胃炎康胶囊质量标准研究

宋愿智 罗秦英 宋 哲

1.陕西省食品药品检验所，陕西西安 710061；2.西安交通大学第一附属医院，陕西西安 710061；3.西安市红十字会医院，陕西西安 710054

胃炎康胶囊系《卫生部药品标准中药成方制剂第十三册》收载品种，标准代号为WS3-B-2564-97。本品由白芍、甘草、桂枝等6味药材经加工制备而成。具有疏肝和胃，缓急止痛功效，主治胃脘疼痛、呕恶泛酸、烧灼不适；用于十二指肠溃疡、胆汁反流性胃炎等具有上述症状者的治疗［1］。原质量标准除“检查”项外，仅有一项显微鉴别，无含量测定项，根本无法控制产品的质量。为此，笔者进行了胃炎康胶囊产品的质量标准研究工作，应用薄层色谱法对其白芍、黄连、桂枝、高良姜进行定性鉴别，对白芍的芍药苷含量通过HPLC法进行测定，现将各项指标鉴别方法过程及结果报道如下。

1 资料

1.1 仪器

鉴别仪器：Spectra System P400高效液相色谱仪；赛多利斯BP211D电子天平；三用紫外仪ZF-2（上海安亭电子仪器厂）。

1.2 试药

芍药苷对照品（批号110736-200833，供含量测定用）、盐酸小檗碱对照品（批号110713-201117，供含量测定用）、桂皮醛对照品（批号110710-201016，供含量测定用）、高良姜（批号121263-20040，供TLC鉴别用）、黄连（批号120913-201008，供TLC鉴别用）。对照药材均购自中国药品生物制品检定所；胃炎康胶囊及不含被测药材的阴性对照品（由省内某企业研制生产）；硅胶G（青岛海洋化工厂生产）；乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 白芍的鉴别

2.1.1 供试品溶液配制 取10粒白芍样品，将内容物倒出，溶解于20mL乙醇溶液中，进行20min的超声处理，滤过后蒸干滤液，残渣加入加20mL水溶解，水饱和的正丁醇对溶液进行3次提取，20mL/次，将3次正丁醇液合并后水洗3次，15mL/次，弃去水洗液。蒸干正丁醇液后将余留残渣用1mL乙醇溶解，溶液加入已处理好的中性氧化铝小柱（200～300目，1g，内径10～15mm）上，洗脱液用甲醇，加入40mL甲醇进行洗脱，收集洗脱液，溶液蒸干，滤渣经0.5mL乙醇溶解，溶液备用。

2.1.2 对照品溶液配制 用甲醇溶液将适量芍药苷对照品溶解制成，2mg/mL的对照品溶液备用。

2.1.3 阴性对照溶液配制 配制方法及配置过程参照上述供试品溶液的制法。

2.1.4 鉴别试验 参照中国药典2010年版一部附录Ⅵ B中关于薄层色谱法标明的具体鉴别方法，各吸取5μL供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液，分别点样于同一块硅胶G薄层板上，在展开剂配置比例以40∶5∶10∶0.2的三氯甲烷—醋酸乙酯—甲醇—甲酸的溶液中进行展开，展开后将硅胶G薄层板从展开剂中取出并晾干，采用香草醛硫酸溶液（5％）喷洒薄层板，并放置于110℃高温环境中加热薄层板，直至有清晰的显色斑点出现，阴性对照溶点样不显色，不干扰对照品色谱和供试品色谱显色，对照品与供试品在硅胶G薄层色谱板相同位置上显示同一颜色的斑点。

2.2 黄连的鉴别

2.2.1 供试品溶液配制 5粒黄连样品，倾出内容物，30mL甲醇溶液溶解后进行15min的加热回流，滤过残渣，滤液浓缩至4mL备用。

2.2.2 对照品溶液配制 取0.1g黄连对照品，依据上述供试品溶液的配制方法制成对照药材溶液；取适量的盐酸小檗碱对照品，用甲醇溶解制成0.5mg/mL溶液备用。

2.2.3 阴性对照溶液的配制 配制方法及配置过程参照上述供试品溶液的制法。

2.2.4 鉴别试验 参照中国药典2010年版一部附录Ⅵ B中关于薄层色谱法标明的具体鉴别方法，各吸取5μL供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液，分别点样于同一块硅胶G薄层板上，在展开剂配置比例6∶3∶1.5∶1.5∶0.3的甲苯—醋酸乙酯—异丙醇—甲醇—水溶剂中与氨蒸气饱和条件下展开，展开后将硅胶G薄层板从展开剂中取出并晾干，置于波长365nm的紫外光灯下检视。阴性对照溶点样不显色，不干扰对照品色谱和供试品色谱显色，对照品与供试品在硅胶G薄层色谱板相同位置上显示同一颜色的斑点。

2.3 桂枝的鉴别

2.3.1 供试品溶液制备 取10粒桂枝样品，将内容物倒出后用10mL乙醇溶液溶解，密塞，进行10min的超声处理，滤过残渣，浓缩滤液至1mL备用。

2.3.2 对照品溶液制备 乙醇溶解适量桂皮醛对照品制成1μL/mL溶液备用。

2.3.3 阴性对照溶液制备 配制方法及配置过程参照上述供试品溶液的制法，制成缺桂枝溶液备用。

2.3.4 鉴别试验 依据中国药典2010年版一部附录Ⅵ B中关于薄层色谱法的试验，各吸取10μL供试品和阴性对照溶液，吸取2μL对照品溶液，分别点样于同一块硅胶G薄层板上，在展开剂配比17∶3的石油醚（30～60℃）—醋酸乙酯溶剂中展开，从展开剂中取出硅胶G薄层板并晾干，采用二硝基苯肼乙醇试液喷洒硅胶G薄层板显色。阴性对照溶点样不显色，不干扰对照品色谱和供试品色谱显色，对照品与供试品在硅胶G薄层色谱板相同位置上显示同一颜色的斑点。

2.4 高良姜的鉴别

2.4.1 供试品溶液制备 取10粒高良姜样品，倾出内容物，置具塞锥形瓶中，加入10mL甲醇并浸渍2h，时时振摇，滤过残渣，滤液备用。

2.4.2 对照溶液制备 取0.25g高良姜对照品，参照上述供试品溶液的制法制备药材溶液。

2.4.3 阴性对照溶液制备 参照上述供试品溶液的制法制备方法制成缺高良姜溶液备用。

2.4.4 鉴别试验 依据中国药典2010年版一部附录Ⅵ B中关于薄层色谱法的试验，各吸取5μL的高良姜供试品、对照品和阴性对照溶液，分别点样于同一块硅胶G薄层板上，展开剂为甲苯—丙酮—甲酸，配置比例10∶2∶0.2。将硅胶G薄层板置于展开剂预饱和的层析缸内进行展开，取出并晾干。阴性对照溶点样不显色，不干扰对照品色谱和供试品色谱显色，对照品与供试品在硅胶G薄层色谱板相同位置上显示同一颜色的斑点。

2.5 含量测定

2.5.1 色谱条件与系统适应性试验 C18柱（5μm，150mm×4.6mm），流动相：乙腈-水（15∶85）；柱温∶24℃；流速：0.8mL/min；检测波长：230nm；理论板数按芍药苷峰计算应不低于3 000。

图1 色谱图

2.5.2 对照品溶液的制备 将选取的适量芍药苷对照品精密称定，甲醇溶解并制成0.04mg/mL的对照品溶液。

2.5.3 供试品溶液的制备 取10粒胃炎康胶囊，将倾出的内容物进行精密称定，精密称取细粉0.3g，置25mL量瓶中，加稀乙醇20mL，超声提取30min，放至室温，加稀乙醇稀释至25mL，摇匀，溶液用微孔滤膜（0.45μm）虑过，滤液备用。

2.5.4 线性关系考察精密 分别吸取2、4、6、8、10μL浓度0.08g/L对照品溶液进行进样，色谱条件以上述方法为主，峰面积积分值（y）和对照品量进行回归分析，得回归方程：Y=1.43×106X+970 46，相关系数r=0.999 9。分析结果：在0.16～0.80μg的范围内芍药苷呈良好的线性关系。

2.5.5 精密度试验 对同一浓度的对照品溶液精密吸取10μL并进行5次的重复进样，参照上述色谱条件测定峰面积，RSD为1.80％，显示仪器具有良好的精密度。

2.5.6 稳定性试验 精密吸取10μL供试品溶液，在0、2、4、6和8h分别参照上述色谱条件测定峰面积，结果RSD为1.40％，说明供试品溶液在8h内可保持稳定。

2.5.7 重现性试验 参照上述供试品溶液的制备方法对5份同一批胃炎康胶囊样品进行制备并测定，结果RSD为0.80％，表明胃炎康胶囊样品具有良好的重现性。

2.5.8 加样回收率试验分别加入一定量的芍药苷对照品溶液至5份已精密吸取已知含量的供试品溶液中，参照上述色谱条件测定峰面积，计算回收率，平均回收率可高达98.10％，RSD为1.05％。见表1。

表1 芍药苷加样回收率试验结果表（n=5）

2.5.9 样品测定 取供试品，依法测定，结果10批样品芍药苷含量均值为0.90mg/粒。

3 小结

本研究依据SFDA《药品注册管理办法》及相关药物研究技术指导原则［2-4］，对胃炎康胶囊产品的质量标准进行检测，选择薄层色谱法对其白芍、黄连、桂枝、高良姜进行定性鉴别；采用HPLC法对制剂中白芍的芍药苷含量进行测定，结果显示胃炎康胶囊样品具有良好的重现性，多次样品鉴别，均能检出与对照药材或对照品相同的斑点，样品检测结果准确，精密度和重复性高，回收率可高达99.10％。经实验结果证明，为胃炎康胶囊提供了一种较为科学有效的质量控制方法。

［1］中华人民共和国卫生部药典委员会.卫生部药品标准·中药成方制剂［S］.第13册，1997：132.

［2］国家食品药品监督管理局.局令28号：药品注册管理办法［S］.2007-7-10.

［3］国家食品药品监督管理局.药物研究技术指导原则（2005）［M］.北京：中国医药科技出版社，2005：196.

［4］国家药典委员会.中国药典（一部）［S］.北京：中国医药科技出版社，2010：96.