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(北京市丰台区疾病预防控制中心,北京 100071)
肺炎支原体 (MP) 是引起呼吸道感染的重要病原体,可引起咽炎、支气管炎、肺炎等常见疾病。目前,对MP的研究多来自儿童,而成人MP感染在流行病学、诊断等方面与儿童并不完全相同,相关资料也远少于儿童。近年来MP感染的发病率有所上升,特别是成年人感染率明显上升。为探讨北京市丰台地区呼吸道感染病例中MP的病原学分布概况,本研究对本区东方医院、丰台医院、长辛店医院2011年4月—2012年3月的呼吸道感染门诊、急诊病人进行MP感染检测,旨在大致了解其病原学分布概况,为更好进行临床病原学诊断提供依据。现将结果报告如下。
共收集到呼吸道感染病人咽拭子标本675例,其中男335例,女340例;年龄为2~83岁。病人以发热、头痛、咳嗽为主要症状,临床诊断为上呼吸道感染360例,肺炎223例,支气管炎41例,流感51例。
RNA提取试剂盒(德国Qiagen公司),逆转录酶(美国Invitrogen公司),荧光定量PCR试剂盒(美国Invitrogen公司),ABI 7500荧光定量PCR仪(美国ABI公司)。
1.3.1病毒核酸提取 分别吸取140 μL待检呼吸道咽拭子标本于EP管,按照病毒RNA(DNA)提取试剂盒说明提取病毒核酸。
1.3.2实时荧光定量PCR 检测体系包括荧光定量PCR试剂盒中的缓冲液12.5 μL,上下游引物各0.5 μL,探针0.5 μL,MgCl21.5 μL,dNTP 0.5 μL,逆转录酶0.25 μL,Rox 0.05 μL,Rnase free H2O 3.55 μL,RNA模板5 μL。反应条件为:95 ℃ 3 min, 95 ℃ 15 s, 55 ℃ 30 s,45个循环。
1.3.3阳性结果的判定 出现S形扩增曲线,Ct值小于35为MP检测阳性。
采用SPSS 11.5及PPMS 1.5[1]统计软件进行统计处理。
检测出肺炎支原体感染人数为98人,感染率为14.52%。
春季、夏季、秋季、冬季四季节的MP感染率分别为15.38%、18.18%、19.67%及11.54%,4组间比较差异无显著性(P>0.05)。
本文675份标本,男性MP感染率为16.07%;女性MP感染率为12.17%,两组间比较差异无显著性(P>0.05)。
本文5~20岁、21~39岁、40~64岁组MP感染率分别为13.33%、14.79%、16.67%,3组间比较差异无显著性(P>0.05)。
上呼吸道感染病人MP感染率为6.90%,肺炎病人为33.82%,两组病人比较差异有显著性(χ2=69.02,P<0.05)。支气管炎病人和流感病人例数较少,未进行统计处理。
MP是导致儿童和成人急性呼吸道感染的主要病原体之一,流行病学资料表明,MP感染目前呈上升趋势[2]。由于MP早期诊断和及时有效治疗后疾病的预后良好,故早期准确诊断与治疗有着非常重要的意义。目前,检测MP的主要方法有分离培养、血清学检测和PCR法。由于MP培养困难,耗时长,而血清中MP-IgM往往在MP感染后1周左右方可被检出,因此早期快速诊断难以实现。实时荧光定量PCR方法灵敏度、特异度高,可用于MP感染的早期诊断[3]。
在感染的季节方面,MP感染全年均能发生,尤以秋冬季发病率为高。本研究结果显示,北京成人MP感染全年均可发生,而且四季发病率无明显差异。研究显示,男性和女性病人MP感染率相近。本研究结果也得出了相似的结论。
本研究结果显示,上呼吸道感染病人MP的感染率远低于肺炎病人。引起上呼吸道感染的因素比较多,而且MP和下呼吸道感染关系比较密切,故上呼吸道感染病人MP感染率较低。资料表明,MP在不同国家(地区)间的急性感染率差异较大,北京地区MP感染率明显高于其他地区。刘又宁等[4]收集2001年11月—2002年6月社区获得性肺炎病人共103例,23例检出MP。本研究中肺炎病人MP感染率为33.82%,高于这个比例。
综上所述,MP是2011—2012年引起北京丰台地区人群肺炎的主要病原之一,病原的确定可为临床诊断和治疗提供可靠依据。
[1] 周晓彬. 医用统计学软件PPMS 1.5在医学科学研究中的应用价值[J]. 青岛大学医学院学报, 2011,47(6):504-506.
[2] 中华医学会儿科学分会呼吸学组,中华儿科杂志编辑委员会. 儿童社区获得性肺炎管理指南(试行,下)[J]. 中华儿科杂志, 2007,45(3):223-230.
[3] DUMKE R, SCHURWANZ N, LENZ M, et al. Sensitive detection of Mycoplasma pneumoniae in human respiratory tract samples by optimized real-time PCR approach [J]. Journal of Clinical Microbiology, 2007,45(8):2726-2730.
[4] 刘又宁,赵铁梅,姚婉贞,等. 北京地区成人社区获得性肺炎非典型病原体流行病学调查[J]. 中华结核和呼吸杂志, 2004,27(1):27-30.