脂肪酸合成酶在三阴性乳腺癌中的表达及其预后价值

孙 弢， 姚宇锋

三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer, TNBC)为雌激素受体(estrogen receptor, ER)、孕激素受体(progesterone receptor, PR)、人类表皮生长因子受体(human epidermal growth factor receptor-2, HER-2)均表达阴性的乳腺癌亚型，目前尚缺少有效的内分泌治疗和分子靶向治疗手段，预后差。脂肪酸合成酶(fatty acid synthase, FAS)是脂肪酸生物合成的关键酶，在多种肿瘤组织中的表达增高[1-3]，既往针对FAS和TNBC的研究局限于FAS与临床病理特征的相关性，不能直接反映其预后价值。因此本研究在此基础上，对TNBC患者进行随访，通过生存分析进一步揭示FAS的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集安徽省滁州市第一人民医院及江苏省肿瘤医院2006年1月1日至2012年6月30日手术病理确诊的TNBC 176例，均为女性，中位年龄49岁(22～73岁)，其中绝经前患者121例，绝经后55例。所有患者均为初诊可手术患者，并经术后病理确诊为浸润性乳腺癌，免疫组化检测确诊为ER、PR和HER-2的表达均为阴性。其中浸润性导管癌141例，浸润性小叶癌19例，其他类型16例。组织学分级Ⅰ级77例，Ⅱ级63例，Ⅲ级36例。术后根据AJCC病理学分期Ⅰ期91例，Ⅱ期56例，Ⅲ期29例，其中T1 92例，T2 63例，T3 25例，淋巴结转移54例，无转移122例。

1.2 免疫组织化学染色 采用Envision两步法完成免疫组织化学染色，检测FAS的表达情况，FAS阳性定位于细胞质，其的判断采用阳性染色强度结合阳性细胞所占百分比进行判断，将切片中平均阳性细胞比例及染色深浅分别计分，阳性细胞比例≤1%为0分，2%～10%为1分，11% ～50%为2分，51%～80%为3分，≥81%为4分，染色深浅以多数细胞为准，从无显色至深棕色分别为0～3分，以上述2项评分之和作为每例患者的积分, 按积分高低判定FAS表达水平，≤3分为阴性表达，≥4分为阳性表达。

1.3 随访 所有患者接受定期随访复查，复查包括临床体检、肿瘤标志物、影像学检查等，随访截止至患者死亡或2012年12月，随访时间以月为单位。患者无病生存时间为手术日期至首次局部复发或远处转移确诊日期，总生存时间为手术日期至患者死亡日期。

1.4 统计学分析 采用SPSS 13.0统计软件包进

行统计分析，以P<0.05作为差异有统计学意义。不同FAS蛋白表达组间临床病理资料比较采用χ2检验。生存曲线用寿命表法绘制，生存率间差异的比较用Wilcoxon检验。

2 结果

2.1 FAS表达与TNBC临床病理特征的关系 176例TNBC患者中FAS阳性表达率为68%(120/176)。单因素分析显示FAS表达与肿块大小、组织学分级、淋巴结转移具有相关性，与年龄、绝经状态、病理学类型无关，具体数据见表1。

表1 FAS表达与TNBC临床病理特征的关系

2.2 FAS表达与TNBC患者预后的关系 所有病例均完成定期随访复查，截止2012年12月，中位随访时间为49个月(6～97个月)。寿命表法绘制生存曲线显示FAS阴性表达组的5年无病生存率(RFS)和5年总生存率(OS)分别为73%、84%，阳性表达组的5年无病生存率和5年总生存率分别为21%、55%，两组比较差异具有统计学意义(P<0.01，见图1，图2)。

图1 TNBC不同FAS表达状态的RFS生存分析

图2 TNBC不同FAS表达状态的OS生存分析

3 讨论

脂肪酸在能量储存、胞膜结构的维持、蛋白质酰化等方面具有重要的生理作用[4]。人体一般从饮食中或者自身合成途径获取。FAS是脂肪酸合成途径的关键酶。乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH等通过FAS合成长链脂肪酸[5]。在正常人体组织中FAS不表达或者低表达，因为人体主要从饮食途径获取绝大多数的脂肪酸。但是在癌组织中由于肿瘤细胞快速增殖需要充分的能量供应和膜脂的生物合成，FAS显著增高。因此FAS被称为代谢性致癌基因。

TNBC目前尚无明确的作用靶点，内分泌治疗及针对HER-2的分子靶向治疗对其无效，因此临床容易发生复发与转移，预后差，寻找合适的作用靶点是目前TNBC研究的热点。既往研究发现FAS在乳腺癌中过表达，但是在正常乳腺组织及乳腺良性肿瘤中低表达或者无表达[6]。我们的研究发现在TNBC中FAS阳性表达率为68%。在进行单因素分析时显示，FAS的表达与肿瘤大小、组织学分级及淋巴结转移存在相关性，但是与年龄、绝经状态、病理学类型等无关。较大的肿瘤体积、高组织学分级、存在淋巴结转移是乳腺癌的不良预后因素，这也提示FAS阳性表达的TNBC预后更差。

为了进一步明确FAS在TNBC预后评价中的价值，我们对入组的176例患者进行了定期随访，生存分析显示FAS表达阳性的TNBC患者的5年无病生存率和总生存率，均显著高于FAS表达阴性者。此提示FAS可能成为判断TNBC患者预后的一个指标，甚至成为TNBC的治疗靶标。

既往研究通过RNA干扰技术下调FAS的表达能够抑制LNCaP细胞的增殖，而对正常细胞没有影响[7]。下调FAS能够显著提高乳腺癌细胞株对紫杉类及长春碱类化疗药物的敏感性。目前FAS抑制剂变蓝菌素、C75和奥利司他均能有效抑制FAS的表达，但是其性质不稳定，且在动物模型中通过活化CPT-1出现诸如厌食、体重下降等副作用，这些副作用限制了其临床应用[8]。因此目前希望能够发现特异性靶向肿瘤细胞，但是对正常细胞作用较小的FAS抑制剂，使FAS成为TNBC治疗的新靶点。

[1] Walter K, Hong SM, Nyhan S, et al. Serum fatty acid synthase as a marker of pancreatic neoplasia[J]. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev, 2009, 18(9): 2380-2385.

[2] Uddin S, Hussain AR, Ahmed M, et al. High prevalence of fatty acid synthase expression in colorectal cancers in Middle Eastern patients and its potential role as a therapeutic target[J]. Am J Gastroenterol, 2009, 104(7): 1790-1801.

[3] Kearney KE,Pretlow TG,Pretlow TP. Increased expression of fatty acid synthase in human aberrant crypt foci: possible target for colorectal cancer prevention[J].Int J Cancer,2009, 125(1): 249-252.

[4] Kuhajda FP. Fatty-acid synthase and human cancer: new perspectives on its role in tumor biology[J].Nutrition,2000, 16(3): 202-208.

[5] Menendez JA, Lupu R. Fatty acid synthase and the lipogenic phenotype in cancer pathogenesis[J].Nat Rev Cancer,2007,7(10): 763-777.

[6] 王书云, 花天放, 胡宏慧, 等. 脂肪酸合成酶在乳腺良恶性病变组织中的表达[J]. 中国普通外科杂志, 2007, 16(3): 288-290.

[7] Menendez JA,Colomer R,Lupu R. Inhibition of tumor-associated fatty acid synthase activity enhances vinorelbine (Navelbine)-induced cytotoxicity and apoptotic cell death in human breast cancer cells[J]. Oncol Rep, 2004, 12(2): 411-422.

[8] Pandey PR, Liu W, Xing F, et al. Anti-cancer drugs targeting fatty acid synthase (FAS) [J]. Recent Pat Anticancer Drug Discov, 2012, 7(2):185-197.