重庆某猪场猪圆环病毒与附红细胞体混合感染的诊治

丁孟建，黄坤英，杨晓伟

（1.西南大学荣昌校区动物医学系，重庆 荣昌402460；2.重庆市荣昌县河包镇人民政府，重庆 荣昌402460）

2011年4月中旬，重庆大足县某千头猪场猪群发病，开始表现2头猪胸、背及腰部皮肤炎症，疑似螨虫感染或蚊虫叮咬，口服伊维菌素无效，15日内病情蔓延至全群，大剂量使用磺胺药物后病情更加严重，相继死亡母猪5头，育肥猪14头，另有30多头病危。据养殖户介绍：该场免疫疫苗有猪瘟细胞苗、O型口蹄疫疫苗、伪狂犬基因缺失苗和蓝耳灭活苗，未免疫PCV2苗。笔者亲身经历，对该病诊断情况报告如下，以期对临床猪病防治有帮助。

1 材料与方法

1.1 材料 出诊到养殖场前腔静脉采取1头病危母猪和2头发病育肥猪血液，各加入2mL血液至抗凝管和4mL血液至凝血管中，4℃保存备检。

检测试剂：瑞氏染色液为西南大学荣昌校区动物医学系微生物教研室配制；DNA提取试剂盒、Taq酶、PCR缓冲液（含 Mg2＋）、dNTP、引物P1和P2为上海生工生物工程技术服务有限公司产品。

试验仪器：Mastercycler PCR仪，购自Eppen－dorf公司；凝胶分析成像系统（Touching 2002），购自上海天呈科技有限公司。

引物合成：参考文献1于上海英骏生物技术有限公司合成以PCV－2的ORF1为目的基因的上游引物：P1：5′－CGAGAAAGCGAAAGGAACAGA－3′；下游引物：P2：5′－GGTAACCATCCCACCACTT－3′，预计PCR扩增产物长度为371bp。

1.2 方法 按常规方法进行临床检查和尸体剖检，记录眼观病变。

显微镜检查：将采集的3头猪的抗凝血分别进行瑞氏染色，显微镜下观察细胞形态。

DNA提取：将采集的病猪的全血5 000r／min离心8min，分离血清。按DNA提取试剂盒使用说明书提取血清DNA，－20℃保存待测。

PCR检测：PCR反应体系为25μL，DNA模板添加量为0.3μL。PCR反应程序为：94℃预变性3 min，94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，35个循环，最后72℃延伸10min。PCR产物经12g／L琼脂糖凝胶电泳于凝胶分析成像系统中观察结果。

2 结果

2.1 临床症状 发病育肥猪突然减食或废食，消瘦。体温高达40℃～41.5℃，并稽留不退，一般持续3～7d。鼻、耳、四肢、胸腹部及股内外侧等处呈紫红色，腰背处可见绿豆大至黄豆大隆起于皮肤表面的红紫色丘状斑点。母猪皮肤苍白或黄染，尿液似浓茶样，暗红色。眼睑周围红肿，被大量眼分泌物粘连。

2.2 病理变化 全身淋巴显著肿大、苍白，特别是肺门、腹股沟等处淋巴结肿大2～3倍，肠系膜淋巴呈绳索状肿大；全身脂肪黄染，肝肿大呈土黄色、质脆，胆囊肿大，内充满绿色黏稠胆汁；胸膜和心包积液、色浅黄，血液稀薄，不易凝固；肾肿大，表面有出血点，挤压肾盂从输尿管中流出5～10mL乳白色细砂样混有少量黏液的颗粒。

2.3 涂片观察 血液涂片用瑞氏染色，镜检发现3份病料中2份（1份母猪、1份育肥猪）红细胞表面呈锯齿状，附着大量似星芒状的蓝色小体，嗜酸性粒细胞增多（图1）。

2.4 PCR结果 所取3份样品中2份（育肥猪）出现与预期大小（371bp）一致的目的条带，为阳性（图2），另外1份（生产母猪）为阴性。

3 分析讨论

3.1 根据临床症状、剖检、血液涂片和PCR检测结果阳性，可知本次疫情生产母猪是附红细胞体感染，育肥猪是由圆环病毒与附红细胞体混合感染引起的。猪附红细胞体与圆环病毒病在临床中较为常见，在上海、浙江、江苏、广东、广西、云南、宁夏等地均有该病发生，可引起哺乳动物（猪、牛、羊、兔、犬、狐）和家禽（鸭）发病［2－4］。2011年4月～9月，本诊断中心共确诊猪病63例，其中猪附红细胞体病12例，圆环病毒病16例，分别占诊断猪病中的19.0%和25.4%，同比其他季节发病增加，这可能与夏、秋季天气炎热、吸血昆虫滋生及母猪分娩等应激有关。因此，控制该病关键在于夏、秋两季，做好灭蚊、灭蝇、防暑、减少应激及PCV－2病疫苗免疫接种等饲养管理工作。

3.2 临床中猪圆环病毒病引起的皮炎、肾炎综合征应及时与猪体表寄生虫或蚊虫叮咬引起的皮炎相区分，做到提早诊断，隔离病猪。圆环病毒病引起的皮炎主要表现在猪背部、腰部、胸部、前后肢内侧、腹部出现隆起于皮肤表面的红紫色丘状斑点，无痒感，体温升高，食欲降低，全身消瘦；体表寄生虫或蚊虫叮咬引起的皮炎表现为患部瘙痒、檫圈，局部脱毛，无明显的体温升高、食欲降低和消瘦症状，口服伊维菌素或灭／驱蚊多能治愈。

3.3 磺胺类药物对附红细胞体及血液原虫等具有较好治疗效果，也可控制继发感染，按理是治疗该病较理想的药物，但由于该药长期使用易导致肾脏或输尿管尿酸盐沉积，对肾影响较大。当附红细胞体与圆环病毒混合感染时，由于圆环病毒可引起皮炎、肾炎综合征，此时若再用磺胺类药物，笔者认为不是很科学，易导致病情加重。本病例，我们使用土霉素、维生素K1、维生素K3、黄芪多糖拌料全群口服；发病严重的猪肌肉注射附血康（20%土霉素）、维生素K1、维生素K3、维生素B12、ATP和肌苷，一个疗程后病情得到有效控制。

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