欧李果脂肪酸G C-MS检测及其营养分析

刘俊英，张虎成，危晴，王芳

（1.北京电子科技职业学院生物工程学院，北京 100029；2.中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，北京 100081）

欧李是我国特有的一种蔷薇科樱桃属灌木树种，耐旱、耐寒、耐盐碱，适应性强。欧李根冠比大，植株矮小，可以有效防止水土流失，在生态治理中发挥重要作用[1]；欧李果风味独特，香气宜人。欧李果实中维生素、矿物质、蛋白质、氨基酸等含量高，营养丰富，矿物质元素Ca含量在果肉中高达428.1 mg/kg，是其它水果Ca含量的2倍～10倍，钙含量是所有经济型水果中最高的，被誉为“钙果”[2-4]。脂肪酸在水果的芳香物质合成中起主要作用，脂肪酸是萜类、醛、醇和酯芳香物质的前体[5]；不饱和脂肪酸是人体必需脂肪酸[6-7]。鲜见欧李果脂肪酸的研究报道，本文采用超声波萃取法对欧李果进行分离提取，通过GC-MS对其化学成分进行鉴定，研究欧李果脂肪酸的组成，为促进欧李的营养价值的开发和欧李的种植和推广奠定基础。

1 实验仪器与方法

1.1 实验仪器与材料

Agnent 5975型气相色谱一质谱仪：美国安捷伦公司；超声波萃取装置：AUTO SCIENCE INSTUMENT CO.,LTD.；AR2140分析天平：美国奥索斯；RE-210D旋转蒸发仪：上海科兴仪器有限公司；HH-2恒温水溶锅：常州国华电器有限公司；TG18K-Ⅱ台式高进离心机：济南福的机械有限公司。分析纯：石油醚、硫酸、甲醇、正己烷、无水硫酸钠。成熟“京欧Ⅱ号”欧李果，产至河北尚义县。

1.2 方法

1.2.1 超声波萃取

称取5.0000 g经-70℃冷冻干燥、粉碎至粒径0.3 mm～0.5 mm的欧李果粉，投入超声波提取器中，加入50 mL石油醚，超声波提取40 min，离心分离，得橙黄色透明提取液，再旋转蒸发除去石油醚，重复3次，取平均值。

1.2.2 甲酯化[8]

在欧李果提取物中加入2.5 mol/L硫酸-甲醇溶液1.0 mL，于70℃水浴中加热30 min，加入2 mL正己烷提取甲酯化产物，取出上清液，再用1 mL正己烷二次提取，与上清液合并，加少量无水硫酸钠，离心，取1.5mL上清液于样品瓶中。

1.2.3 GC-MS条件

色谱条件：色谱柱为DB-FFAP柱（60 m×0.25 mm×0.25μm）；升温程序：起始温度 100 ℃保持 2 min，以5℃/min速率升到230℃，保持20 min；进样口温度为260℃；载气为氦气（纯度≥99.999%），流速 1.0mL/min，溶剂延迟 5.00 min；分流比为 5∶1，进样量 0.2μL。

质谱条件：电子方式为轰击离子源（EI），电离能量为70 eV；灯丝发射电流为200μA，离子源温度为210℃，GC-MS接口温度为240℃。

1.2.4 数据处理

定性：实验谱图数据处理由Xcalibur软件系统完成，未知化合物经数据处理和NIST谱库检索，结合人工谱图索引，同时与NIST和Wiley谱库相匹配，得出相应的化学成分。

定量：通过峰面积归一化法计算各化学成分的相对百分含量。

2 结果与讨论

2.1 欧李果超声波萃取物化学成分组成

将1.2.2制备样品经气相色谱-质谱联仪（GC-MS）分析，欧李果萃取物总离子流图见图1，将欧李果质谱检测的物质去除甲酯，其化学成分及求得的各化学组成及其相对百分含量见表1。

图1 欧李果超声波提取物总离子流图Fig.1 The gas chromatogram of the lipids of ultrasonic extraction from Chinese Dwarf Cherry fruit

表1 欧李果超声波提取物的化学组成及相对含量Table 1 Chemical composition and relative content in the lipids of Chinese Dwarf Cherry fruit

续表1 欧李果超声波提取物的化学组成及相对含量Continue table 1 Chemical composition and relative content in the lipids of Chinese Dwarf Cherry fruit

欧李果超声波提取物得率为1.06%。由表1中鉴定出欧李果提取物的化学成分及其相对百分含量可知，欧李果石油醚提取物中共检测并能确定化合物名称的物质有37种（去除烷烃），占检出总量的93.14%，检测到31种脂肪酸、5种醇和酚、1种酯。脂肪酸占检出总量的88.50%。饱和脂肪酸20种，占检出总量37.90%，主要为棕榈酸（9.46%）、木焦油酸（8.02%），硬脂酸（5.97%）；不饱和脂肪酸11种，占检出总量51.74%，其中1种二元不饱和脂肪酸富马酸（0.02%）；8种单不饱和脂肪酸，主要为油酸（20.32%），羟基不饱和脂肪酸蓖麻油酸（4.64%），首次在欧李果中检测到顺15-二十四烯酸即神经酸1.83%；2种多不饱和脂肪酸为亚油酸（15.65%）和亚麻酸（5.22%）；1种反式脂肪酸，反-13-十八碳烯酸（0.37%）。

2.2 欧李果脂肪酸营养价值分析

欧李果不饱和脂肪酸含量高，占检出总量51.74%，膳食中不饱和脂肪酸能降低胆固醇，调节血脂，对脂肪的生化合成和氧化、癌诱变和胆固醇具有独特的调控作用[9]，不饱和脂肪酸可以提高细胞活性，增强智力、记忆力和思维能力[6-7]，不饱和脂肪酸对人类成长和健康发挥着重要作用。

2.2.1 欧李果主要不饱和脂肪酸营养分析

欧李果中油酸（20.32%）、亚油酸（15.65%）、亚麻酸（5.22%）3种主要不饱和脂肪酸含量高，占检出总量的41.19%。亚油酸在人体衍生为花生四烯酸后合成前列腺素，具有抗炎、扩张血管防止血栓形成、防止动脉硬化和软化血管的作用，能抑制淋巴肉瘤，具有抗癌作用[10-11]。亚麻酸是一种含三个双键的不饱和脂肪酸，正常人从食物中摄入亚麻酸后，经Δ-6脱氢酶碳链延长酶作用，在体内可转化为EPA和DHA,EPA是体内三烯前列腺素前体，DHA使大脑、视网膜等神经系统磷脂的主要成分[12]。亚麻酸具有改善血管疾病，降压、降血脂、降胆固醇的作用；亚麻酸能提高神经功能，预防过敏性疾病的作用[13-14]；欧李果中油酸百分含量高达20.32%，研究发现，顺式单不饱和脂肪酸在降低胆固醇方面能力与多不饱和脂肪酸相同[15]。

不饱和脂肪酸可以改善果实的风味成分。成熟果实中亚麻酸和亚油酸含量高，果实呼吸高峰过后香气大量产生，亚麻酸和亚油酸含量也随之下降，果实中的脂肪酸经氧化产生的酮酸和酰基-CoA可被进一步还原成醛、醇和合成酯类[16]，增加果实香气成分，欧李果不饱和脂肪酸含量高，果实香气浓郁。

2.2.2 欧李果神经酸营养分析

首次在欧李果中检测到顺15-二十四烯酸即神经酸，占检出总量的1.83%。神经酸是大脑神经纤维和神经细胞的核心天然成分，是神经细胞特别是大脑细胞、视神经细胞、周围神经细胞生长、再发育和维持的必需“高级营养素”，对提高脑神经的活跃程度，防止脑神经衰老有很大作用，神经酸对帕金森、老年痴呆有显著治疗作用[17]。科学研究证明，神经酸抑制HIV-l逆转录酶的活性，对艾滋病逆转录酶有很强的抑制作用，可以增强人体免疫功能和防治艾滋病[18]。神经酸主要来源于鲨鱼脑及鲨鱼油，目前仅在蒜头果、盾叶木和槭属植物中发现神经酸，蒜头果是含神经酸植物之冠，但适生区范围较小[17]。本研究在欧李果中检测到神经酸，为欧李果营养价值开发、品种的选育和种植奠定基础。

2.2.3 欧李果其他脂肪酸的作用分析

欧李果中蓖麻油酸占检出总量的4.64%。蓖麻油酸可以作为增塑剂，欧李果中蓖麻油酸含量高，可以使水果表皮致密、弹性较好，使欧李果更加耐贮藏。

欧李果中检测到反式-13-十八碳烯酸，占检出总量0.37%。含反式脂肪酸约8%的饮食与亚油酸相比显著地降低了成人高密度脂蛋白含量胆固醇，从而显著增加心血管疾病风险[19]。反式脂肪酸引起了全球科学界的高度重视。虽然欧李果中反式脂肪酸含量低，在品种的选育和种植应尽量考虑反式脂肪酸对人类健康的影响。

3 结论

欧李果石油醚超声波提取物得率为1.06%。欧李果中检测到37种化合物，其中31种脂肪酸、5种醇和酚、1种酯。饱和脂肪酸20种，占检出总量37.90%，主要为棕榈酸（9.46%）、木焦油酸（8.02%），硬脂酸（5.97%）；不饱和脂肪酸11种，占检出总量51.74%，主要不饱和脂肪酸为油酸（20.32%）、亚油酸（15.65%）和亚麻酸（5.22%）、蓖麻油酸（4.64%）和神经酸（1.83%）；1种反式脂肪酸，反-13-十八碳烯酸（0.37%）

欧李果不饱和脂肪酸含量高，油酸、亚油酸和亚麻酸3种主要不饱和脂肪酸占检出总量41.19%，欧李果具有降压、降胆固醇、抗炎症和抗癌作用；成熟果实中醛、醇和酯含量高，欧李果果实香气浓郁。

首次在欧李果中检测神经酸（1.83%），欧李果中含有神经酸，具有防止脑神经衰老，预防帕金森、老年痴呆的作用，可以增强人体免疫功能和防治艾滋病。欧李果中蓖麻油酸含量高，果表皮致密、弹性较好，耐贮藏。在欧李果中检测到反式-13-十八碳烯酸，虽然含量低，在品种的选育和种植应考虑反式脂肪酸对人类健康的影响。

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