HPLC法测定复方金刚烷胺氨基比林片中氨基比林的溶出度

柏学敏，文丽丽，吕文军

（黑龙江省黑河市药品检验所，黑龙江 黑河 164300）

·论著·

HPLC法测定复方金刚烷胺氨基比林片中氨基比林的溶出度

柏学敏，文丽丽，吕文军

（黑龙江省黑河市药品检验所，黑龙江 黑河 164300）

目的 建立一种用高效液相色谱法测定复方金刚烷胺氨基比林片中氨基比林溶出度的方法。方法以水为溶出介质，转速为100 r·min－1，30 min时取样。选用色谱柱SunfireC18（250 mm×4.6 mm，5 μm）;流动相为甲醇－水（56:44）;检测波长:273 nm;流速:1.0 mL/min。结果氨基比林在11.9～71.47 μg/mL浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系（r= 0.9999）。平均回收率为99.05%。结论本方法简单、快速、结果准确可靠。

复方金刚烷胺氨基比林片;氨基比林;高效液相色谱法;溶出度

复方金刚烷胺氨基比林片为复方制剂，其组份为每片内含盐酸金刚烷胺0.1 g，氨基比林0.15 g，马来酸氯苯那敏0.002 g。国家药品标准复方金刚烷胺氨基比林片检查项中只要求符合片剂项下的有关规定，没有溶出度检查的要求［1］。为了进一步量化检验指标，更好的控制药品内在质量，需要建立适当的方法检测溶出度。本文建立测定复方金刚烷胺氨基比林片溶出度的检验方法，并进行了相关的方法学研究。此方法操作简便，专属性强，取得了较为满意的结果。

1 仪器和试药

D－800LS溶出试验仪（天津大学精密仪器厂生产）;高效液相色谱仪（Waters e2695－2998）;色谱柱（Sunfire C18柱250 mm×4.6 mm，5 μm）。

复方金刚烷胺氨基比林片，市售;氨基比林对照品（批号:100503－200301）购于中国药品生物制品检定所;甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 实验方法与结果

2.1 供试品溶液的制备:取本品，照溶出度测定法（《中国药典》2010年版附录X C第一法）［2］，以水900 mL为溶出介质，转速为100 r·min－1，依法操作30 min时，取溶液适量，滤过，精密量取续滤液5 mL置25 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。

2.2 对照品溶液的制备:精密称取氨基比林对照品16.5 mg，置100 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取5 mL，置25 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。

2.3 按照高效液相色谱法（《中国药典》2010年版附录V D第一法）测定［3］。色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基键合键合硅胶做为填充剂;流动相:甲醇－水（56:44）;柱温:30℃;检测波长:273 nm;流速:1.0 mL/min;取供试品溶液和对照品溶液各20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算每片中氨基比林的溶出量，限度为标示量的80%，应符合规定。

3 溶出度方法学试验

3.1 溶剂与辅料对氨基比林测定的干扰试验:按处方量的比例，用溶剂制成不含主药的空白样品，注入液相色谱仪，记录色谱峰，结果溶剂和辅料在氨基比林保留时间处无色谱峰出现，不干扰主成分测定。结果见图1。

3.2 线性关系考察:精密称取氨基比林对照品14.89 mg置25 mL量瓶中，用水溶解并稀释到刻度，摇匀。配成0.6 mg/mL的标准储备液，精密量取1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL、6.0 mL，分别置于置50 mL量瓶中，用水稀释到刻度，摇匀，配成系列浓度的对照品溶液，按上述色谱条件精密进样20 μL，以峰面积为纵坐标，以浓度（μg/ mL）为横坐标，计算其回归方程为Y=34678X－1374.3，r= 0.9999结果表明氨基比林为11.9～71.47 μg/mL浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系。

3.3 精密度实验:精密吸取对照品溶液（浓度为33 μg/ mL），重复进样5次，每次20 μL，测定氨基比林的峰面积，RSD为0.27%，说明该方法的精密度良好。3.4稳定性实验:取同一批次供试品溶液，按本文色谱条件于0、2、4、6、8、 10、12 h进样20 μL，测定氨基比林的峰面积，RSD为0.65%;表明供试品溶液在12 h内稳定。

3.5 重复性试验:精密称取同一批号的复方金刚烷胺氨基比林片样品6份，照上述方法测定含量，结果测得平均含量为99.6%，RSD为0.45%。

图1复方金刚烷胺氨基比林片液相色谱图

3.6 加样回收试验:精密称取已知含量的样品9份，每份约相当于氨基比林75 mg，滤过。精密称取15.12 mg氨基比林对照品，置100 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取样品溶液2 mL，分别加入对照品溶液6 mL、10 mL、14 mL置容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。分别取20 μL注入液相色谱仪，计算氨基比林低、中、高3种浓度回收率（n= 3）分别为98.97%（RSD=0.34%），99.25%（RSD= 0.56%），98.92%（RSD=0.66%）;平均回收率（n=9）为99.05%;说明此方法得到的测定结果准确可靠。

3.7 转速的选择:取本品以水为溶剂，分别以50、75、100 r· min－1进行试验，溶出结果见表1，结果表明50 r·min－1溶出较慢，100 r·min－1溶出较快，故确定转速为100 r·min－1。

3.8 溶出行为考察:取本品6片，以水900 mL为溶出介质，转速为100 r·min－1，依法操作分别在5、15、30、45、60 min取样测定，计算不同时间的累积溶出百分率，溶出均一性见图2。由溶出曲线可知，本品经30 min时，氨基比林溶出度均达到标示量的90%以上，溶出均一性较好，故将限度订为30 min。

表1 同一溶剂不同转速下的溶出量（%）

图2 溶出曲线的均一性

4 样品的测定

取3批样品，照上述方法测定溶出度，结果见表2。

表2 样品测定结果（%）

5 讨论

5.1 检测波长选择时，在200～400 nm的波长范围内，对盐酸金刚烷胺与氨基比林对照溶液进行扫描，盐酸金刚烷胺无吸收，选择273 nm波长测定氨基比林。

5.2 本法采用转篮法，和浆法分别比较后综合考虑转篮法比较适宜，能够在30 min内基本全部溶出，故选择转篮法。

5.3不同色谱柱的选择分别采用5种不同生产厂家的色谱柱进行考察，均符合试验要求。

5.4 此方法操作简便，专属性强，可有效的控制药品的质量。通过对复方金刚烷胺氨基比林片溶出度测定方法的研究，为进一步完善复方金刚烷胺氨基比林片的质量标准提供了参考。

［1］国家药典委员会.国家药品标准第十二册［S］，2002:201.

［2］国家药典委员会.《中国药典》［S］.2010年版.二部，2010:85.

［3］国家药典委员会.《中国药典》［S］.2010年版.二部，2010:29.

Determination of Aminopyrine in Dissolution Test for Compound Amantadine Hydrochloride Tablets by HPLC

Bai Xuemin，WEN Lili，Lü Wenjun
（Heihe Institute for Drug Control Heilongjiang，Heihe164300，China）

ObjectiveTo establish a HPLC method for determination of Aminopyrine in dissolution test for Compound Amantadine Hydrochloride Tablets.Methods Dissolution medium was water and rotating speed was.After 30 min the dissolution sample were taken and analyzed by HPLC method.Select SunfireC18（250 mm×4.6 mm，5 μm）;the mobile phase was consisted ofmethanol－water（56: 44）;the detecting wavelength was 273 nm;and flow rate was 1.0 mL/min.Results There was a good linearity in the range of 11.9～71.47 μg/mL of Aminopyrine（r=0.9999）.The average recovery of Aminopyrine was 99.05%.Conclusion The method is simple，rapid and the result is accurate and reliable.

Compound amantadine hydrochloride tablets;Aminopyrine;HPLC;Dissolution

R392－33

A学科分类代码31099

1001－8131（2012）04－0253－02

2012－04－01