2010-2011年我院新生儿败血症病原菌分布及耐药性研究

夏卫良 华春珍 朱银燕 王琦婧 徐立群 黄邢邢

2010-2011年我院新生儿败血症病原菌分布及耐药性研究

夏卫良 华春珍 朱银燕 王琦婧 徐立群 黄邢邢

目的 探讨新生儿败血症的病原菌分布及其耐药性，为临床经验性诊治提供科学依据。方法 选取疑诊为新生儿败血症的住院患儿常规进行血培养。将系统提示阳性的血培养瓶及时取出，划种于固体培养基上，经细菌自动鉴定系统（Vitek 2-compact）进行菌种鉴定和药敏试验。结果 确诊为新生儿败血症113例，共培养出细菌117株，血培养阳性率10.2%，革兰阳性菌92.3%，革兰阴性菌仅占7.7%。凝固酶阴性葡萄球菌93株，占79.5%，其中表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌最多见，分别为49.6%和12.4%。葡萄球菌对苯唑西林的耐药率高达81%，所有阳性球菌均对万古霉素敏感，亚胺培南对革兰阴性杆菌保持较强抗菌活性。结论 葡萄球菌是新生儿败血症的主要致病菌，且该菌对苯唑西林耐药率高，临床医师应根据药敏试验结果选择抗生素。

新生儿 败血症 病原菌 耐药性

新生儿败血症是我国新生儿期常见的感染性疾病，是新生儿致死或致残的主要原因之一。该病早期症状不典型，并且因病原菌种类的不同，患者的临床表现和病情进展有很大差别，医生在治疗时应根据病原菌选择抗生素。因此，研究新生儿败血症病原菌的分布及其耐药性具有重要意义，能为临床早期经验治疗提供依据。

1 对象和方法

1.1 对象 选取我院2010-01—2011-07拟诊为新生儿败血症的住院患儿1 108例，在使用抗生素前，严格无菌操作采集全血标本，常规进行血培养。经培养确诊为新生儿败血症113例，男63例，占55.8%，女50例，占44.2%，男女比例1.26∶1，年龄1～28d，平均6.8d，其中≤7d 80例，占70.8%，＞7d 33例，占29.2%，早产儿9例，占8.0%。基础疾病分布显示，先天性心脏病9例，新生儿肺炎19例，新生儿脐炎16例；白细胞计数＜5×109或＞15×109为99例，占90.8%，超敏C反应蛋白（hs-CRP）＞10mg/L有9例，占8.5%。

1.2 方法 使用的液体血培养瓶（编号259794）、固体血培养基（直径9cm）、细菌自动鉴定系统（Vitek 2-compact）和细菌鉴定卡（GN和GP）、药敏试验卡（GN13和GP67）均为法国生物梅里埃公司产品。全血标本经恒温培养，将系统提示阳性的血培养瓶及时取出，划种于固体血培养基上，35℃隔夜培养。挑取菌落，革兰染色分类后，经Vitek 2-compact进行菌种鉴定和药敏实验。所有菌株的药敏试验参照美国临床和实验室标准化研究所（CLSI）的指南M100-S20版进行操作和结果判读。

1.3 统计学处理 采用SPSS17.0统计软件，病原菌耐药率的比较采用χ2检验。

2 结果

2.1 培养结果 共送检新生儿血培养标本1 147例次，其中113例共117次培养到致病菌，阳性率为10.2%，其中4例患儿2次均分离到病原菌：2例先后分离得到表皮葡萄球菌和人葡萄球菌，1例先后分离到屎肠球菌和人葡萄球菌，1例同时分离到肺炎克雷伯杆菌和溶血葡萄球菌。

2.2 病原菌分布 血培养分离到病原菌共117株，其中革兰阳性菌108株，占92.3%，革兰阴性菌9株，占7.7%。革兰阳性菌中，凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）93株，占全部病原菌的79.5%；最常见的是表皮葡萄球菌，共60株，占51.3%，其次是溶血葡萄球菌，共16株，占12.8%，人葡萄球菌12株，占10.3%，沃氏葡萄球菌2株，头状葡萄球菌2株，鸡葡萄球菌1株，路邓葡萄球菌1株。凝固酶阳性的葡萄球菌即金黄色葡萄球菌4株，占3.4%；其他革兰阳性球菌有屎肠球菌5株，占4.3%，明串珠菌2株，粪肠球菌1株，无乳链球菌1株，缓症链球菌1株，毗邻颗粒链球菌1株。革兰阴性菌中鲍曼不动杆菌5株，占4.3%，大肠埃希菌2株，占1.7%，阴沟肠杆菌1株和肺炎克雷伯菌1株。

2.3 药敏结果 93株CNS中，89株因产生β内酰胺酶而对青霉素耐药，占95.7%，51株对苯唑西林耐药，占81.0%，所有菌株均对万古霉素敏感。溶血葡萄球菌对克林霉素、庆大霉素、左旋氧氟沙星、诺氟沙星和四环素的耐药率均显著高于表皮葡萄球菌，差异均有统计学意义（χ2=15.90、16.73、6.05、5.41、4.70，均 P＜0.05），对青霉素和苯唑西林的耐药率相似（χ2=0.56、0.03，均P＞0.05），见表1。

表1 表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌和金黄色葡萄球菌的药敏结果

6株肠球菌中均对红霉素和氯洁霉素耐药，其中1株对左旋氧氟沙星耐药，3株对莫西沙星和青霉素耐药，未发现呋喃妥因和万古霉素的耐药株。5株鲍曼不动杆菌均对哌拉西林-他唑巴坦、左旋氧氟沙星、丁胺卡那霉素、亚胺培南、庆大霉素和环丙沙星敏感，其中1株对头孢吡肟、复方新诺明和妥布霉素耐药，2株对头孢曲松和头孢他啶耐药，4株对呋喃妥因、氨苄西林、头孢唑啉和头孢替坦均耐药。2株大肠埃希菌均为ESBL阳性，对头孢替坦、头孢曲松和头孢他啶的耐药率均为50%，且对亚胺培南敏感。

3 讨论

新生儿按出生后周龄可分为早期新生儿（1周之内）和晚期新生儿（1周之后）。本组资料显示，70.8%的新生儿败血症发生于早期新生儿，平均发病年龄仅6.8d，提示早期新生儿是我院新生儿败血症的好发人群，其中早产儿、先天性心脏病以及罹患肺炎、脐炎等基础疾病的患儿占较大比例，是新生儿败血症的常见诱因。张申等[1]曾对该院2007-01—12确诊的121例新生儿败血症患儿作过临床研究，发现出生后7d内发病的仅45例，早期新生儿的比例明显低于本研究的结果，考虑因不同地区、不同医院，患者来源、病种、常见感染途径不同，临床症状出现的时间也有较大差异，当然患儿是否及时就诊也影响早期新生儿败血症的检出率。对于细菌感染性疾病的诊断，血常规白细胞计数、分类和hs-CRP是重要的辅助指标。在新生儿期，白细胞计数波动较大，而hs-CRP作为一种由肝细胞合成的急性时相蛋白，在微生物感染或组织炎症时，其生成大辐增加，是细菌感染的敏感指标。本组hs-CRP升高者仅占8.5%，可能与新生儿肝功能尚不成熟，在感染应激情况下合成hs-CRP能力弱有关[2]。

我国作为发展中国家，历年来新生儿败血症最常见致病菌是葡萄球菌，第二位是大肠杆菌。但是随着社会卫生经济条件的发展和抗生素在医疗卫生领域的广泛应用，新生儿败血症的病原菌谱发生较大变迁。郭春燕等[3]曾报道该院1985—1989年新生儿败血症病原菌中CNS占30.7%，金黄色葡萄球菌占37.6%，大肠杆菌占19.8%，而2000—2004年CNS增至56.5%，金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌分别降至23.1%和9.5%。敖当等[4]曾对广东医学院附属医院儿科1997—2007年的新生儿败血症进行10年病原菌变迁及耐药性分析，发现病原学中CNS的比例逐年增高，从2.3%增至54.0%，而金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别从28.4%和11.6%降至12.8%和7.1%。有研究发现，早期新生儿和早产儿、低出生体重儿败血症病原菌以CNS为主[4-7]。本研究结果中，92.3%的菌株为革兰阳性球菌，CNS构成比高达79.5%，但仍低于张申等[1]报道的82.3%，而大肠杆菌和金黄色葡萄球菌则少见，分别为1.7%和3.4%，该结果反映了近年本院新生儿败血症的病原菌分布特点。因表皮葡萄球菌等CNS是人体体表的常见寄生菌，侵袭力较弱，故血培养该类细菌生长应排除污染可能[8]。

本研究中革兰阴性杆菌仅9株，菌种分布较分散，药敏结果对临床的参考价值相对较小。而葡萄球菌是新生儿败血症的主流菌株，药敏结果直接指导本院甚至本地区该类菌属感染的经验用药。本组95.7%的葡萄球菌因产生β内酰胺酶而对青霉素耐药，耐药率与国内外近期研究结果一致[4，9-10]，说明治疗该菌感染，青霉素G已退出历史舞台。耐β内酰胺酶的半合成青霉素苯唑西林或甲氧西林曾经是治疗葡萄球菌的历史沿袭首选药物，但CNS对该药的耐药程度显著高于金黄色葡萄球菌[11-12]。本研究中81%的CNS对苯唑西林耐药，与2007年张申等[1]报道的79.3%一致，高于敖当等[4]报道的65.8%，但仍低于国外报道CNS对甲氧西林超过90%的耐药率[6，10]。国外已有多篇关于耐万古霉素葡萄球菌感染的研究报道，所幸本组研究中所有葡萄球菌均对万古霉素敏感。对于治疗该菌的感染，万古霉素仍是最后一道抗生素屏障，但因其具有一定肾、耳、肝等毒性，临床应严格掌握应用指针，避免滥用诱导细菌耐药性的形成。本组表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌之间存在耐药模式差异，反应了CNS不同菌种间的差异，与国内研究结果吻合[1，4]。非主要病原菌中，6株肠球菌均对红霉素耐药，对万古霉素敏感；5株鲍曼不动杆菌和2株大肠杆菌均对亚胺培南敏感，以上菌种分布和耐药模式均呈现一定地区特点，因此了解本地区常见菌种分布和耐药模式对今后科学治疗具有重要指导意义。

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Distribution and antibiotics resistance of bacteria isolated from neonates with septicemia

XIA Weiliang,HUA Chunzhen,ZHU Yinyan,

et al.Department of Pediatrics,the Affiliated Hospital of Hangzhou Normal University,Hangzhou 310018,China

【 Abstract】 Objective To investigate the distribution and antibiotics resistance of bacteria isolated from neonates with septicemia. Methods Blood samples from neonates suspected septicemia admitted from January 2010 to July 2011were collected and cultured.The blood samples with positive alarms in the Vitek system were inoculated on solid medium.Bacterial strains were identified and antibiotics susceptibility was tested with Vitek system. Results A total of 117 strains were isolated from 113 neonates with septicemia with a positive blood culture rate of 10.2%.The predominant strains(92.3%)were gram-positive,while the gram-negative strains accounted for only 7.7%.Ninety-three isolates were coagulase-negative staphylococci and most of them were staphylococcus epidermidis(49.6%)followed by staphylococcus hemolyticus(12.4%)and 81%of the staphylococcus strains were resistant to oxacilin.All gram-positive strains were susceptible to vancomycin and most of the gram-negative bacteria were susceptible to imipenem. Conclusion Staphylococcus is the most common pathogen causing neonatal septicemia,with a high rate of resistance to oxacilln.

Neonate Septicemia Etiology Antibiotics resistance

2012-03-06）

（本文编辑：严玮雯）

310018 杭州师范大学附属医院儿科（夏卫良、华春珍、朱银燕、王琦婧、黄邢邢），细菌室（徐立群）

华春珍，E-mail:huachunzhen@yahoo.com.cn