羟丙基-β-环糊精对吲达帕胺溶解度的影响

秦贞苗 陈燕忠 陈卉 孙美丽 梁兆丰 冯思欣 林世源 黄琼 赵雪晴 陈超君

吲达帕胺(Indapamide)为非噻嗪类吲哚衍生物，具有降压利尿双重的作用。受其溶解度影响，体内吸收较差，目前临床常用剂型为其缓释片［1］。本实验拟采用羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)对吲达帕胺进行包合，并对其包合物进行验证。

1 仪器与试药

1.1 仪器 UV1101紫外可见分光光度计(上海天美科学仪器有限公司);SWB-2000恒温水浴振荡器(天津奥特赛恩斯仪器有限公司);DZF-6050真空干燥箱(上海博讯实业有限公司);DSC4000差示扫描量热仪(美国Perkin-Elmer公司);FTS-40傅立叶红外光谱仪(美国BIO-RAD);KQ-300DA型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);PB-10pH计(德国Sartorius公司);CP225D分析天平(德国Sartorius公司)。

1.2 试药 吲达帕胺对照品(中国药品生物制品检定所，批号100257-200002);吲达帕胺原料药(济南高华制药厂，批号20050701);HP-β-CD(山东淄博千汇精细化工有限公司);其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 HP-β-CD的增溶作用

2.1.1 紫外检测波长的确定精密称取吲达帕胺对照品、HP-β-CD适量，用pH7.0磷酸盐缓冲液配制澄清溶液，在200～400 nm波长范围内扫描。结果表明，吲达帕胺在242 nm处有最大吸收，而HP-β-CD在此波长处无吸收，因此确定242 nm为紫外检测波长。

2.1.2 标准曲线的绘制精密称取吲达帕胺对照品10 mg，置100 ml量瓶中，用乙醇溶解，稀释至刻度，作为贮备液。精密移取贮备液 0.2、0.5、0.8、1.0、1.5 ml置 10 ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液(pH7.0)稀释至刻度，摇匀，在242 nm处测定吸光度，以吸光度(A)对浓度(C)进行线性回归，结果表明:吲达帕胺在2.0～15.0 μg/ml范围内浓度与吸光度呈较好的线性关系，其回归方程为A=0.0586C+0.021，R2=0.9999。

2.1.3 回收率试验精密称定HP-β-CD9份，以药物与环糊精1∶1的比例，精密加入80%，100%，120%的吲达帕胺对照品溶液，配成低、中、高3种浓度的溶液，按上述方法测定，结果平均回收率分别为100.71%，103.28%和105.63%。

2.1.4 不同pH值下吲达帕胺的增溶试验配制pH5.0、pH7.0、pH9.0的磷酸盐缓冲液，在同一pH磷酸盐缓冲液中，加入不同量的 HP-β-CD 制成浓度为 0、20、40、80和 100 mmol/L的HP-β-CD溶液，将过量的吲达帕胺加入上述各溶液中，超声溶解15 min后，置37℃水浴振荡器中震荡72 h(100 r/min)。待达到平衡后，5000 r/min离心15 min，精密移取适量上清液用pH5.0、pH7.0、pH9.0的磷酸盐缓冲液稀释至适宜浓度，在242 nm处测定吸光度，代入线性方程，计算药物浓度。以HP-β-CD浓度为横坐标，药物浓度为纵坐标，绘制相溶解图，并对其进行线性回归，得出不同pH条件下的回归方程。由图1可知，吲达帕胺的浓度随HP-β-CD浓度的增加而增大，表明HP-β-CD对吲达帕胺以1∶1摩尔比例进行包合。根据回归方程，按以下公式计算表观稳定常数Kc［2］∶Kc=斜率/S0(1-斜率)，结果稳定常数根据 pH 从小到大依次为 77.86，71.65，27.52。

图1 不同pH条件下HP-β-CD对吲达帕胺的增溶作用

2.2 吲达帕胺-HP-β-CD包合物的验证

2.2.1 差示扫描量热法验证 以空坩埚为参比，升温速率10℃/min，温度范围30℃ ～300℃，气氛为高纯氮气，对吲达帕胺原料药、HP-β-CD辅料、物理混合物及所制备的包合物进行差示扫描分析。结果表明:170℃左右吲达帕胺出现吸收峰，混合物曲线则基本为原料药与辅料的叠加，而包合物此处未见峰出现。

2.2.2 红外分光光度法验证 以KBr压片法分别制得吲达帕胺、HP-β-CD、包合物和混合物等样品，在4000～400 cm范围内扫描。结果表明:在物理混合物和原料中均有吲达帕胺特征峰出现，而包合物中该波处消失，说明物理混合物中HP-β-CD和吲达帕胺仅为简单的机械混合，并未发生作用。综合上述特征表明，HP-β-CD已包合了吲达帕胺，形成新的物质。

3 讨论

3.1 HP-β-CD 是 β-CD 的一种羟烷基化衍生物［3］，与 β-CD一样其与许多化合物可形成包合物，提高被包合物质的稳定性［4］，在提高药物溶解度方面优于β-CD。

3.2 实验中吲达帕胺的溶解度随缓冲盐的pH和HP-β-CD浓度的增加而增大，但表观稳定常数却随pH的增大而减少，表观稳定常数越小，说明HP-β-CD对药物稳定作用越弱，解离度升高，使HP-β-CD饱和作用减弱。

HP-β-CD对吲达帕胺具有增溶作用，不同浓度的HP-β-CD对吲达帕胺的增溶作用不同，相同浓度的HP-β-CD在不同pH条件下增溶作用也有所不同。本研究为环糊精衍生物提高难溶药物的溶解度提供了依据，但包合比相差悬殊，难以实现工业化生产，函待解决吲达帕胺的包封率问题。

［1］王昕，唐素芳，高立勤，等.吲达帕胺片体外溶出度考查.天津药学，2011，(3):7-10.

［2］刘玉雯，余祥彬，吴宏霞.2-羟丙基-β-环糊精对酮洛芬的包合作用研究.中国现代应用药学，2006，23(5):377-379.

［3］何仲贵，唐星，陈宣福等.β-环糊精及其衍生物2-羟丙基-β-环糊精对布洛芬的增溶作用.沈阳药科大学学报，1998，15(4):235-237.

［4］Backensfeld，T.，Muller，B.W.，Kolter，K.Interaction of NSA with cyclodextrins and hydroxypropyl cyclodextrin derivatives.Int.J.Pharm，2007，74(2-3):85-93.