联合检测三项血清肿瘤标志物在早期肺癌诊断中的应用

段瑞华 王西涛

1 资料与方法

1.1 一般资料 肺癌组选择我院2009年7月至2012年1月的住院患者71例，男51例，女20例，年龄26～79岁，平均56岁。均经支气管镜或cT引导下肺活检确诊，其中:鳞癌30例，腺癌21例，小细胞癌20例。根据1997年国际抗癌联盟公布的TNM临床分期标准进行分期，Ⅰ期27例，Ⅱ期14例，Ⅲ期15例，Ⅳ期15例。良性肺病组36例，为肺炎、肺气肿、肺脓肿、支气管扩张等疾病患者，正常对照组32例，来源于已排除肿瘤的健康体检者。

1.2 研究方法 3项肿瘤标记物的测定取空腹静脉血4 ml，置于含促凝剂的真空采集管中，分离血清，放射免疫定量法检测(VEGF)，丙酮酸激酶2(PKM2)，肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAF)水平。VEGF阳性判定标准为＞15 μg/L。PKM2阳性判定标准为＞13 μg/L。TRAF阳性判定标准为＞17 μg/L。试剂VEGF免疫分析试剂盒购于北京佳诚生物技术有限公司，试剂PKM2免疫分析试剂盒购于福建迈新生物技术有限公司，试剂TRAF免疫分析试剂盒购于福建迈新生物技术有限公司。

1.3 统计学方法 本组资料数据用SPSS 13.0计算机软件进行t检验统计分析，计数资料以百分率表示。

2 结果

2.1 肺癌组和良性肺病组外周血3项肿瘤标记物阳性率的比较 肺癌组血清(VEGF)，丙酮酸激酶2(PKM2)，肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAF)阳性率水平显著高于良性肺病组(P＜0.05、P＜0.05、P＜0.05)。良性肺病组高于健康对照组(见表1)。

2.2 肺癌不同临床分期3项肿瘤标记物阳性率的比较 肺癌组不同临床分期(VEGF)，丙酮酸激酶2(PKM2)，肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAF)阳性率及水平不同，随临床分期递增其阳性率及水平呈上升趋势，具有正相关性。

2.3 不同病理分型肺癌3项肿瘤标记物阳性率的比较VEGF在肺腺癌中明显升高(P＜0.05)，PKM2在肺鳞癌中明显升高(P＜0.05)，TRAF以小细胞肺癌升高明显(P＜0.05)。与鳞癌、小细胞癌比较差异有统计学意义(P＜0.05);PKM2在肺鳞癌中明显升高(P＜0.05)，与腺癌、小细胞癌比较差异有统计学意义(P＜0.05);TRAF以小细胞肺癌升高明显(P＜0.05)，与腺癌、鳞癌比较差异有统计学意义(P＜0.05)。

表1 各组血清VEGF、PKM2、TRAF阳性率比较(例，%)

3 讨论

肺癌大多数起源于支气管黏膜上皮，近年来发病率及死亡率逐年上升。其病因尚不完全明确，与多种因素有关［1］。因为其发现时多属晚期，手术效果较差，所以提高肺癌的诊断水平已成为当前研究的热点。目前肺癌的诊断手段仍借助于影像学、病理学检查。而血清肿瘤标志物检测在早期肺癌诊断中有其独特优势。特别是在肿瘤形成期间，肿瘤细胞合成的一些特殊的蛋白及酶类，分泌入血，对肿瘤具有辅助诊断作用。

VEGF即血管内皮生长因子，作为一种同源二聚体糖蛋白，可以与机体内的相应受体相结合，促进血管内皮细胞增殖并增加血管通透性，对于肺癌细胞而言，它可以特异性地促使肺癌血管内皮细胞进行有丝分裂和延长肺癌血管内皮细胞的存活时间，从而抑制肿瘤血管的生成［2］。本组资料显示肺癌组CEA敏感性48.36%、62.36%，腺癌敏感性最高，提示CEA对肺腺癌的诊断价值较高，有助于确定肺癌病理分型。另外，有文献报导VEGF在与肺癌淋巴转移密切相关。

PKM2主要与激酶信号传导通路有关。他通过调节磷酸化底物分子蛋白与相应配体结合，使细胞外的下游信号分子向细胞内的转导反应增加，从而使肺癌细胞逃避免疫监视，并得到更多的生长刺激信号，造成肺癌细胞的积极生长［3］。发现通过阻断PKM2的激酶信号传导通路可以有效地阻止肺癌细胞的血行转移和淋巴转移［4］。本组资料显示肺癌组PKM2敏感性53.54%，鳞癌敏感性最高，提示PKM2对肺鳞癌的诊断价值较高。

TRAF是一种胞质衔接蛋白，可以选择性地结合磷酸化多肽，并通过葡萄糖合成碳或者催化反应生成异源二聚体形式调节肺癌细胞的增殖，凋亡。Bray等应用western blot的方法研究发现TRAF在肺癌细胞系的表达明显高于正常细胞系［5］。本组资料显示肺癌组TRAF敏感性62.36%，小细胞肺癌敏感性最高，提示TRAF对小细胞肺癌的诊断价值较高。

此项研究结果显示三项肿瘤标志物阳性率水平显著高于良性肺病组(P＜0.05)。及健康对照组。并随肺癌临床分期递增其阳性率及水平呈上升趋势，在不同病理分型中阳性率及水平也有不同，而联合检测可提高肺癌检出率并对肺癌临床病理分型有指导意义。3项肿瘤标志物在肺癌早期阳性率较高，所以更适合作为早期诊断指标。从而为肺癌的早发现，早治疗创造更好的条件。

［1］Adams J，Carder PJ，Banks RE，et al.Vascular endothelial growth factor gene polym-orphisms and risk of primary lung cancer.Cancer Epidermal Biomarkers Prev，2010，14(3):571-575.

［2］Emma S Rennel.Recombinant human VEGF165b protein is an effective anti-cancer agent in mice Eur J Cancer，2009，44(13):1883-1894.

［3］Lee SJ，Lee SY，Jeon HS，et al.PKM2 factor gene polym-orphisms and risk of primary lung cancer.Cancer Epidermal Biomarkers Prev，2009，14(3):571-575.

［4］Hiun Suk Chae，Jin Sookim.Adolescent and adult soy intake and risk of PKM2 in Asian Americans.Carcinogenesis，2002，23:1491-1496.

［5］Bray F Parkin.TRAF in lung cancer:comparison of plasma，serum，and tissue TRAF and microvessel density and effects of tamoxifen.Cancer Res，2010:60(11):298-299.