不同消毒剂的杀菌效果试验观察

邱 梅，郝智慧，沈 巍，王英俊，刘元元，庞云露

（1.青岛农业大学化学与药学院，山东 青岛266111；2.青岛康地恩药业股份有限公司，山东 青岛266061）

目前，畜禽业应用较多的是化学消毒剂，主要分为卤素类（氯制剂、碘制剂、溴制剂）、醛类、酚类、醇类、氧化剂类、表面活性剂类、酸碱类等。其作用机理就是改变微生物赖以生存的环境，致使微生物的内外结构发生改变，主要代谢机能出现障碍，生长发育受阻，从而丧失活性，失去致病力［1］。其中，过氧化物类消毒剂在畜禽养殖过程中应用较多，效果突出。

过硫酸氢钾复合物是一种新型过氧化物类消毒剂，具有很强的氧化能力，其水溶液接近中性，比较适合各种水体消毒，溶解后产生各种高活性小分子自由基、活性氧等衍生物［2］，在水体中很少会形成有毒副产物［3］。因其具有非常强大而有效的非氯氧化能力，使用和处理过程符合安全和环保要求，因而被广泛的应用于工业生产和消费领域。通常状态下比较稳定，当温度高于65℃时易发生分解反应，比较活泼，易于参与多种化学反应，可作为氧化剂、漂白剂、催化剂、消毒剂、蚀刻剂等。

新型消毒剂－卫克，其主要成分为过硫酸氢钾复合物、氯化钠等。为了解其杀菌性能，以杜邦卫可消毒剂为对照，进行了实验室杀菌效果观察。

1 材料与方法

1.1 药物 试验药物：卫克（含量25%，批号：20110312，由青岛康地恩药业股份有限公司提供）；对照药物：卫可（含量25%，批号：VKNS100704，美国杜邦）。

1.2 菌株 大肠杆菌，为本实验室临床分离菌株。

1.3 消毒剂溶液的配制 卫克消毒剂：按推荐使用方法，用硬水配制成浓度为1∶200、1∶400、1∶600、1∶800的试验用溶液；卫可消毒剂：按推荐使用量，用硬水配制成1∶400、1∶600、1∶800的试验用溶液。

1.4 方法

1.4.1 悬液定量杀菌试验［3］取消毒试验用无菌小瓶，先加入0.5mL试验用菌悬液，再加入0.5 mL有机干扰物质（20%牛血清白蛋白），混匀，置20℃±1℃水浴中2、5、10、30min后，用无菌吸管吸取上述浓度消毒液（1.3项下配制的不同浓度消毒液）4.0mL注入其中，迅速混匀并立即记时。待试验菌与消毒剂相互作用至各预定时间，分别吸取0.5mL试验菌与消毒剂混合液加于4.5mL经灭菌的中和剂中，混匀。各管试验菌与消毒剂混合液经加中和剂作用10min后，分别吸取0.2mL样液，按活菌培养计数方法测定存活菌数，每管样液接种2个平皿即可。如平板上生长的菌落数较多时，可进行系列10倍稀释后，再进行活菌培养计数。同时用稀释液代替消毒液，进行平行试验，作为阳性对照。

所有试验样本均在37℃温箱中培养，对细菌繁殖体培养24h观察最终结果。

1.4.2 有机物干扰杀菌试验 采用悬液定量杀菌法，在20℃±1℃水浴中，不同浓度消毒剂溶液（卫克：1∶200、1∶400、1∶600、1∶800，卫可：1∶400）分别对含0%、25%、50%灭菌牛奶的菌液作用10、30min，观察、计算其杀菌效果。

1.4.3 温度对杀菌效果影响试验 采用悬液定量杀菌法，不同浓度消毒剂溶液（卫克：1∶200、1∶400、1∶600、1∶800，卫可：1∶400）在不同温度（13℃±0.3℃、22℃±2℃、30℃±2℃）水浴中对菌液作用10、30min，观察、计算其杀菌效果。

2 结果与分析

2.1 悬液定量杀菌结果 见表1。

表1 杀菌试验结果

3次综合试验结果由表1可知，卫克1∶200稀释液分别作用2、5、10、30min均可将菌全部杀灭，达100.0%杀菌率；1∶400稀释液作用10、30min可全部杀灭菌液；1∶600和1∶800稀释液杀菌效果较差。卫可1∶400作用10、30min可达100.0%杀菌率。通过1∶600和1∶800稀释液的杀菌效果可以看出，卫克和卫可杀菌效果基本一致。

2.2 有机物干扰杀菌结果 见表2。

综合3次试验结果由表2可知，卫克1∶200稀释液作用10、30min对不同浓度有机物干扰菌悬液均能全部杀灭，1∶400稀释液作用30min也能达到100.0%的杀菌率。各消毒剂稀释液对含25%干扰物的菌悬液消毒效果比含0%和50%的差。

2.3 温度对杀菌效果的影响试验结果 见表3。

表3结果显示，卫克消毒剂1∶200稀释度作用10、30min在高中低温度下均能达到100.0%的杀菌率；1∶400作用30min均能全部杀灭；1∶600稀释液在30℃±2℃下作用30min可达100.0%的杀菌率。卫可1∶400稀释液在22℃±2℃和30℃±2℃下作用10、30min杀菌率均为100.0%。两种消毒剂不同作用浓度在22℃±2℃和30℃±2℃下的杀菌效果均好于13℃±0.3℃。

表2 有机物干扰杀菌试验结果

表3 不同温度对消毒剂杀菌效果影响

3 讨论与结语

近年来随着工业研制方法的改进，过硫酸氢钾复合盐的应用逐渐受到人们的关注。过硫酸氢钾复合盐分解后的产物硫酸盐可通过人及动物的肝脏及泌尿系统排出体外，对环境无任何有害残留。与过氧化氢、过氧乙酸等消毒剂相比，过硫酸氢钾复合盐晶体稳定，易于保存和运输，在任何使用场合均可现场配制，且对水质无严格要求［4］。

其作用机制：与靶物接触后释放高活性过氧化自由基，进而破坏微生物膜的通透性，使蛋白质变性，酶失活，DNA和RNA结构断裂，同时生成的硫酸盐具有协助渗透作用，可作为皮肤消毒及治疗的辅助药剂。过硫酸氢钾复合盐不仅可以通过其氧化作用杀灭微生物，而且可以清除水中的有机物。

阳艳林等（2008）［5］研究显示，以含过硫酸氢钾1 250mg／L的该复合消毒剂溶液，对溶血性链球菌和多杀性巴杆菌作用2.5min，杀灭对数值＞5.00。用含过硫酸氢钾1 250mg／L该消毒液，对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌作用5min，杀灭对数值＞5.00。用含过硫酸氢钾835mg／L该消毒液作用15min，对大肠杆菌可达到完全杀灭。用含过硫酸氢钾1 000 mg／L该消毒剂溶液作擦拭消毒并作用10min，对模拟现场物体表面上人工污染的大肠杆菌杀灭对数值＞3.0。将过硫酸氢钾复合消毒剂密封储存于37℃60d，其有效成分含量下降率为6.09%。

张跃华等（2005）［2］研究结果，其浓度为10～60 mg／L过硫酸氢钾复合盐对不同种类微生物悬液的作用5min，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的杀灭率均为100%，对白色念珠菌的杀灭率大于99.5%，此作用条件下未观察到其对枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭作用；160mg／L过硫酸氢钾复合盐作用30 min，未见对乙肝病毒表面抗原的灭活作用。在一定作用条件下过硫酸氢钾复合盐对细菌繁殖体有良好的杀灭作用，对真菌也有一定的杀灭作用，但未见其对细菌芽孢及乙肝病毒表面抗原的灭活作用。

严晓玲（2007）［6］研究显示，5%过硫酸氢钾复合盐水溶液25℃时有良好的杀菌作用，杀灭细菌的繁殖体需2min，作用15min可将细菌芽孢全部杀灭。作用30min可将HBsAg完全灭活。

研究结果表明，卫克消毒剂1∶200（相当于1 250mg／L）稀释液在室温下作用2min即可将细菌全部杀灭，杀菌效果不受有机物和温度影响；1∶400（相当于625mg／L）稀释液在室温下作用10min杀菌率可达100.0%，30min杀菌效果不受有机物和温度影响；1∶600（相当于约416.7mg／L）稀释液在室温下作用30min杀菌率达99.8%，30℃±2℃下作用30min可达100.0%的杀菌率。同浓度（1 250 mg／L）下杀菌时间比阳艳林等（2008）的研究短。本产品具有很好的杀菌效果，高浓度消毒时不受有机物和环境温度的影响，低浓度使用时可通过提高其作用时间和环境温度来提高其消毒效果。

［1］马贤坤，车娟娟.消毒灭源 健康养殖［J］.山东畜牧兽医，2007（5）：70－72.

［2］张跃华，赵永勋.过硫酸氢钾复合盐消毒作用实验研究［J］.中国卫生检验杂志，2005，9（1）：40.

［3］Virender S K .Potassiumfemate（VI）：an environmentally friendly oxidant［J］.Advances in Environmental Reserch，2002，2：143.

［4］中华人民共和国卫生部，消毒技术规范（2002版）［M］.2002.

［5］阳艳林，于洪忠，徐辉.过硫酸氢钾复合消毒剂杀菌效果观察［J］.中国消毒学杂志，2008，25（2）：150－152.

［6］严晓玲.消毒剂过硫酸氢钾复合盐性能的实验研究［J］.中国卫生检验杂志，2007，11（4）：631，679.