0.5u/只,分别测定致炎后不同时间内足跖肿胀程度。
3 结果
3.1统计学分析:采用SPSS12.0统计软件进行方差分析t检验,研究数据均以 ±S表示。各用药组与模型对照组相比较,具有显著性差异。
3.2.实验表明:中药水蛭素能明显提高小鼠单核细胞的吞噬活性,具有促进细
胞免疫的作用,大小剂量组吞噬指数和吞噬率均P< 0.02,见表1。同时中药水
蛭素对角叉菜胶致炎的大鼠足跖肿胀具有较强的抑制功效,大小剂量组P<0.05~0.01,见表2。
4 讨论
中药水蛭味咸性苦,归肝经,具有活血化瘀、通经络的功效,广泛用于临床治疗各种疑难病症,受到国内外医学工作者的高度关注。水蛭素是中药水蛭的活性成分,一种多肽类蛋白。现代医学研究表明,水蛭素活性成分是一种强有力的抗凝素,含有凝血酶抑制剂,凝血因子Xa抑制剂,血小板聚集抑制剂,血小板糖蛋白拮抗剂。水蛭素能显著的降低血液粘度,中和凝血酶元,阻止血液凝固,促进血液循环,对抗ADP诱导的血栓形成,同时中药水蛭素还具有良好的镇痛和抑制肿瘤细胞增殖的作用。本课题组所做的基础实验证实,水蛭素能明显提高小鼠单核细胞的吞噬活性,具有促进细胞免疫的作用,同时对角叉菜胶致炎的大鼠足跖肿胀具有较强的抑制功效。中药水蛭素含有多种药理活性,具有非常广阔的应用前景。
传统医药是一个伟大的宝库,现代医学已逐渐打开了它古老的大门,并用药理实验和基础研究来阐述中医学的理论,必将产生广阔的市场前景和深远的社会意义。
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