粗毛褐孔菌化学成分研究

杨修镇

(山东省兽药质量检验所，济南 250022)

粗毛褐孔菌(Xanthochrous hispidus(Bull.exfr.)Pat.)是多孔菌科褐孔菌属药用真菌，具有增强机体免疫力的作用。为了综合开发利用该药材，本实验对粗毛褐孔菌的乙醇提取物进行了化学成分的系统分离。经硅胶柱层析、大孔树脂柱层析，Sephadex LH-20纯化，得到5个化合物，经理化性质测定、光谱分析分别鉴定为羊毛甾二烯二醇(Ⅰ)、麦角甾醇(Ⅱ)、齿孔酸(Ⅲ)、D-阿拉伯糖醇(Ⅳ)、十八烷酸(Ⅴ)。各化合物均系首次从该药材中获得，它们的结构见表1。

1 仪器与材料

1.1 仪器 Nicolet 750傅立叶红外光谱仪;UV3010紫外分光光度计;AVANCE 400型核磁共振波谱仪。

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1.2 材料 薄层层析用硅胶为青岛海洋化工有限公司产品，柱层析用硅胶(100～200目)为青岛化学试剂厂产品，大孔树脂为D101型，为天津海光化工有限公司产品。粗毛褐孔菌由山东省沂南县真菌研究所提供，经鉴定为多孔菌科褐孔菌属粗毛褐孔菌Xanthochrous hispidus(Bull.exfr.)Pat.。

2 提取与分离

取粉碎后的粗毛褐孔菌药材，加入5倍量95%乙醇回流提取三次，每次3 h，滤过，合并滤液，浓缩为浸膏。浸膏中拌入适量硅胶(100～200目)，干燥，粉碎，分别用石油醚、乙酸乙酯、甲醇索氏提取，得到不同的提取部位。石油醚提取部位经硅胶柱层析分离，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，得到1个白色片状结晶Ⅴ。乙酸乙酯提取部位经硅胶柱层析分离，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱得到1个白色针晶Ⅱ和2个白色粉末Ⅰ与Ⅲ。甲醇提取部位经大孔树脂层析分离，Sephadex LH-20纯化得到白色针晶Ⅳ。

3 结构鉴定

化合物Ⅰ:白色粉末，mp 182～183℃，L-B反应呈阳性，表示此化合物可能为三萜或甾体类成分。1HNMR(CDCl3)谱在高场区可见 δ 0.72、0.81、0.87、0.98和1.00 ppm处五个角甲基尖峰，这是四环三萜类的典型特征。0.95ppm处为20-CH31.65和1.74 ppm处分别为26-CH3和27-CH3两个烯丙位的甲基。另外，可见3.24 ppm处C3-H，3.65 ppm 处 C22-H，5.17 ppm 处 C-24H。13CNMR(CDCl3)谱δ 79.00和73.42 ppm为C-3和 C-22信号。121.39、134.24、134.63和135.08 ppm存在四个烯碳信号。其13CNMR(CDCl3)谱与文献报道的羊毛甾二烯二醇比较基本一致[1](表2)。综上所述，可证实化合物Ⅰ为羊毛甾二烯二醇。

化合物Ⅱ:白色针晶，mp 165～169℃，L-B反应呈阳性，表示此化合物可能为三萜或甾体类成分。紫外光谱有特征的三吸收峰分别为271、282和294 nm，属于三烯特征紫外吸收或环上共轭双键，并且在263 nm左右还有一个肩峰，与文献中报道的麦角甾醇紫外特征吸收一致[2]。1HNMR(CDCl3)谱在最高场0.5～1 ppm处有六个甲基峰，1～2.45 ppm处为甾体上CH2、CH质子的堆积峰，分子中三个双键共四个烯烃质子的δ信号处于较低场，5.37和5.56 ppm分别为环内双键C6-H和C7-H，它们之间相互耦合分别呈单峰，5.17 ppm处为C22-H和C23-H，它们之间相互耦合后又分别与邻位氢耦合，均呈四重峰。3.62 ppm处的多重峰为连有OH的C3-H的特征。13CNMR(CDCl3)谱 δ 139.796、119.609、116.309、141.372、135.585、131.997 ppm存在6个烯碳信号，其13CNMR(CDCl3)谱化学位移与文献麦角甾醇比较基本一致[3](表3)。综上所述，可证实化合物Ⅱ为麦角甾醇。

表3 化合物Ⅱ与麦角甾醇13CNMR数据比较(CDCl3，δppm)

续表

化合物Ⅲ:白色粉末，mp 290～294℃，L-B反应呈阳性，表示此化合物可能为三萜或甾体类成分。1HNMR(CDCl3)谱可见 δ 0.76、0.81、0.89、0.97、1.00、1.06、1.25、3.22、4.68、4.76 ppm 处有吸收，其中0.76～1.25 ppm为7个甲基吸收，4.68和4.76处分别为C31上α、β不饱和H的吸收，与文献报道的齿孔酸基本一致[5]，13CNMR(CDCl3)谱 δ 134.48、134.07 ppm为环上C-8和C-9的不饱和吸收信号，δ 155.21、106.82 ppm 为 C-24 和C-31的不饱和吸收，δ 180.26处为 -COOH上的 C吸收，其13CNMR(CDCl3)谱与文献报道的齿孔酸基本一致[4](表4)。综上所述，可证实化合物Ⅲ为齿孔酸。

表4 化合物Ⅲ与齿孔酸13CNMR谱数据比较(CDCl3，δppm)

续表

化合物Ⅳ:白色针晶，mp 100～104℃，1HNMR(MD3OD)谱表明化学位移为3.5～3.9 ppm，为与-OH相连的CH吸收，13CNMR(MD3OD)谱有五个信号峰分别为 71.70、71.07、70.60、63.61、63.64，与文献报道的D-阿拉伯糖醇数据基本一致[5](由于与文献选取的溶剂不同，故数据存在整体的漂移)，见表5所示。综上所述，可证实化合物Ⅳ为D-阿拉伯糖醇。

表5 化合物Ⅳ13CNMR(MeOD，δppm)与D-阿拉伯糖醇13CNMR数据(D2O，δppm)比较

化合物Ⅴ:白色片状结晶，mp 66～67℃，易溶解于石油醚、氯仿，难溶于乙醇、水。紫外光谱无吸收，示无共轭结构。IR νKmBaxrcm-1:3414(O-H伸缩振动)，2918，2848(C-H 伸缩振动)，1701(C=O伸缩振动)，719显示有(CH2)n，且 n≥4。质谱m/z:284(M+)，256，241，185，129，73 显示该化合物为长链脂肪酸，推定化合物Ⅴ为十八烷酸。

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