丹参、三七等中药对关节炎小鼠抗炎作用的实验研究

林晓明 刘 萍 刘树群 杨 冬 国 华

(1.泰安市第一人民医院； 2.泰山医学院附属泰山医院，山东 泰安 271000)

关节炎是一种非感染性炎症，与巨噬细胞分泌的炎症细胞因子、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)有关。有的研究表明该病是一种免疫性炎症，在炎症机制研究中涉及免疫学、病理学等科学领域，尽管近年来对炎症递质中的细胞因子的研究比较活跃，但细胞因子在关节炎中的作用及其机制需要进一步开展研究。有关文献中药治疗关节炎仅限于临床，而中药疗法具体作用机制未见报道。膝关节创伤性滑膜炎动物模型经过一次预实验适当地改造后，采用ELISA法检测中药有效成份抑制关节炎小鼠中IL-1β和TNF-α的作用及机制。

1 材料和方法

1.1关节炎小鼠动物模型的建立与分组 选择纯系雄小鼠12只，体重100～150 g,以1 mg/kg左下腹腔注射细菌脂多糖(LPS),制成关节炎模型12只，再随机分为：模型组6只、中药组6只，其中模型组动物的正常肢设为对照组，共18个关节。

1.2方法 从造模的第1天起，中药组开始灌胃给药，药液浓度为1 g/ml，每次给药量为4.7 ml/kg，1次/d，共10天；造模组给予等量生理盐水。造模后的第11天，用空气栓塞法将小鼠处死，切开膝关节囊，经观察记录后，用1 ml生理盐水灌洗关节腔收集关节液，用肉眼观察其色质情况后置于硅化试管中，离心(4℃，1800 r/min,10 min),收集上清液，-70℃进行低温冷冻保存待用。大体观察各组动物膝关节皮色、关节液色质和滑膜厚度的变化情况。用双抗体夹心酶联免疫吸附实验ELISA检测各组鼠关节滑液中的白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α表达水平。

2 结 果

2.1一般观察 正常情况下，关节皮色是常态，不出现红肿，滑液量少，清亮透明，滑膜厚度正常。在两组未造膜的正常肢呈现的情况与上述一致。模型组的造模肢皮色出现红肿、滑液渗出多，呈浅黄色且质浊、滑膜增厚，与急性炎症情况反应一致。中药组造模肢由于用药的原故，滑膜炎症减轻，滑膜轻微增厚。

2.2小鼠关节液中IL-1β和TNF-α水平 见表1。

表1 各组关节液中IL-1β和TNF-α水平比较

注：aP<0.05,vs对照组;bP<0.05,vs模型组。

由表1显示：①模型组炎症细胞因子白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α较对照组表达水平高，差异有统计学意义(P<0.05)。②中药组炎症细胞因子白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α较模型组表达水平低，差异有统计学意义(P<0.05)。

3 讨 论

关节炎是一种自身免疫性疾病，临床上通常给予糖皮质激素及非甾体类抗炎药治疗，但副作用较大，效果较差。随着近年来中药的抗炎应用增多，但作用机制的诸多空白亟待填充。深入研究此类中药的作用机制，有助于为抗炎中药的临床应用提供理论基础。本实验研究结果表明，关节炎小鼠关节液中炎症细胞因子白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α表达水平比较，模型组的质量浓度最高，中药组次之，对照组最小。可见高浓度炎症细胞因子的出现，提示白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α在关节炎病理过程中起一定作用。研究还显示，中药组与模型组比较：中药组小鼠关节液中白细胞介素Iβ和肿瘤坏死因子α表达水平显著降低，提示中药疗法能够抑制炎症细胞因子白细胞介素Iβ和肿瘤坏死因子α的表达。经分析，IL-β在炎症反应中可提高内皮细胞通透性，促进中性粒细胞和内皮细胞间的粘附，对炎症性器官损伤有重要作用。TNF-α是机体炎症反应与免疫应答的重要调节因子，可在内毒素、病毒及其它细胞因子的刺激下由不同细胞分泌，是强有力的促炎症反应的细胞因子。

总之，本实验证明：三七、丹参有效成份可以通过抑制IL-1β和TNF-α水平，而发挥抗炎作用。

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