黄芪注射液联合阿苯达唑对华支睾吸虫病患者Th1/Th2细胞因子的影响研究

袁金富，袁 杰，罗 元，廖云姣

华支睾吸虫是华支睾吸虫病的病原体，其成虫寄居在人体肝脏肝胆管内，通过机械活动、代谢产物造成肝组织的损伤[1]，同时人体的细胞免疫和体液免疫均发生一系列的变化。研究显示，Th1/Th2细胞因子的变化在华支睾吸虫病的发病及免疫病理损伤过程中起到了重要作用[2]。通过调节Th1/Th2细胞因子的水平可对华支睾吸虫病起到治疗作用。本研究观察华支睾吸虫病患者体内Th1/Th2细胞因子的变化及黄芪注射液联合阿苯达唑对Th1/Th2细胞因子的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2010年6月—2011年12月通过华支睾吸虫粪检显示虫卵阳性且未经过任何治疗、除外其他肝病的华支睾吸虫病患者46例为病例组，其中男27例，女19例；年龄23～56岁，平均(36.7±13.2)岁。根据随机数字表法分为对照组和观察组，每组23例。对照组男13例，女10例，平均年龄(36.3±14.9)岁；观察组男14例，女9例，平均年龄(37.1±15.3)岁。同时选择同期华支睾吸虫粪检虫卵阴性且除外其他寄生虫感染或其他各种肝病的体检健康者23例为正常组，其中男16例，女7例；年龄24～53岁，平均(38.2±14.3)岁。3组受检者的性别构成、年龄具有均衡性。

1.2 治疗方法 对照组予阿苯达唑治疗，400 mg/次，口服，3次/d，连服3 d。观察组在口服阿苯达唑的基础上予5%葡萄糖注射液+40 mg黄芪注射液，静脉滴注，1次/d，连用14 d。两组患者均于治疗前及治疗后4周时采集清晨空腹静脉血，分离血清待测。正常组于研究开始时采集空腹静脉血，分离血清，检测相关指标。

1.3 观察指标

1.3.1 肝功能指标 采用全自动生化分析仪(Olympus-AU2700，日本)检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和总胆红素(TBIL)水平。

1.3.2 血清白介素2(IL-2)、白介素4(IL-4)、干扰素γ(IFN-γ) 采用双抗体夹心法检测血清IL-2、IL-4、IFN-γ水平。试剂盒由上海蓝基生物有限公司提供，测定仪器为Bio-Red公司生产的2550-EIA型酶联仪。

1.3.3 粪检虫卵转阴率 分别于治疗前和治疗后4周收集患者粪便，用改良加藤厚膜涂片法对虫卵进行计数，根据虫卵数量进行感染分度，比较两组转阴率。根据每克粪便中虫卵数(EPG)分为：EPG≤1 000个为轻度感染，1 000个

1.3.4 不良反应 观察患者在用药过程中的不良反应。

2 结果

2.1 各组治疗前后ALT和TBIL水平比较 治疗前3组ALT和TBIL水平比较，差异均有统计学意义(P<0.05)；其中对照组和观察组ALT和TBIL水平较正常组升高，差异均有统计学意义(P<0.05)；对照组与观察组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后观察组ALT和TBIL水平较对照组降低，差异均有统计学意义(P<0.05，见表1)。

Table1 Comparison of levels of ALT and TBIL in each group before and after treatment

组别例数ALT(U/L)治疗前 治疗后TBIL(μmol/L)治疗前 治疗后正常组2346±5 - 7.52±2.11 -对照组2389±13*64±1042.28±8.24*26.51±6.29观察组2387±11*51±1043.41±7.34*16.17±7.32F(t)值135.95△31.17214.22△53.10P值0.0000.0000.0000.000

注：ALT=丙氨酸氨基转移酶，TBIL=总胆红素；与正常组比较，*P<0.05；-无此项；△为F值

2.2 各组治疗前后血清IL-2、IL-4、IFN-γ水平比较 治疗前3组IL-2、IL-4、IFN-γ水平比较，差异均有统计学意义(P<0.05)；其中对照组和观察组IL-2、IFN-γ水平较正常组降低，IL-4水平较正常组升高，差异均有统计学意义(P<0.05)；对照组与观察组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后观察组IL-2、IFN-γ水平较对照组升高，差异均有统计学意义(P<0.05)；两组IL-4水平比较，差异无统计学意义(P>0.05，见表2)。

Table2 Comparison of levels of IL-2,IL-4 and IFN-γ in each group before and after treatment

组别例数IL-2治疗前 治疗后IL-4治疗前 治疗后IFN-γ治疗前 治疗后正常组2395±11 -83±9 -38±9 -对照组2349±17*69±12107±14*89±1122±8*29±7观察组2346±15*81±14108±12*86±1121±8*36±8F(t)值75.34△18.1431.83△0.1938.64△31.14P值0.0000.0000.0000.6610.0000.000

注：IL-2=白介素2，IL-4=白介素4，IFN-γ=干扰素γ；与正常组比较，*P<0.05；-无此项；△为F值

2.3 粪检虫卵转阴率 对照组治疗前轻度感染21例，中度感染2例；观察组治疗前轻度感染20例，中度感染3例，两组均无重度感染病例。治疗后，对照组中仅2例中度感染者未转阴，转阴率为91.3%(21/23)；观察组23例患者全部转阴，转阴率为100.0%。两组粪检转阴率比较差异无统计学意义(χ2=2.091，P>0.05)。

2.4 不良反应 治疗过程中对照组2例患者出现腹痛、恶心等症状；观察组2例患者出现腹痛、恶心，1例患者出现头晕症状，均未做特殊处理，患者可耐受。两组不良反应发生率(8.7%与13.0%)比较差异无统计学意义(χ2=0.224，P>0.05)。

3 讨论

华支睾吸虫病患者的肝功能存在不同程度的异常，主要表现为转氨酶及胆红素等指标的升高[3]，其原因与华支睾吸虫寄生导致宿主胆管的异常扩张，管壁增厚，甚至造成胆管阻塞，胆汁滞留以及合并感染等有关[4]，严重时可导致肝实质纤维组织大量增生，肝实质发生萎缩[5]。而除上述因素外，已有研究表明人体的免疫系统失衡与肝损伤有密切关系。人体在寄生虫感染后其机体的免疫系统发生改变，而人体的细胞因子免疫调节网络在寄生虫感染损伤中起到了重要作用[6]。IL-2、IL-4、IFN-γ是Th1和 Th2 细胞在抗原或丝裂原刺激下分泌产生的重要细胞因子，其表达水平的不同与机体生理或病理过程密切相关[7]。其中，IL-2是人体细胞因子免疫调节网络中重要因子之一，可诱导T、B淋巴细胞增殖分化，并能增强自然杀伤(NK)细胞杀伤活性，它的正常或异常表达与机体生理或病理过程密切相关[8]。IL-4是 Th2 细胞分泌的细胞因子，可单独维持Th2细胞及 B 细胞的生长和分化[9]，而Th2细胞有重要的抗炎作用，且可通过负调节机制抑制Th1细胞介导的免疫反应而发挥抗炎作用[10]。IFN-γ由Th1细胞产生，亦具有多种生物活性，是细胞因子网络的重要组成部分，是维持机体和细胞功能自我稳定的防御性物质，其在体内有复杂的免疫调节作用，可诱导巨噬细胞依赖性免疫反应，增强NK细胞的细胞毒作用，介导细胞免疫应答，从而发挥潜在的致炎症作用[11]。

据此，对于华支睾吸虫病患者的治疗，除常规的驱虫药物应用外，还需要通过调节机体免疫系统，抑制机体的免疫损伤，减轻机体的炎症反应。阿苯达唑作为一种高效广谱驱虫新药，通过抑制寄生虫肠壁细胞胞质微管系统聚合和延胡索酸还原酶系统，阻断虫体对多种营养和葡萄糖的吸收，阻碍三磷酸腺苷的产生，从而导致虫体糖原耗竭，抑制寄生虫的生存和繁殖[12]。

中医认为黄芪具有补气升阳、固表止汗、托疮排脓、消肿生肌的功能；现代药理研究表明，黄芪含黄芪苷类、多糖类、黄酮类、氨基酸、微量元素、胆碱、叶酸等多种化学成分，具有多种药理作用[13]。黄芪注射液的主要成分是黄芪甲苷，其具有舒张血管、强心利尿、增强组织抗缺氧能力、防止脂质过氧化、抑制内皮素释放、抑制中性粒细胞的聚集和活化、减轻肝脏缺血再灌注损伤、增强肝脏耐受药物毒性等多方面作用。同时，还可调整和改善机体的细胞免疫和体液免疫水平，使机体的免疫失衡恢复正常水平[14-16]。

本研究结果显示，华支睾吸虫病患者的ALT及TBIL水平均较正常组升高，说明存在不同程度的肝损害。治疗后，对照组和观察组的粪检转阴率及不良反应发生率均无差异，单用阿苯达唑的对照组患者ALT及TBIL降低程度不及联合使用黄芪注射液的患者。而进一步观察血清细胞因子水平发现，华支睾吸虫病患者的IL-2、IFN-γ水平较正常组下降，而IL-4水平升高，说明机体的细胞免疫功能存在异常，而细胞因子IL-2、IL-4、IFN-γ可能参与了华支睾吸虫感染引起的肝损伤的发生发展过程。经治疗后，IL-2、IFN-γ水平回升，IL-4水平回落，说明治疗后机体的免疫功能趋于正常，同时，观察组IL-2、IFN-γ改善程度较对照组明显。说明，在使用阿苯达唑基础上联合使用黄芪注射液可通过调节机体的免疫系统功能，减轻机体的炎症反应，从而抑制肝实质纤维化，减轻肝组织损伤，起到保护肝细胞的作用，然而其具体机制尚需进一步研究。

1 方悦怡.华支睾吸虫病防治[J].华南预防医学,2007,33(2):70-72.

2 李妍.华支睾吸虫感染小鼠模型的建立及其免疫机制的初步研究[D].徐州医学院,2008.

3 崔巍巍.华支睾吸虫病血清酶学肝脏病理学实验研究[J].临床和实验医学杂志,2007,6(4):15-17.

4 黄文柱.重症华支睾吸虫病的临床特点[J].中国实用医药,2007,2(14):28-30.

5 杨绍基.寄生虫性肝硬化的诊断和治疗进展[J].新医学,2001,32(8):493-494.

6 高翔.Th1/Th2细胞因子对肝吸虫致病机制的影响及黄芪联合阿苯哒唑治疗的研究[D].哈尔滨医科大学,2006.

7 赵伟.细胞因子在华支睾吸虫感染中作用的研究[D].哈尔滨医科大学,2010.

8 高霏,卞涛.白介素2诱导的T细胞激酶与T细胞及相关炎症免疫性疾病的研究进展[J].国际呼吸杂志,2010,30(3):180-184.

9 刘艳华,程小星.自然杀伤T细胞在抗感染免疫中的作用研究进展[J].国际免疫学杂志,2010,33(3):229-231.

10 王瑜,夏超明.Th1/Th2极化相关因子在血吸虫病肝纤维化发生发展中的作用[J].中国血吸虫病防治杂志,2010,22(4):384-387.

11 谢晶日,蔡林宏.抗病毒药物影响慢性乙型肝炎患者IFN-γ水平的研究进展[J].实用肝脏病杂志,2010,13(4):309-311.

12 陈芳.阿苯达唑片治疗肝吸虫的临床疗效观察[J].中国现代药物应用,2011,5(17):81-82.

13 阴健.中药现代研究与临床应用[M].北京:学苑出版社,1993：593.

14 张国用.中药黄芪的药理作用及其临床应用研究[J].实用心脑肺血管病杂志，2012，20(6)：1059.

15 于亮，段绍斌，居来提，等.黄芪注射液对两次打击大鼠致多器官功能障碍综合征中心肌和血管内皮细胞损伤的影响[J].中国全科医学，2010，13(3)：967.

16 李宪章.黄芪温心组方治疗慢性心力衰竭患者的疗效观察[J].实用心脑肺血管病杂志，2012，20(3)：437.