思茅松松塔化学成分的初步研究

施贵荣，李冬梅，杨 静，刘 熙，李兆云，刘光明

（1.大理学院药学与化学学院，云南大理 671000；2.大理州食品药品检验所，云南大理 671000）

思茅松（Pinus kesiya R.）系松科（Pinaceae）松属（Pinus）植物，其松塔为该植物的球果，可入药。现有研究表明，松属许多植物的松塔提取物有抗肿瘤、抗HIV、抗炎、抗氧化、抗菌、增强免疫力等作用〔1-6〕。在云南省思茅松资源非常丰富，但对思茅松的利用仅限于采集树脂，其松塔常被当作燃料烧掉，造成了资源的严重浪费。迄今为止，未发现关于思茅松药理活性方面的研究报道；化学成分研究报道较少，主要集中在思茅松树脂、松香、松节油等的化学成分分析。至今未见关于松塔部位化学成分的相关研究，因此为了更好的开发利用这一资源，本研究以思茅松松塔为研究对象，系统分离分析其化学组成，为充分开发利用思茅松松塔奠定理论基础。

1 仪器与材料

1.1 仪器与试剂 瑞士Büchi R-210型旋转蒸发仪；Bruker AM-400型核磁共振仪；瑞士BüchiB686A型中压液相色谱仪；柱色谱硅胶（80-100目，100-200目，200-300目）及薄层色谱硅胶GF254为青岛海洋化工厂产品，RP-18（50 μm）为日本YMC公司产品，Sephadex LH-20为Pharmacia公司产品；其他化学试剂均为工业纯。

1.2 试验材料 样品采自云南省思茅市，由大理学院药学与化学学院周浓副教授鉴定为思茅松，样品标本保存在大理学院药学与化学学院生药学教研室。

2 提取与分离

思茅松松塔干燥，粉碎，取样8 kg用95%乙醇在室温条件下冷浸提取3次，每次48 h；合并3次提取液浓缩回收乙醇，加蒸馏水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得石油醚组分（40 g）、乙酸乙酯组分（100 g）、正丁醇组分（77 g）。取乙酸乙酯萃取组分经硅胶柱层析，用石油醚：丙酮梯度洗脱（v/v=20∶1，10∶1，8∶2，7∶3，5∶5），得到5个流分FrA-E。流分FrC共5 g，经硅胶柱层析，用石油醚：乙酸乙酯梯度洗脱（v/v=10∶1，9∶1，8∶2，7∶3，6∶4，5∶5），经Sephadex LH-20（氯仿：甲醇=1∶1）层析，RP-18柱层析（甲醇：水=4∶6，6∶4，8∶2，10∶0），反复硅胶柱层析（流动相：环己烷/乙酸乙酯、环己烷/异丙醇、氯仿/丙酮等）得化合物1（11 mg）、2（35 mg）。流分FrD共30 g，样品经中压液相色谱（MPLC）处理，填充材料RP-18，用甲醇：水梯度洗脱（v/v=3∶7，4∶6，5∶5，6∶4，7∶3，10∶0），经SephadexLH-20（甲醇）层析，反复硅胶柱层析（流动相：环己烷/乙酸乙酯、环己烷/异丙醇、氯仿/丙酮等）得化合物3（100 mg）、4（100 mg）、5（15 mg）、6（50 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：白色粉末，易溶于氯仿；C20H22O6；1H NMR （400 MHz，CDCl3）δ：6.89 （4H，overlap，H-2，2′，5，5′），6.82（2H，dd，J=1.6，8.2 Hz，H-6，6′），5.66（2H，s，-OH），4.74（2H，d，J=4.3 Hz，H-7，7′），4.24 （2H，dd，J=6.9，8.9 Hz，H-9a，9′a），3.88（2H，dd，J=3.8，9.3 Hz，H-9b，9′b），3.10 （2H，m，H-8，8′），3.90（6H，s，2 × -OCH3）.13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：132.9（s，C-1，1′），108.6（d，C-2，2′），146.7（s，C-3，3′），145.2（s，C-4，4′），114.3（d，C-5，5′），119.0（d，C-6，6′），85.9（d，C-7，7′），54.2（s，C-8，8′），71.7（t，C-9，9′），56.0（q，2 × -OCH3）。以上数据与文献〔7〕对照基本一致，化合物1鉴定为：pinoresinol，（即松脂醇）。

化合物2：白色粉末，易溶于氯仿；C20H23O6；1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：6.80（2H，t，J=8.0 Hz，H-5，5′），6.50 （1H，dd，J=1.8，8 Hz，H-6），6.59～6.60（2H，overlap，H-2′，6′），6.40（1H，d，J=1.8Hz，H-2），4.15（1H，dd，J=7.2，9.2 Hz，H-9a），3.89（1H，dd，J=7.2，9.2 Hz，H-9b），3.81（3H，s，-OCH3），3.80（3H，s，-OCH3），2.95（1H，dd，J=5.2，14.2 Hz，H-7′a），2.86（1H，dd，J=7.0，14.2 Hz，H-7′b），2.43～2.63（4H，m，H-7，8，8′）.13C NMR （100 MHz，CDCl3）δ：129.5（s，C-1），111.5（d，C-2），146.6（s，C-3），144.4（s，C-4），114.1（d，C-5），122.1（d，C-6），34.6（t，C-7），46.6（d，C-8），178.9（s，C-9），129.8（s，C-1′），110.9 （d，C-2′），146.7（s，C-3′），144.5（s，C-4′），114.4（d，C-5′），121.3（d，C-6′），38.3（t，C-7′），41.0（d，C-8′），71.4（t，C-9′），55.8（q，-OCH3）。以上数据与文献〔8〕对照基本一致，化合物2鉴定为：matairesinol，（即罗汉松树脂酚）。

化合物3：黄色油状物，易溶于甲醇；C19H21O6；1H NMR（400 MHz，CD3OD）δ：6.99（1H，s，H-2），6.85（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），6.78 （1H，d，J=2.7，8.0 Hz，H-6），6.61 （1H，s，H-6′），6.59 （1H，d，J=2.0 Hz，H-2′），5.51（1H，d，J=5.4 Hz，H-7），3.85（1H，m，H-9a），3.80（3H，s，-OCH3），3.77（1H，m，H-9b），3.57（2H，m，H-9′），3.47（1H，m，H-8），2.56（2H，t，J=6.0 Hz，H-7′），1.80 （2H，t，J=6.0 Hz，H-8′）.13C NMR（100 MHz，CD3OD）δ：135.1（s，C-1），110.6（d，C-2），149.1（s，C-3），147.3（s，C-4），116.2（d，C-5），119.8（d，C-6），88.8（d，C-7），55.7（d，C-8），65.1（t，C-9），129.9（s，C-1′），116.8（d，C-2′），141.8（s，C-3′），146.5（s，C-4′），136.8（s，C-5′），117.1（d，C-6′），32.8（t，C-7′），35.8（t，C-8′），62.4（t，C-9′），56.4（q，-OCH3）。以上数据与文献〔9〕对照基本一致，化合物3鉴定为：cedrusin。

化合物4：白色粉末，易溶于甲醇，C20H23O6；1H NMR（400 MHz，CD3OD）δ：6.99（1H，s，H-2），6.84（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），6.77 （1H，d，J=2.7，8.0 Hz，H-6），6.72（2H，s，H-2′，6′），5.50（1H，d，J=6.4 Hz，H-7），3.84（2H，m，H-9），3.82（3H，s，-OCH3），3.78（3H，s，-OCH3），3.59（2H，t，J=6.4 Hz，H-9′），3.51（1H，dd，J=6.4，12.0 Hz，H-8），2.61（2H，t，J=7.4 Hz，H-7′），1.82 （2H，m，H-8′）.13C NMR（100 MHz，CD3OD）δ：134.8（s，C-1），110.7（d，C-2），149.1（s，C-3），147.5（s，C-4），116.3（d，C-5），119.9（d，C-6），89.1（d，C-7），55.4（d，C-8），65.0（t，C-9），137.0（s，C-1′），114.1（d，C-2′），145.2（s，C-3′），147.5（s，C-4′），130.0（s，C-5′），118.0（d，C-6′），33.0（t，C-7′），35.8（t，C-8′），62.4（t，C-9′），56.8（q，3-OCH3），56.5（q，3′-OCH3）。以上数据与文献〔10〕对照基本一致，化合物4鉴定为：dihydrodehydrodiconiferyl alcohol。

化合物5：白色粉末，易溶于甲醇；C21H22O12；1H NMR （400 MHz，CD3OD）δ：7.29 （1H，d，J=2.0 Hz，H-2′），6.99（1H，dd，J=2.0，8.2 Hz，H-6′），6.79（1H，d，J=8.2 Hz，H-5′），5.82 （1H，d，J=2.0 Hz，H-8），5.78（1H，d，J=2.0 Hz，H-6），4.87（1H，d，J=11.6 Hz，H-2），4.73（1H，d，J=7.4 Hz，H-1′′），4.46（1H，d，J=11.6 Hz，H-3），3.78（1H，dd，J=2.1，12.0 Hz，H-6′′a），3.56（1H，dd，J=5.8，12.0 Hz，H-6′b），3.22～3.44（4H，m，H-2′′，3′′，4′′，5′′）.13C NMR（100 MHz，CD3OD）δ：84.9（d，C-2），73.5（d，C-3），198.5（s，C-4），168.7（s，C-5），97.4（d，C-6），165.3（s，C-7），96.4（d，C-8），164.5（s，C-9），101.9（s，C-10），130.0（s，C-1′），118.2（d，C-2′），146.6（s，C-3′），149.0（s，C-4′），116.9（d，C-5′），124.7（d，C-6′），104.1（d，C-1′′），74.9（d，C-2′′），77.6（d，C-3′′），71.5（d，C-4′′），78.4（d，C-5′′），62.6（t，C-6′′）。以上数据与文献〔11〕对照基本一致，化合物5鉴定为：4′，5，7-trihydroxyflavanon ol-3′-O-β-D-glucopyranos-ide，（即二氢槲皮素-3′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷）。

化合物6：黄色粒状结晶，易溶于甲醇；C7H6O4；1H NMR（400 MHz，CD3OD）δ：7.46（1H，s，H-2），7.43（1H，d，J=4.4 Hz，H-6），6.82（1H，d，J=8.4 Hz，H-5），13C NMR （100 MHz，CD3OD）δ：121.7 （s，C-1），116.3（d，C-2），144.7（s，C-3），150.2（s，C-4），114.4（d，C-5），122.5（d，C-6），168.9（s，COOH）。以上数据与文献〔12〕对照基本一致，化合物6鉴定为：3，4-dihydroxybenzoic acid，（即3，4-二羟基苯甲酸）。

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