电化学发光法检测甲胎蛋白的精密度验证

梅丽春，王 凡，蒋红君，黄秀群

（1.云南省昭通市第一人民医院检验科 657000；2.云南省第一人民医院检验科，昆明 650032）

根据美国《临床实验室改进法案修正案》以及2003年国际标准化组织发布的医学实验室认可标准ISO15189，均要求临床实验室在开展某一检测项目前，需提供并保留相关的方法学验证实验数据，即某一检测项目在正式用来检测患者标本、发出检验报告前，实验室需对其相关方法学分析性能予以验证，对厂商提供的评价资料中的主要性能予以确认。对封闭系统只需做基本性能验证实验，即精密度、准确度、临床可报告范围和参考区间验证实验［1］。作者参照相关文件，对电化学发光法检测甲胎蛋白（AFP）的精密度进行验证，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂 罗氏Elecsys2010全自动电化学发光免疫分析仪。罗氏电化学发光AFP试剂盒，批号为152172，配套校准品，批号为181641，通用稀释液。

1.2 标本 英国朗道公司高、低值免疫质控品，批号分别为637EC、642EC；混合高、低值AFP标本各1份。

1.4 方法 按照操作说明书的要求对仪器进行常规的保养和维护，每天进行常规质控（两个浓度水平），质控在控后进行验证实验。精密度验证实验：按照EP10-A2《临床实验室定量方法的初步评价》对AFP测定的精密度进行验证，通过实验得到估计的批内标准差（S批内）和总的标准差（S总），并与厂家声明的批内标准差和总标准差比较［2］。

2 结 果

罗氏公司声明Elecsys2010电化学发光法检测AFP的批内精密度为3%，总精密度为6%，因为S批内＜2／3S总，所以作者每天分析两个浓度水平的室内质控品，每个浓度重复测定4次，连续5d［1］。结果见表1及表2。

表1 电化学发光法检测AFP精密度验证实验数据（低值）（U／mL）

表2 电化学发光法检测AFP精密度验证实验数据（高值）（U／mL）

从表1可以看出，对低值标本（测定均值为11.90U／mL）厂家声明S批内＜0.36U／mL，S总＜0.71U／mL，验证的S批内为0.28U／mL，S总为0.45U／mL，均处于厂家声明的允许范围内。

从表2可以看出，对高值标本（测定均值为237.23U／mL），厂家声明S批内＜7.11U／mL，S总＜14.23U／mL，验证的S批内为2.85U／mL，S总为3.50U／mL，均小于厂家声明的允许范围。从表1、表2可知，对于高值和低值标本，验证的AFP测定批内精密度及总精密度均与厂家声明一致。

3 讨 论

临床实验室修正法规（CLIA）规定了检测系统性能评估的最基本要求为精密度、准确度、可报告范围和参考区间，即医学实验室至少必须对所选用的检测系统的上述4项性能指标进行验证。临床实验室的验证实验不同于厂家在建立检测系统时进行的建立实验，也不同于厂家确认其检测系统性能时的确认实验，要求使用简便快捷、便于操作的方法来验证厂家已经声明的性能参数。

对于精密度的验证，目前国内主要参考临床和实验室标准化协会（CLSI）EP6-A，准确度的验证主要参考EP9-A2。精密度性能是检测系统的基本分析性能之一，也是其他方法学评价的基础，国内临床实验室对样品只作单次测量便发出报告，所以精密度性能更是至关重要［3］。EP10-A2《临床实验室定量方法的初步评价》使用户通过最小的努力即可核实厂家声明的精密度性能，作者使用该方案对电化学发光测定AFP的批内不精密度和总不精密度进行验证，厂家声明的批内不精密度为3%，总不精密度为6%，表1及表2结果显示，低AFP测定值标本验证的S批内为0.28U／mL，S总为0.45U／mL，高 AFP测定值标本验证的S批内为 U／mL，S总为3.50U／mL，均小于厂家声明值。

上述结果显示，对于高值和低值标本，电化学发光检测AFP测定批内精密度及总精密度均符合厂家声明的范围，此验证方案和实验方法简便可行，可用于其他项目的性能验证。

［1］ 杨有业，张秀明.临床检验方法学评价［M］.北京：人民卫生出版社，2008.

［2］ 毕波，吕元.定量检测方法学性能验证的系统设计［J］.中华检验医学杂志，2007，30（2）：143-145.

［3］ 杨志钊，缪丽韶.利用CLSI EP15-A指南验证精密度和准确度［J］.国际检验医学杂志，2010，31（3）：231-232.