溶血性贫血的溶血检查及临床意义

闫晓琳

溶血性贫血是当体内红细胞破坏过度超过骨髓代偿能力时, 临床可出现不同程度的贫血。实验室检查用于证实溶血的存在并确定病因。贫血的患者发现网织红细胞增多是诊断溶血的最有用指标, 其他网织红细胞增多的贫血还见于活动性失血、骨髓炎、红系造血抑制的恢复期。溶血性贫血的诊断首先应确定是否存在溶血, 根据红细胞破坏增加和代偿增生的实验室依据, 确定为溶血性贫血。

1 实验室诊断技术

1. 1 显示红细胞破坏增加的依据

1. 1. 1 红细胞寿命测定 将放射性核素51Cr标记的红细胞注入血循环后, 逐日观察其消失率, 记录成活曲线, 进而计算出红细胞寿命,测定红细胞的半衰期(t1/2)。半衰期为25～32 d。红细胞形态改变对某些溶血性贫血的诊断可提供重要的线索或依据。

1. 1. 2 血浆游离血红蛋白检测 采用过氧化物酶法检测血浆游离血红蛋白。取肝素抗凝血2 ml, 分离血浆备用。取试管3支, 标明测定管、标准管、空白管。充分混匀后, 在波长435 nm处用空白管调零, 读取各管吸光度值,所有容器应避免血红蛋白污染。标本勿溶血,以免出现假阳性结果［1］。

1. 1. 3 血清结合珠蛋白检测 血清0.1 ml加33 g/L Hb 溶液 10 μl, 混匀 , 胃 37℃水箱中 10 min。此时标本中Hb的终末溶度为3 g/L。在电泳槽中加入pH值8.6巴比妥缓冲液, 平衡两槽液面。取2 cm×8 cm醋纤膜条, 置浸液中湿润, 用滤纸吸去多余水分。在一端2.5 cm处加上述血清约5 μl, 待血清完全吸人薄膜后,将醋纤膜条置电泳槽上, 加盖, 平衡10 min。切断电源, 取出醋纤膜条, 趁潮湿时立即将两条区带分别剪下洗脱。

1. 1. 4 高铁血红素白蛋白 取血浆或血清1 ml, 在上面覆盖一层乙醚, 然后加入0.1 ml的饱和黄色硫化铵溶液, 混合。用分光镜或分光光度计检查, 若在波长558 nm处有一强吸收峰即为阳性, 正常人呈阴性。

1. 2 显示红细胞代偿增加的依据

1. 2. 1 网织红细胞增多 网织红细胞增多表示骨髓红细胞系增生旺盛, 多数贫血(再生障碍性贫血除外)网织红细胞计数均可增高, 如溶血性贫血时由于大量网织红细胞浸入血循环, 可使网织红细胞高达0.20或更高；恶性贫血或缺铁性贫血在药物治疗有效时网织红细胞计数亦可短期内增高。

1. 2. 2 外周血涂片中见到红系增生旺盛的红细胞形态学改变, 如嗜多色性细胞、有核红细胞、 Howell-Jolly小体、Cabot环及大型红细胞增多等。

1. 2. 3 增生性贫血骨髓象 溶血性贫血时,幼红细胞显著增生, 以中、晚幼红细胞为主,粒红比例倒置。

2 临床意义

正常血浆只有微量的游离血红蛋白, 当大量溶血时主要是急性血管内溶血, 游离血红蛋白明显增高。大量溶血时, 血清游离胆红素增高。血管内溶血后, 游离血红蛋白能与血液中的结合珠蛋白相结合, 这种复合物在单核-巨噬细胞系统被清除, 导致结合珠蛋白降低。当游离血红蛋白增多, 超过了结合珠蛋白所能结合的量, 多余的血红蛋白即从肾小球滤出,出现血红蛋白尿, 尿呈酱油色, 镜检无红细胞,隐血试验阳性。含铁血黄素尿主要见于慢性血管内溶血, 尿Rous试验阳性。

对溶血性贫血的患者而言, 详细询问病史和体格检查可以为病因提供重要线索。患者一般会有乏力等贫血症状, 黄疸和茶红色尿多见, 应详问药物及毒素接触史, 体格检查易发现皮肤黏膜感染, 脾大较常见［2］。红细胞可以在成熟前被循环中尤其是肝、脾的巨噬细胞清除, 即血管外溶血或者循环中膜被破坏,即血管内溶血。两种机制都会使血红素代谢增加, 非结合胆红素(间接胆红素)增加, >34 μmol/L或2 mg/dl时, 临床可见黄疸。溶血的患者如果肝功能未受损, 则非结合胆红素很少超过 70～85 μmol/L(4～5 mg/dl), 而在 Gilbert's综合征患者中胆红素结合存在缺陷, 非结合胆红素将会继续上升。血管内溶血导致血浆中血红蛋白上升, 数量超过肾小管吸收能力时, 即会出现血红蛋白尿。3～4 d后, 尿中即会出现含铁血黄素并可持续到血红蛋白尿停止后数周, 因此, 血红蛋白尿象征严重的血管内溶血,血红蛋白尿需与血尿和横纹肌肉瘤溶解造成的肌球蛋白尿鉴别。不存在组织损伤时, 血清酶水平可用于溶血患者的诊断和监测。乳酸脱氢酶LDH可随着红细胞的破坏而增加, 谷草转氨酶也会(AST)有所升高, 而谷丙转氨酶正常。

［1］马骢. 溶血性贫血的实验检查及进展. 继续医学教育, 2006,20(26):20-23.

［2］杨志娟, 唐任光. 血清酶测定在贫血疾病中的临床应用价值初探. 实用医技杂志, 2007,14(34):4686-4688.