血清Survivin及抗体在甲状腺乳头状癌诊断中的临床价值

史永亮

甲状腺癌是最常见的内分泌器官恶性肿瘤之一，好发于中青年女性，其病理类型以乳头状癌为主，具有恶性程度高、预后差的特点，然而其病变机制目前尚不明确。众多研究证实，恶性肿瘤的发生发展与细胞凋亡密切相关，且已有研究发现凋亡抑制因子Survivin在甲状腺乳头状癌组织中高表达［1］，但有关外周血Survivin及其抗体的表达状况在甲状腺乳头状癌的研究中甚少报道。本研究采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定80例甲状腺乳头状癌、50例健康志愿者血清Survivin及其抗体水平，分析二者的相关性，旨在为甲状腺乳头状癌的早期诊断提供实验依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院2010年1月至2011年10月期间收治的、且经病理确诊的甲状腺乳头状癌患者80例。其中男10例，女70例;年龄28～56岁，平均年龄41.5岁。80例甲状腺乳头状癌中有颈淋巴结转移者34例，无颈淋巴结转移者46例。同时选取我院门诊健康志愿者50例为对照组。患者组和对照组性别比、年龄等一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 标本采集:分别抽取甲状腺乳头状癌患者、健康志愿者清晨空腹静脉血3 ml，3 000 r/min离心10 min，取上清液 －80℃保存备用。

1.2.2 ELISA法:采用双抗体夹心法测定血清Survivin及其抗体水平，严格按照说明书操作，试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司提供。

1.3 统计学分析应用SPSS 10.0统计软件，计量资料以表示，采用t检验，相关性检验采用Spearman相关分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Survivin在甲状腺乳头状癌及健康志愿者血清中的表达

甲状腺乳头状癌及健康志愿者血清中Survivin蛋白表达水平分别是(1.37 ±0.29)ng/ml和(0.21 ±0.04)ng/ml，2 组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。

2.2 Survivin抗体在甲状腺乳头状癌及健康志愿者血清中的表达 甲状腺乳头状癌及健康志愿者血清中Survivin抗体水平分别是(98.25 ±22.14)pg/ml和(42.36 ±18.11)pg/ml，2 组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。

2.3 Survivin在甲状腺乳头状癌转移组、未转移组血清中的表达 甲状腺乳头状癌转移组及未转移组血清中Survivin蛋白表达水平分别是(1.61 ± 0.42)ng/ml和(0.77 ± 0.18)ng/ml，2组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。

2.4 Survivin抗体在甲状腺乳头状癌转移组、未转移组血清中的表达 甲状腺乳头状癌转移组及未转移中Survivin抗体浓度分别是(115±27)pg/ml和(71±20)pg/ml，2组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。

2.5 Survivin及其抗体在甲状腺乳头状癌中的相关性分析血清中Survivin及其抗体表达呈明显正相关(r=0.426，P＜0.01)。

3 讨论

Survivin是凋亡抑制蛋白家族(IAP)的重要成员，是目前已知最强的凋亡抑制因子，也是肿瘤标志物方面研究的热点。研究显示Survivin在正常成熟组织中不表达，在乳腺癌、大肠癌、肺癌等多种恶性肿瘤中异常高表达，发挥抗凋亡和促进肿瘤细胞增殖的作用［1］。刘钢等［2］采用免疫组化SP法检测不同人群组织Survivin蛋白的表达情况，研究发现甲状腺癌组织Survivin表达水平显著高于甲状腺腺瘤及癌旁正常组织，呈过量表达状态。赵海宝［3］同样发现Survivin在甲状腺乳头状癌组织中表达增高，且其高表达与病理分期和淋巴结转移状况有关。

我们采用ELISA法检测甲状腺乳头状癌患者血清Survivin及其抗体的水平，相比免疫组化等实验方法，ELISA法具有快速、高效、可定量检测等优点。实验结果显示:与健康志愿者比较，患者外周血Survivin及其抗体水平显著增高，差异有统计学意义(P＜0.05)，这与前人研究结果［2，3］一致。我们的实验结果还显示，甲状腺乳头状癌发生颈淋巴结转移的患者血清Survivin及其抗体水平显著高于未转移者。这是由于Survivin基因特异性表达在肿瘤细胞中，随着肿瘤细胞的远处转移，癌细胞进入外周血并分泌Survivin蛋白，进而通过其抗原特性刺激机体产生Survivin抗体。由此可见，Survivin及其抗体表达水平不仅参与恶性肿瘤的发生发展，也与肿瘤转移及预后密切相关，与上述研究结果［2，3］一致。另外，Spearman相关分析显示:患者血清Survivin及其抗体表达呈明显正相关(r=0.426，P＜0.01)，提示在甲状腺乳头状癌病变过程中有可能存在Sur-vivin及其抗体的协同作用，二者相互调节共同参与疾病的进展，导致癌细胞的侵袭转移。目前研究认为Survivin抗凋亡的主要机制是阻断了caspase-3和caspase-7的激活，后二者是细胞凋亡途径的关键激酶，Survivin与之结合后直接造成激酶的失活，从而使凋亡进程受抑［4，5］。

总之，本研究中Survivin及其抗体在甲状腺乳头状癌病变过程中发挥关键作用，对于二者的检测可为疾病的早期诊断和预后判断提供理论依据，二者有可能成为甲状腺乳头状癌基因治疗的新靶点。

1 马静，李晓江，隋军，等.Survivin在甲状腺癌中的表达及与微血管生成的关系.肿瘤防治研究，2010，37:1149-1151.

2 刘钢，史火喜，袁又能，等.凋亡抑制基因Survivin在甲状腺癌组织中的表达及意义.中华临床医师杂志，2011，5:840-843.

3 赵海宝.Cyclin和Survivin蛋白凋亡抑制基因Survivin在甲状腺癌组织中的表达及意义.山西医科大学学报，2011，42:989-992.

4 Ulukus EC，Kargi HA，Sis B，et al.expressionin non-small-cell lung carcinomas:correlation with apoptosis and other apoptosis-related proteins，clinicopathologic prognostic factors and prognosis.Appl Immunohistochem Mol Morpho，2007，15:31-37.

5 Xu JH，Wang AX，Huang HZ，et al.Survivin shRNA induces caspase-3-dependent apoptosis and enhances cisplatin sensitivity in s quamous cell carcinoma of the tongue.Oncol Res，2010，18:377-385.