畜禽免疫抗体监测采血技术及注意事项

罗士仙,康修田,梁盛,饶鸣鹏,曾梅群,张有美

（1.泰和县畜牧兽医局，江西 吉安 343700；2 马市畜牧兽医站；3 沙村畜牧兽医站；4 澄江畜牧兽医站）

畜禽采血是疫病监测、检测、诊断和评估免疫效果的一项前提性工作，采血质量的好坏，直接影响到监测结果，所以作为基层兽医人员，畜禽的采血技术是必须掌握的常规技术之一。现介绍几种常用的采血方法及注意事项供同行参考。

1 采血样前器具的准备

根据检测项目准备一次性手套、真空采血管、防护服、口罩、防护帽、采血针、离心管、套猪器、铁链条、一次性注射器、75%酒精棉球、橡皮筋、剪毛剪、灭菌脱脂棉球、采样单、油性记号笔、冷藏包、采样登记表等采样工具。检查真空采血管管盖是否松动，一次性注射器安装是否密封等。

2 畜禽血样采集的常用方法

2.1 牛血样的采集

一般多采用颈静脉采血方法或耳静脉采血方法采集血样。

2.1.1 牛颈静脉采血。牛颈静脉分为颈内静脉和颈外静脉，颈内静脉较小，颈外静脉较粗，位于颈部肩骨乳突肌与胸头肌间的凹窝内。采血前助手要用铁链栓树桩或电线杆保定好牛颈部，使其头向一侧上仰，让牛侧颈静脉充分暴露出来，采血者站立于牛颈部颈静脉暴露一侧，取真空采血针头，以拇指、食指和中指夹住，依靠腕力阴劲，沿颈静脉线走向垂直扎进颈静脉上的皮肤，然后调整位置，针头一旦进入血管，血液马上会喷射而出。待血量达到要求后，拔出针头，用消毒过的干棉球按压针眼，轻压止血。采血完毕后，及时做好血样的编号和采样表的填写工作。

2.1.2 牛耳静脉采血。①真空采血管牛耳静脉采血。采血地点选择要平整、松软、干燥、有栓桩的场地，防止牛挣扎导致悬挂被勒死而出意外。采血前助手用绳子把牛鼻栓两侧同时绑牢，先用铁链条栓树桩或电线杆保定好牛颈部，铁链条要调紧点，固定时先松后紧，避免采血时牛挣扎，同时用绳子把牛的双角固定在树桩或电线杆上，接着用一手压迫耳静脉近心端，或用皮筋绑紧耳根，另一手用75%酒精棉球涂擦牛耳静脉，使其耳静脉充盈。采血者用75%酒精棉球消毒采血部位,接着用干棉球擦干采血部位，之后一手固定耳部皮肤，防止静脉滑动，另一手持采血针成15°角刺入，有破空的感觉、见采血针回血后继续推进针头少许，防止针头滑出，紧接着把采血针另一针头插入真空采血管内，此时真空采血管应该倾斜让血液沿管壁流入管内，待血量达到要求后，拔出针头，用消毒过的棉球按压针眼，轻压止血。采血完毕后，及时做好血样的编号和采样表的填写工作。若血流速度较慢，可稍调整针头位置或往前推进针头即可；若采血针血管端针头未见回血，一般是针头没插入血管内，应该重插；若采血针血管端针头见回血，另一端针头插入真空采血管内不见血液流入管内，一般是提示采血管失去真空，此时应该换另一根真空采血管。注意拔针头时应该先拔插入真空管端的针头，可避免因操作失误时真空采血管失去真空而浪费。②一次性注射器、静脉输液针牛耳静脉采血。保定方法和助手操作同真空采血管采血方法。采血者用75%酒精棉球消毒采血部位,接着用干棉球擦干采血部位，之后一手固定耳部皮肤，防止静脉滑动，另一手持一次性输液针成15°角刺入，有破空的感觉、见针头回血后继续推进针头少许，此时血液一直顺着输液管直流，待血液流至输液针连接处时马上用一次性注射器连接，连接处注意尽量不留空气柱，形成真空，慢慢抽动注射器活塞柄，让血液沿管壁流入注射器内，待采集到适量血液后，一手拔出输液针头，另一手用消毒过的棉球按压针眼，轻压止血，不出血后即可松手。采血完毕后，及时做好血样的编号和采样表的填写工作。

2.2 猪血样的采集

一般多采用前腔静脉采血法或耳静脉采血法采集血样。

2.2.1 猪耳静脉采血。本方法适用于母猪和大猪。绳套（或套猪器）保定，在绳一端做一个活套，在猪张口时，用绳活套（或套猪器）套住猪上颌，勒紧，由一人拉紧，或将绳（或套猪器）的一端栓在栏杆或木桩上，这时，猪呈现用力后退姿势，可保持安全站立姿势。猪站立保定后，耳静脉局部消毒，助手用力在耳根捏压静脉近心端或用胶带在耳根部结扎，亦或用酒精反复涂擦耳静脉，使血管怒张。采血者先用75%酒精棉球消毒采血部位,接着用干棉球擦干采血部位，然后用左手平拉猪耳并使部位稍高，右手持注射器或真空采血针，针头斜面朝上，以30°～45°角沿血管刺入，随即轻抽注射活塞柄，如见回血即为已刺入血管，再顺血管向内插入1cm 或把采血针头另一端针头插入真空采血管内，然后去除捏压血管的手指或胶带，左手将注射器与耳一起固定，右手缓缓地将血液抽出或倾斜真空采血管让血液沿管壁流入管内。待血量达到要求后，拔出针头，用消毒过的棉球按压针眼，轻压止血。采血完毕后，及时做好血样的编号和采样表的填写工作。

2.2.2 猪前腔静脉采血。猪前腔静脉采血的穿刺位置—前腔窝。采血者蹲于猪的右前侧，首先触摸猪的前胸骨，通过前胸骨柄和肩部平行于地面划1 条想象中的横线，然后再找到右侧第一肋骨，由胸骨、右侧第一肋骨、气管三者围成的一个三角区域俗称前腔窝。根据实践经验，一般30kg 以下的小猪进针部位应在两前肢与气管交汇处，30kg 以上的中大猪进针部位可选在气管两侧的低凹处。小猪采用仰卧保定，助手一手抓住两后肢，一手抓住一前肢，另一助手一手按住小猪下颌，一手抓住另一前肢，使头、胸、后肢在一直线上，并充分暴露两侧胸前窝，静脉充胀。大猪和母猪采用保定绳（或套猪器）站立保定，助手用保定绳套住猪上颌，向前向上拉，使猪前腔静脉充胀，头部和躯干成30°角，充分暴露两侧胸前窝。采血者用75%酒精棉球消毒采血部位，接着用消毒过的干棉球擦干采血部位后，持一次性注射器或采血管针 (小猪7号或9号针头，大猪和母猪12号针头)成45°角插入，边插边抽动活塞柄，见针管内有血液涌入，持续抽血至需要血量，即可拔出针头，用消毒过的棉球按压针眼，轻压止血。采血完毕后，及时做好血样的编号和采样表的填写工作。若进针后当针管内未溢入血液时，可向前后左右来回调整方向及进针深度，一旦有血液溢入，此时一定要固定好采血针管，转动旋杆柄收集血液，直到取足血液后小心拔出针头。猪站立保定前腔静脉采血方便实用，且采血量大，对猪只的刺激较小。

2.3 家禽血样的采集

一般多采用翅静脉采血法采集血样。助手用左手抓住禽的两只脚，右手将两翅重叠后捏紧掌骨，使禽背部贴住助手上腹部，助手右手稍高于左手，两手轻轻用力，使禽体伸展，暴露出翅内侧。采血者左手拨开左侧翅内侧静脉上的羽毛使静脉暴露，消毒擦干后右手持真空采血管采血针或一次性注射器针头6号(7号)与皮肤呈45°角方向进针，持针时手要稳，进针不宜过深，如刺穿血管，则很快引起皮下血肿，导致采血失败。一旦刺入皮肤进入血管，即可回抽一次性注射器抽动活塞柄，使管内形成负压，血液会自然流进注射器管内；或见采血针针头血管端回血，即把采血针另一端针头插入真空管内，这样能够准确判定血液是否进入血管。抽血时，一定要缓慢、轻柔，否则会使静脉瘪陷而采不出血。采血完毕，拔出采血针，采血部位用消毒过的棉球按压针眼，轻压止血。采血完毕后，及时做好血样的编号和采样表填写工作。

3 采血、分离血清的注意事项

3.1 选择合适的保定方法

应根据不同品种、大小、选择不同的保定方法。牛一般采用铁链条链颈部挽角栓柱保定。猪前腔静脉采血时大猪保定绳或套猪器套住上颌向前上拉，头与躯干成30°角，小猪应使头、躯干、后肢成一条直线，充分暴露静脉窝，使前腔静脉充盈。鸡保定应先抓住双脚，再小心合拢双脚保定双翅，抓单翅应防止拍翅而折断翅膀。

3.2 选择合适的采样用具

猪、牛采用一次性注射器或真空采血管，鸡鸭采用5mL 一次性注射器或真空采血管，每采完一畜一禽后更换注射器和针头。大猪前腔静脉采血时可选用12号针头，小猪选用7 或9号针头。选用真空采血管采血时，采血针针头一端先刺入血管，待见回血后，另一端针头再插入真空采血管内。

3.3 采样部位选择

根据畜禽的品种、年龄、大小选择采样部位。耳静脉采血时，选择较直较粗的血管，先从耳根部采血，如遇针头被甩出或血管被刺穿，静脉堵塞时，针头向耳尖移动2～5cm 刺入静脉采血。前腔静脉靠近心端粗且深，靠近头部浅且细。仔猪选择静脉窝心处垂直刺入，中猪适当靠前，母猪可在静脉窝2cm处刺入，如未见回血，摆动针头，直至有血液涌入针筒，抽足血液拔出注射器即可。

3.4 采血前的准备

采血场所要有充足的光线，地势要平坦、干燥。夏季采血应携带有冰块的冷藏包，及时将采集的血样保存在冷藏包内。采血人员应认真做好自身安全防护工作。采血用具、采血部位要进行消毒，并用灭菌干棉球擦干，已用过的采血器具要带回深埋，不得随便乱丢。采血用的采血器和注射器必须保持清洁干燥。采血前，应事先通知被采血养殖场或农户，在采血当天采血前不要饲喂畜禽。

3.5 血样的采集和处理

采血过程中禁止洗手，否则会出现溶血，影响检查的准确性。静脉采血对畜禽的影响不大。动物机体有储备血量，采少量的血液对机体影响很小。所采血样必须沿着试管壁或瓶子壁流入试管或瓶子中。每头(羽)动物采血量必须在2mL 以上。采血器或注射器采集血液后应留足空间，呈45°角倾斜静置，有利于血清析出，同时按规定编号并详细填写采样表。在血样还没离心前，不宜把所采血样放入冰箱，以免血球破裂发生溶血现象。待血清析出后，要尽快(1d内)把血清倒入离心管内，并按原编号编好后把分离好的血清放入冷冰箱内保存。短时间保存宜放入冷藏层，长时间保存宜放入冷冻层。分离的血清，一般不加防腐剂。血清应放在冰箱内冷冻保存。运送血清时可将血清放在盛有冰块的冷藏包中运送。