千斤拔属植物提取工艺及药理作用研究进展＊

陈 鹏 翁剑斌 殷 虎 沈树虎 覃洪含 高 琦 林 航 岳桂华 审校 秦海洸

遵义医药高等专科学校（遵义563002）

千斤拔来源于豆科植物蔓性千斤拔Moghania philippinensis（Merr.et Rolfe）Li.、大叶千斤拔 M.macrophylla（Willd.）O.Kuntze 或绣毛千斤拔 M.ferruginea（Wall.ex Benth.）Li.的干燥根。主产于广西和云南。我国产16种以及1变种。千斤拔属植物在我国一直作为民族药及民间药被广泛使用，其中有确切药用历史的就有6种。千斤拔性平味甘，具有补气血，助阳道的作用，临床上主要用于治疗手足痹痛，腰部风湿作痛，理跌打伤等，《广西中药志》介绍：“舒筋活血，祛风湿，强筋骨，四肢酸软，跌打扭伤，阳黄疸［1］，又治腰肌劳损，腹胀，食欲不振，月经不调”［2］。饶伟文等［3］进行预试验分析并采用依据文献的方法进行试管法和TLC 预试法推测千斤拔属植物中含有黄酮、酚类、鞣质、糖类、甾醇、生物碱和氨基酸类试验均呈阳性反应。且近年研究发现，豆科千斤拔属植物中广泛存在异黄酮类物质［4］。综合查阅近几年文献，发现关于千斤拔提取工艺的研究主要有渗漉法、回流法、水蒸气蒸馏法、超声法及其他提取方法；现代药理学研究表明，千斤拔属植物多具有抗炎、抗病毒等作用，在医药领域的应用前景非常广阔。笔者就近年来对该属植物的提取工艺、药理作用及临床应用等方面研究成果进行综述。

1 千斤拔属植物提取工艺研究

1.1 渗漉法提取工艺研究 海莉等［5］以总生物碱的最大吸光度值为指标，采用正交实验筛选千斤拔中生物碱提取方法及工艺参数，表明最佳提取工艺为酸水渗漉提取，最佳提取工艺参数是硫酸浓度为3%，渗漉时间为12h，流速为1mL·min－1，能得到较高产率的生物碱类成分，符合工业化生产。

1.2 回流法提取工艺研究 任朝琴等［6］研究千斤拔多糖的提取最佳工艺条件，其最佳提取工艺为：采用加热回流法，石油醚（30～60℃）回流3h；滤渣用乙醚回流5h；滤渣用95%乙醇回流5h，滤渣用18倍量提取3次，2h／次，提取液浓缩至10mL加入乙醇后使溶液中乙醇的浓度约为90%，静置8h后抽滤，真空干燥即得千斤拔多糖粗品。任朝琴等［7］采用正交试验筛选千斤拔总黄酮的提取工艺。以芦丁含量为指标，其最佳工艺为乙醇回流，最佳工艺参数为回流时间为3h，料液比为1∶14，乙醇浓度为50%，提取2次。并考察了提取工艺的稳定性。此方法简单，可行性好，稳定。

1.3 超声法提取工艺研究 李华等［8］通过单因素多水平及正交试验考察超声－甲醇法提取其总黄酮的试验条件，以染料木素作为对照品，通过比色法测定总黄酮的含量，高效液相色谱验证结果，在85%甲醇，料液比1∶40，超声提取20min，提取1次，采用染料木素为对照品测定总黄酮得率为4.98%。该方法简单，易操作。邓雪阳等［9］首次运用试验设计优化提取总酚酸。乙醇浓度，超声时间，超声温度和溶剂溶质液固比用full two－level factorial design同时进行优化筛选，乙醇浓度，超声时间，超声温度用face－centered composite design 进行响应面优化。结果：优化超声提取总酚酸条件为乙醇浓度58.9%，超声时间38min，超声温度47.2℃。在此条件下，总酚含量为40.36mg·g－1。朱琳等［10］研究超声波辅助提取千斤拔多糖工艺，通过单因素和正交试验对其进行优化，结果表明在最佳工艺为提取温度70℃，超声时间30min，料液比1∶40，提取时间2h时，多糖提取率为0.372%。陈帅［11］等采用采用单因素和正交试验辅助超声波法提取千斤拔总黄酮工艺条件，在最佳条件为乙醇浓度80%，提取工艺为25min，料液比为1∶20，提取次数为2次时，总黄酮得率为3.00%。

1.4 水蒸气蒸馏法提取工艺研究 王小庆等［12］利用水蒸气蒸馏法提取蔓性千斤拔挥发油，流出液用乙醚萃取3次，合并及低温除尽乙醚，无水硫酸钠干燥，得淡黄色油状物0.5mL，收率为0.5%，并用GC－MS进行成分分析测定，结合计算机检索技术鉴定出38个化学成分。刘建华等［13］采用水蒸气蒸馏法，从蔓性千斤拔的根茎中提取挥发油，得油状物0.5mL，收率为0.02%，并采用气相色谱－质谱－计算机联用系统对挥发油的化学组成进行了定性、定量研究，从提取出的60个成分中分析、鉴定出39个成分。周菊峰等［14］用水蒸气蒸馏法得到的蔓性千斤拔挥发油采用子窗口因子分析法（SFA）分辨重叠色谱峰，依靠每一组分纯质谱在NIST 质谱库进行相似性检索而定性分析，总体积积分法进行定量分析，共分辨出76 个色谱峰，鉴定出59个化学成分。

1.5 其他提取工艺方法研究 范贤等［15］分别采用水蒸气蒸馏（SD）法、超声萃取水蒸气蒸馏（UESD）法、超临流体萃取（SFE－CO2）法提取千斤拔的挥发油。实验结果表明：SD 法、UESD 法和CO2－SEF法提取的挥发油的收率分别为0.03%，0.08%和0.5%，SD 法和UESD 法提取的主要化学成分为萜烯类的物质，而CO2－SEF法提取的主要化学成分是醇和酸类物质。年晓莉等［16］利用正交实验对蔓性千斤拔总黄酮进行水提取工艺优选，以浸膏得率和总黄酮含量为评价指标。结果显示最佳水提工艺为以1∶30倍水量，于75℃条件下水提3h，共提取3次，该工艺简便，收率高，并且指出水提时间对蔓性千斤拔总黄酮的提取有较大影响。

2 药理作用及临床应用研究

2.1 药理作用 目前，从文献已知千斤拔主要药理作用有抑菌、镇痛和抗炎、抗雌激素活性、保护神经和保护血脑屏障等作用。其被广泛应用于妇科、风湿痹痛等类型的中成药生产，如妇科千金片、千斤拔饮、金鸡胶囊（冲剂）、补血调经片和壮腰健肾丸等中成药。跌打损伤、乳房疾病、牙痛、妇科病、慢性肾炎、病后气虚、食欲不振，均收到了良好的效果［17］。我国民间和临床采用千斤拔治疗疾病的有效单验方，用于风湿骨疼、毒蛇咬伤、急性咽喉炎、各种肿毒、妇女白带过多、产后关节疼痛等症的治疗［18］。再有，病后及老年人下肢软弱无力、白细胞减少症、急性乳腺炎、软组织损伤及感染，千斤拔治疗效果佳［19］。

2.1.1 镇痛、抗炎作用 陈一等［20］采用蔓性千斤拔乙醇提取物对小鼠进行抗扭体反应和热板试验，研究表明千斤拔乙醇提取物显著抑制小鼠醋酸性“扭体”反应；在热板法中显著提高小鼠痛阈，提示具有一定的镇痛作用。试验又采用蔓性千斤拔乙醇提取物对小鼠足肿胀的影响和小鼠巴豆油耳部水肿的影响来证明其抗炎作用。王俊芳等［21］探讨千斤拔抗炎的可能机制，同时探讨千斤拔、芬必得与时间之间是否具有交互效应。结果显示千斤拔具有修复损伤神经的作用，可能是通过抗炎作用实现的，同时降低P物质含量可能是其抗炎的机制之一。且两者具有正交互作用（联合作用）。

2.1.2 对周围神经损伤的保护作用 袁建新等［22］以Wistar大鼠坐骨神经挤压为动物模型，用千斤拔给Wistar大鼠灌胃，于周围神经损伤后的不同时期检测感觉神经传导速度（SCV）、运动神经远段端潜伏期（ML）、坐骨神经功能指数（SFI）。结果千斤拔能促进Wistar大鼠坐骨神经损伤后有髓神经再生，能促进感觉、运动纤维的恢复。

2.1.3 对脑组织及血脑屏障的保护作用 赵节绪等［23］在家兔口服千斤拔浸出液后，采用视神经孔注入无肝素化自身动脉血的方法建立急性蛛网膜下腔出血（SAH）模型，造成家兔血脑屏障损害，结果表明千斤拔对实验组家兔脑波频率和振幅的恢复有明显的促进作用，显微镜下可见脑组织也有极少量荧光现象。

2.1.4 抑菌作用 王明煜［24］用蔓性千斤拔提取物对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌及白色念珠菌等四种临床常见致病菌的抑制作用，阳性对照药物妇炎康颗粒。结果表明，与阳性对照比较，蔓性千斤拔两种提取物对上述四种致病菌均有较好的抑制作用。

2.1.5 抗血栓作用 张明秋等［25］研究探索了千斤拔黄酮抑制血栓形成及机制，结果表明千斤拔黄酮高剂量组血小板聚集率明显降低。说明千斤拔黄酮具有抑制血栓形成作用，其机制为主要抑制血小板活化和促进纤溶作用。

2.1.6 类雌激素和抗雌激素活性作用 韦丽君等［26］研究壮药千斤拔饮对去卵巢大鼠免疫内分泌的影响。观察各组大鼠血清E2、FSH、LH 及IL－2的变化、子宫重量及子宫组织学改变。壮药千斤拔饮高剂量组能够明显增加去势大鼠的子宫重量指数，但子宫内膜并无明显增厚；明显升高去势大鼠血清E2、IL－2水平，降低去势大鼠血清FSH、LH 的水平。日本学者［27］曾对千斤拔的提取物进行雌激素活性指导分离，从中分离得到几个活性类黄酮化合物，其中8－（1，1二甲烯丙基）－染料木黄酮活性最强，连续给药14d对卵巢切除大鼠的子宫亦具有明显的增重作用。抗雌激素活性试验显示，5，7，3’，4’－四羟基－6，8－异戊二烯基异黄酮活性最强。

2.1.7 其他作用 曾春兰等［28］观察大叶千斤拔的抗炎镇痛、抗肝损伤、抗凝血、抗疲劳作用及毒性情况，结果说明大叶千斤拔能减轻小鼠耳廓肿胀，减少小鼠扭体次数；降低肝损伤小鼠转氨酶活性，延长凝血时间和小鼠游泳时间。急性毒性试验表明，大叶千斤拔的小鼠最大给药量为160.1g生药／kg，药物毒性很小。祁晓晨等［29］观察大叶千斤拔水煮液对纳洛酮引起的吗啡依赖离体豚鼠回肠戒断性收缩作用及它对乙酰胆碱引起的正常离体豚鼠回肠平滑肌收缩的影响。结果显示，大叶千斤拔对以上两种情况均有抑制作用。饶伟文等［3］利用昆明小白鼠，对蔓性千斤拔、大叶千斤拔、宽叶千斤拔的水煎液做了急性毒性与药效学比较，结果表明，3种千斤拔均属无毒类；与蒸馏水对照组相比，除镇痛、抗炎作用外，免疫增强作用、抗疲劳、抗缺氧等指标均有增强趋向。付鑫等［30］建立高脂血症大鼠模型，用千斤拔总黄酮连续灌胃4 周，测定血清中TC、TG、HDL2c、LDL2c、NO 含量及NOS活性，结果表明TC、TG、LDL2c含量降低，NO 含量增加，NOS活性升高，即能调节高脂血症大鼠血脂代谢，纠正NO 代谢紊乱。

2.2 临床应用 在傣医中应用具有调理土塔，消食化积，收敛止泻的作用。大叶千斤拔根20g煎服，主要用于治疗急慢性腹泻、腹痛、不思饮食、消化不良；25g煎服治疗产后体弱多病和月经不调等［31］。韦丽君等［32］探讨壮药千斤拔饮治疗90例更年期综合征观察疗效。治疗组60例服千斤拔饮，治疗3个月，愈显率为81.66%，有效率为100%。结论是千斤拔饮能有效降低血中卵泡雌激素（FSH）浓度，提高雌二醇（E2）水平，改善更年期症状。向自军［33］用妇科千金片（金樱根、千金拔、穿心莲、当归、鸡血藤、党参等）治疗慢性盆腔炎102例，千斤拔清热凉血、解毒除湿、通络，并设对照组观察，治疗组显效50例，有效25例，总有效率73.5%。赵连皓等［34］用妇科千金片治疗慢性前列腺炎50例，结果总有效率95%。提示妇科用药治疗男性病，可开辟新思路。陆璇霖［35］运用千斤拔、黄芪、桂枝等组成的芪桂千斤拔汤内服外用治疗痹症80例，取得满意效果，14例（17.5%）治愈，关节疼痛消失，58例（70.25%）显效，关节疼痛减轻，复发时间较原来延长；8例（10%）无效，服药2个疗程症状改善不明显。总有效率为90%。姜颖等［36］运用金鸡胶囊治疗盆腔炎80例，治愈率100%，治疗简便，疗程短，疗效可靠。梁晶［37］采用金鸡冲剂配合外用康妇消炎栓法治疗慢性盆腔炎73例，取得了满意的效果，总有效率达97.3%。

3 结语与展望

近年来，研究者们在其化学成分的提取分离等方面获得了肯定的成果，综合文献大都表明了其主要有效成分是黄酮类和多糖，在药效学方面证明千斤拔具有镇痛、抗炎、抑菌及神经功能恢复等作用，并提示具有免疫作用。在以后工作中应该进一步应用现代化手段深入神经功能恢复和免疫调节方面研究，将不同的工艺设计及提取方法有机结合起来，确定最佳提取工艺条件，并联合色谱技术建立药材主要成分的HPLC、HPLC－MS及GC－MS指纹图谱，考察活性部位指纹图谱的特征峰与药效的关系，用“量化的化学特征数据”建立“谱－效”关系，从药效角度控制追踪千斤拔化学成分的药物活性，以便使该属植物得到更好的开发与利用，这些都有待今后更进一步的深入研究。相信随着研究的不断深入，进行全成分的高效分析、检测，提高其提取效率，推进中药千斤拔研究现代化进程。

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