C反应蛋白方法学相关性分析

梁丹荔

（广西壮族自治区永福县中医院检验科 541800）

C反应蛋白（creation protein，CRP）是机体一种重要的急性期蛋白，由肝脏合成并释放入血液，在健康人血液中含量极微，当机体细菌感染和组织损伤时，CRP的浓度显著增高，因而是体内各种炎症和组织损伤的敏感性指标［1］。近年来随着越来越多的检测方法相继问世，CRP的测定已广泛应用于临床疾病的早期诊断和鉴别诊断［2－3］。本检验科近3年来也开展了CRP检测，并且根据不同需要开展了两种方法学的检测，深受临床医生欢迎。现对本科室开展的免疫比浊法（使用全自动生化分析仪）和免疫荧光干式定量法（使用免疫荧光分析仪）进行相关性探讨，报道如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料 收集本院2012年3～4月门诊和住院的125例做CRP检测患者的新鲜血清，其中男73例，女52例，年龄2～80岁，取同份血清用两种方法测定CRP浓度。

1.2 仪器与方法

1.2.1 免疫比浊法 试剂1（R1）甘氨酸缓冲液，试剂2（R2）兔抗人C反应蛋白致敏胶乳颗粒。校准品：为以混合人血清为基质的液体形式的C反应蛋白校准品1～5，浓度分别为5、20、40、160、320mg／L。C反应蛋白校准品赋值的计量学溯源性为IRMMCRM470。在长春迪瑞CS-600型全自动生化分析仪进行检测。其反应类型：两点终点法反应，反应方向：吸光度上升的反应，温度37℃，光经1cm、主波长570nm。

1.2.2 免疫荧光干式定量法 将检测缓冲液和血液样本在检测瓶中进行混合，缓冲液中的荧光标记抗CRP抗体和血液中的CRP抗原结合形成抗原抗体复合物。当混合样本被放到反应板的样本位上并通过毛细血管作用扩散到硝化纤维基质的测试带上，该复合物被检测带上的抗CRP抗体所捕获。因此，血液样品的CRP越多，测试带上的复合物聚集得越多。荧光抗体的信号强度反映了被捕获的CRP的数量，经过i-CHROMA Reader免疫荧光分析仪的处理，能够反映出血液样本中CRP的浓度。试剂盒：（1）反应板 25／50／100／200人份／盒；（2）检测缓冲液25／50／100／200管／盒（每管500μL）；（3）取样器25／50／100／200个／盒；（4）ID芯片1个／盒。反应板含有固化了的鼠抗人CRP单克隆抗体的检测线和固化了兔IgG的控制线。预分装在管子里的检测缓冲液含有荧光标记的抗人CRP（鼠单克隆），荧光标记的抗兔IgG的凝胶作为稳定剂，叠氮化钠。试剂准备 ：从冰箱中取出检测缓冲液后需要在室温环境中放置10min，使其恢复至室温后方可使用。

2 结 果

对125例患者的同分血清作CRP的免疫比浊法和免疫荧光干式定量法的测定结果，进行线性回归分析，以免疫比浊法结果为横坐标X，免疫荧光干式定量法为纵坐标Y（检测范围0.1～200mg／L），结果显示：Y＝1.12 X－0.53（r＝0.92，P＜0.05），证明两种方法具有良好相关性。

3 讨 论

C反应蛋白是一种急性时相蛋白，在急性和慢性感染、心肌梗死、创伤、肿瘤时浓度急剧上升，检测CRP对临床诊断具有重要参考价值［4］，现在越来越受到临床医生的关注。

免疫比浊法的检测原理：C反应蛋白试剂是大小均一的聚苯乙烯乳胶颗粒悬液，颗粒表面包被有兔抗人C反应蛋白抗体，样品中C反应蛋白与之结合后，立即发生凝集反应，并产生浊度改变。该浊度与样品中C反应蛋白浓度成正比，通过在570nm处测定吸光度的变化值，即可测得样品中C反应蛋白的浓度。在全自动生化分析仪上检测，检测结果恒定，较适合大样本量的工作。而免疫荧光干式定量法的工作原理为：免疫荧光分析仪使用激光作为激发光源，在检测中荧光染料的发射光被收集并被转化为电信号，电信号的强弱和代表荧光染料分子的斑点的数量严格相关。当经缓冲稀释后的检测样本加入到检测板后，检测板被插入免疫荧光分析仪中，被分析物的浓度通过一个预编程的定标过程被检测出来，所以荧光免疫分析法测定快速简便，更适合单一的标本检测。由于这两种方法学具有高度的相关性，给检测工作带来很大的便捷，给临床提供了很好的服务。

［1］ 李瑶，刘洁，罗春燕，等.C反应蛋白在儿科感染性疾病中的临床应用［J］.云南医药，2009，30（1）：28-29.

［2］ Duelos TW.Function of C-reactive Protein［J］.Ann Med，2007，32（11）：274-278.

［3］ Volanakis JE.Humam C-reactive Protein：expression，Strix-ture，and function［J］.Mol Lmmuno，2006，38（10）：189-197.

［4］ 王慧，罗炜，陈涛.免疫透射比浊法CRP检测试剂盒的性能评价［J］.中国热带医学，2006，6（8）：1479-1480.