活络镇痛片镇痛、抗炎作用实验研究

刘 刚，胡还甫

（1.岳阳职业技术学院 生物医药系，湖南 岳阳414000；2.岳阳市洞庭湖区特色中药材综合利用重点实验室，湖南 岳阳414000）

类风湿性关节炎在我国的发病率为0.32%～0.36%［1］，活络镇痛片对于类风湿等所致的关节疼痛有较好的解除作用［2］。活络镇痛片是由天南星、红花、防风、白芷、当归等药物组成的片剂，临床上具有良好的舒筋活血、消瘀止痛作用。现将其镇痛、抗炎方面的实验研究报告如下。

1 仪器与资料

1.1 仪器

TF－1000型电子天平，湘仪天平仪器厂；FA104型电子分析天平，上海精密科学仪器有限公司；SHH－WH－420型高效三用恒温水箱，天津市泰斯特仪器有限公司；高效恒温水浴锅，北京长安科学仪器厂。

1.2 资料

实验动物：清洁级昆明种小鼠，体重18～22g，雌雄不限。以上实验动物均由华中科技大学同济医学院实验动物学部提供。

实验药品：活络镇痛片由中国药科大学提供（批号：040425）。

阳性对照药：骨刺宁胶囊：山西忻州市云中制药厂生产，批准文号：国药准字Z10970098，生产批号20040403。

其他药品及试剂：冰醋酸，上海佘山化工厂生产（批号：950710）。对二甲苯，武汉有机合成化工厂生产（批号：940826）。

2 方法与结果

2.1 对小鼠热板法致痛的影响

2.1.1 分组与实验方法

参照文献［3］取18～20g雌性清洁级小鼠若干只，于室温环境下放入恒温水浴锅顶加热到（55±0.5）℃的500mL 烧杯中，每次1只，用秒表记录小鼠自投入烧杯至出现舔后足的时间（s）作为该鼠的痛阈值，如此测定2次，间隔30min，取均值即为药前痛阈值（平均值不超过30s者为合格）。取符合要求的小鼠50只，按体重随机分成5组即：空白对照组，骨刺宁组，活络镇痛片低、中、高剂量组。各组动物每天灌胃给药1 次，于第3 次给药后分别于30min、60min、90min、120min按前法测定痛阈值，如痛阈值超过60s，即停止，测试值按60s计（时间过久，易烫伤足部）。

2.1.2 给药方法

空白对照组给予蒸馏水10mL／kg，其它各组按小鼠设定剂量给药，每天1次，连续给药3天。

2.1.3 检测指标及结果

实验结束，比较各组间的痛阈值，结果见表1。

表1 活络镇痛片对雌性小鼠热板法所致疼痛的影响 （±s）

表1 活络镇痛片对雌性小鼠热板法所致疼痛的影响 （±s）

注：与空白组比较＊P＞0.05，＊＊P＜0.05，＊＊＊P＜0.01。

组别 剂量（g／kg） 给药前痛阈值（s） 给药后痛阈值（s）及痛阈提高百分率（%）30min 60min 90min 120min空白对照组 等体积 18.8±2.6 19.0±2.3（1.1）19.0±4.4（1.1）19.8±4.5（5.3）19.3±2.5（2.7）骨刺宁组 0.96 18.6±1.8 23.0±2.7＊＊＊（23.7）28.0±2.9＊＊＊（50.5）26.8±4.0＊＊＊（44.1）23.8±3.2＊＊＊（28.0）活络镇痛片低剂量组 6 19.0±2.2 22.1±3.6＊＊（16.3）27.0±5.4＊＊＊（42.1）26.4±3.2＊＊＊（38.9）24.2±3.8＊＊＊（27.4）活络镇痛片中剂量组 12 18.9±1.5 23.7±3.3＊＊＊（25.4）30.7±4.9＊＊＊（62.4）28.2±3.5＊＊＊（49.2）25.5±4.7＊＊＊（34.9）活络镇痛片高剂量组 24 17.9±2.1 24.6±3.2＊＊＊（37.4）32.6±5.0＊＊＊（82.1）30.2±4.3＊＊＊（68.7）26.2±2.5＊＊＊（46.4）

括号内为痛阈提高百分率（%）＝（给药后痛阈值－给药前痛阈值）／给药前痛阈值×100%

由表1可见：与空白对照组比较，活络镇痛片各剂量组在给药后30～120min均有显著性差异。各组痛阈提高百分率在药后30min时，呈剂量相关性提高，在药后60min最明显，表明活络镇痛片对热刺激具有较好的镇痛作用。

2.2 对冰醋酸所致小鼠疼痛的影响

2.2.1 分组与实验方法

参照文献［4］方法，取体重18～22g清洁级小鼠50只，雌雄各半，随机分成5组，分别为空白对照组，骨刺宁组，活络镇痛片低、中、高剂量组。于末次给药30min后，每鼠腹腔注射（ip）0.6%醋酸0.1mL／10g，记录30min内扭体次数及各鼠首次出现扭体的时间（潜伏期）。

2.2.2 给药方法

空白对照组给予蒸馏水10mL／kg，其他各组按小鼠设定剂量给药，每天1次，连续给药3天。

2.2.3 检测指标及结果

实验结束，比较各组间的痛阈值，结果见表2。由表2可见：与空白对照组比较，活络镇痛片低、中、高剂量相关性地使小鼠扭体反应出现的时间延长，并显著降低扭体反应的次数，其中高剂量组扭体抑制率大于50%作用非常明显（P＜0.01），表明活络镇痛片有较好的镇痛作用。

表2 活络镇痛片对冰醋酸所致小鼠疼痛的影响 （±s）

表2 活络镇痛片对冰醋酸所致小鼠疼痛的影响 （±s）

注：与空白组比较＊P＞0.05，＊＊P＜0.05，＊＊＊P＜0.01。

组别 动物数（只） 剂量（g／kg） 疼痛潜伏时间（s） 扭体次数／30min 镇痛率（%）空白对照组 10 等体积3.1±0.7 41.7±6.3－骨刺宁组 10 0.96 5.3±1.3＊＊＊ 28.3±3.0＊＊＊ 32.1活络镇痛片低剂量组 10 6 6.2±1.4＊＊＊ 28.8±4.9＊＊＊ 30.9活络镇痛片中剂量组 10 12 7.3±1.1＊＊＊ 24.8±7.3＊＊＊ 40.5活络镇痛片高剂量组 10 24 7.4±1.4＊＊＊ 20.6±6.5＊＊＊50.6

2.3 抗炎试验

对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响［5］。

2.3.1 分组与实验方法

取体重18～22g，雄性NIH 系清洁级小鼠50只，随机分成5 组，分别为模型对照组，骨刺宁组，活络镇痛片低、中、高剂量组。各组动物每天灌胃给药1次。连续给药3d，末次给药后30min，每鼠右耳两面涂二甲苯0.1mL／只致炎，左耳不涂为正常耳对照，1h后脱颈椎处死，沿耳廓基线剪下双耳，用直径7mm 打孔器冲下左耳及右耳同一部位的圆片，立即在分析天平上称重。以左、右两耳重量差值为肿胀度，计算肿胀抑制率＝（模型组平均肿胀度－给药组平均肿胀度）／模型组平均肿胀度×100%。

2.3.2 给药方法

空白对照组给予蒸馏水20mL／kg，各组按小鼠设定剂量给药，每天1次，连续给药3天。

2.3.3 检测指标及结果

实验结束，比较各组间的痛阈值，结果见表3。

表3 活络镇痛片对二甲苯所致耳廓肿胀的影响 （±s，n＝10）

表3 活络镇痛片对二甲苯所致耳廓肿胀的影响 （±s，n＝10）

注：与模型组比较＊P＞0.05，＊＊P＜0.05，＊＊＊P＜0.01。

组别 剂量（g／kg） 右耳重（mg） 左耳重（mg） 耳廓肿胀度（mg） 肿胀抑制率（%）空白对照组 等体积 24.13±3.12 8.51±1.05 15.62±2.50—骨刺宁组 0.96 19.58±1.92 9.34±2.27 10.24±3.17＊＊＊ 34.4活络镇痛片低剂量组 6 18.86±2.49 8.71±0.89 10.15±2.67＊＊＊ 35.0活络镇痛片中剂量组 12 17.67±2.13 8.69±0.59 9.00±1.88＊＊＊ 42.4活络镇痛片高剂量组 24 16.87±2.79 9.24±1.17 7.63±2.16＊＊＊51.2

由表3可见，与模型对照组比较，活络镇痛片低、中、高剂量组均有显著性差异，且能呈剂量相关性地减轻二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，其中高剂量组肿胀抑制率大于50%，作用非常明显（P＜0.01）。表明活络镇痛片有较好的抗炎作用。

2.4 对大鼠角叉菜胶致足跖肿胀的影响

2.4.1 分组与实验方法

参照文献［5］取体重180～220g，雄性SD 系清洁级大鼠50只，随机分成5组，分别为模型对照组，骨刺宁组，活络镇痛片低、中、高剂量组。各组动物每天给药1次，连续给药4天，末次给药后30min用螺旋测微器测量每鼠右后肢足跖的厚度为致炎前足跖厚度，连测2次，求其平均值为正常厚度。然后在每鼠足跖中央皮下注入1%角叉菜胶0.1mL／只。测量致炎后1h、2h、4h、6h大鼠右后足跖的厚度，计算肿胀度及肿胀抑制率。

2.4.2 给药方法

模型对照组给予蒸馏水10mL／kg，各组按大鼠设定剂量给药，每天1次，连续给药4天。

2.4.3 检测指标及结果

实验结束，比较各组间的痛阈值，结果见表4。

由表4可见：活络镇痛片低、中、高剂量组对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀有显著的抑制作用，作用持续数小时之久，其中在致炎4h作用最为明显。

表4 活络镇痛片对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀度的影响 （mm＋s，n＝10）

表4 活络镇痛片对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀度的影响 （mm＋s，n＝10）

注：与模型组比较＊P＞0.05，＊＊P＜0.05，＊＊＊P＜0.01。

组别 给药前厚度 给药后实测值及肿胀度（抑制率%）1h肿胀度 2h肿胀度 4h肿胀度 6h 肿胀度模型对照组 4.85±0.28 1.43±0.27 2.34±0.44 2.87±0.59 1.62±0.34骨刺宁组 4.97±0.60 1.15±0.51＊ 1.66±0.68＊＊＊ 1.77±0.84＊＊＊ 1.18±0.58＊＊（19.58） （29.06） （38.33） （27.16）活络镇痛片低剂量组 4.74±0.49 1.12±0.55＊ 1.63±0.70＊＊＊ 1.87±0.48＊＊＊ 1.28±0.49＊（21.68） （30.34） （34.84） （20.99）活络镇痛片中剂量组 4.71±0.41 1.12±0.38＊ 1.65±0.34＊＊＊ 1.90±0.37＊＊＊ 1.30±0.51＊（21.68） （29.49） （33.8） （19.75）活络镇痛片高剂量组 4.90±0.28 1.02±0.47＊＊ 1.63±0.34＊＊＊ 1.74±0.36＊＊＊ 1.02±0.33＊＊＊（51.11） （30.34） （39.37） （37.04）

3 讨论

本实验通过选用小鼠热板法、冰醋酸致小鼠扭体法，对二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、大鼠角叉菜胶足跖肿胀法共四种实验方法进行研究活络镇痛片的镇痛抗炎的药理作用。实验结果显示活络镇痛片具有良好的抗炎、镇痛作用。类风湿关节炎属祖国医学中“痹症”范畴。该病以感受风寒湿邪、邪瘀凝结、痹阻经络为主，故在中医治疗上应根据邪气的盛衰，运用祛风除湿、活血通络等方法，标本兼治。活络镇痛片即为依据上述原理制定的以补血、活血、祛风为法则的抗炎止痛方剂，红花、当归均可使局部血液循环加快，当归补血活血，达到改善局部血液循环，增加局部营养，促进炎症消除并减轻炎症介质分泌等作用；防风、南星、白芷等祛风止痛、祛风湿，上药共达消除或减轻局部炎症和疼痛的效果，故有促进病变关节康复的作用。

［1］ 田广芳，杨小芳，雒生梅.类风湿，陡关节炎的护理体会［J］.中华实用中西医杂志，2011，24（9）：42－43.

［2］ 高茉，高文远，游强蓁，等.活络镇痛片质量标准研究［J］.天津中医药大学学报，2008，27（1）：33－34.

［3］ 李仪奎，中药药理实验方法学［M］.上海：上海科学技术出版社，2006.

［4］ 宫毅，谢均，杨阳.银芷肛肠熏洗剂镇痛、抗炎作用的实验研究［J］.中国中医药科技，2011，18（5）：398－399.

［5］ 马四补，隋艳华，李开斌，等.汝痔康胶囊抗炎镇痛作用的实验研究［J］.贵阳中医学院学报，2011，33（4）：146－147.