生津药和通络药对干燥综合征大鼠免疫球蛋白影响的初步研究

王 丹 赵 浩

（1 上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院，上海 200437；2 上海光华中西医结合医院，上海 200052）

干燥综合征（Sjögren’s syndrome，SS）是一种常见的自身免疫性疾病，临床主要表现为口干眼干，造成患者进食困难、欲哭无泪等情况，生活质量大为下降。目前西医对该病早期缺乏行之有效的治疗办法，对中晚期患者常使用激素和免疫抑制剂治疗，而这些药物所带来的副反应，又限制了临床广泛而长期的应用。

中医根据SS临床表现，将其归属于“燥证”、“燥痹”、“燥毒”等范畴[1,2]。确立了养阴生津、活血化瘀、清热解毒等治疗方法。从临床观察看[3]，上述方法均可有效的改善患者的口干眼干等临床症状。本实验采用养阴生津法、活血通络法治疗干燥综合征模型鼠，通过观察大鼠IgA、IgG、IgM的变化，初步探讨养阴生津法、活血通络法对干燥综合征大鼠免疫球蛋白的影响，并比较两种治疗方法的差别。

1 材料与方法

1.1 实验动物

选用SD大鼠，2周龄，（100±10）g，雌性，清洁级，购自上海中医药大学动物实验中心。

1.2 药物与试剂

养阴生津中药（玄参、生地、麦冬等）、活血通络中药（当归、丹参、莪术等）均按人与动物用药量体表面积计算法换算大鼠用药量，由上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院药剂科制剂室制作分装）。吸附无细胞百日咳、白喉、破伤风联合疫苗，由上海生物研究所提供，批号：20090516-6；血清特异性抗体ELISA试剂盒（由上海玖梧实业有限公司提供）；弗氏完全佐剂、PBS缓冲液（由上海医药工业研究院提供）。

1.3 动物模型

参照文献[4]，选用同种大鼠在超净工作台上解剖颈部，取出颌下腺，切碎，放入PBS缓冲液中，匀浆，再放入离心机，离心15min后，取上清液，用分光光度仪测定蛋白抗原含量。将蛋白与弗氏完全佐剂乳化，得到终浓度为0.75mg/ml的蛋白抗原。A、B、C、D组后脚掌皮下注射0.1mL乳化抗原，并于第1、7天在A、B、C、D各组大鼠腹腔注射稀释后的百白破疫苗0.2mL，加强免疫。E组为正常对照，不做处理。

1.4 分组及给药

将大鼠分为5组，每组10只，分别为养阴生津组（A）、活血通络组（B）、强的松组（C）、生理盐水组（D）及正常对照组（E）。A～D组经造模后，每日分别灌服养阴生津中药、活血通络中药、强的松、生理盐水，共给药四周。E组为正常对照组，不做处理。

表1 给药后各组大鼠的免疫球蛋白变化

1.5 统计学方法

使用SPSS17.0软件包进行统计学分析，计量资料数据采用±s表示，各组间比较采用方差分析，以P＜0.05有统计学差异。

1.6 检测指标

酶联免疫吸附法（ELISA）检测IgA、IgG、IgM。

2 结 果

2.1 动物模型鉴定

取颌下腺进行HE染色，提示灶性淋巴细胞浸润。见图1。

图1

2.2 各组免疫球蛋白变化情况

造模后大鼠的IgA、IgG、IgM水平均高于正常对照组，有统计学意义（P＜0.05）。药物干预后，养阴生津法和活血通络法均可降低模型鼠IgM水平（P＜0.05），效果优于强的松组（P＜0.05），但两组中药对比无显著性差异（P＞0.05）；养阴生津法和活血通络法可降低IgA、IgG水平（P＜0.05），但与强的松组比较无差异（P＞0.05）。见表1。

3 讨 论

干燥综合征临床多表现为口干、眼干、鼻腔干等症状，常见舌质红绛、舌面干燥、苔少舌裂，乃“阴虚水涸”之征。中医尚无完全对应的病证，大多数医家根据《内经》提出“诸涩枯涸，皆属于燥”，将其归属“燥证”范畴，并根据肺脾肾与水液代谢关系，创立清燥救肺汤、沙参麦冬汤、增液汤等养阴增液的名方。多数医家认为，干燥综合征以阴虚为本，燥热为标，日久津伤气耗，津血亏乏，脉道失充，则血行滞涩；气为血帅，气虚血滞则瘀血内停。由此，因燥致瘀、因瘀致燥，形成恶性循环，导致本病缠绵难愈。现代研究现实，本病存在微循环障碍以及不同程度的血液浓、粘、凝、聚改变，并且已认识到血瘀证具有血液流变学、微循环、血流动力学、血管活性因子等多方面的异常[5]。

干燥综合征的大多数患者均可出现免疫球蛋白增高，以往的研究表明[6]免疫球蛋白升高的患者其紫癜、肾小管酸中毒的发生率增高，高免疫球蛋白是触发白细胞破碎性血管炎的重要因素之一。因此，对于干燥综合征患者，降低异常的免疫球蛋白，可以减少内脏累及，控制病情进展。本研究采用佐剂诱导型SS大鼠模型[4]，造模后大鼠颌下腺HE染色显示有淋巴细胞浸润，免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平均显著高于正常对照组，提示造模在唾液腺及血清免疫学方面均产生了类似人类的SS改变。养阴生津方是根据中医“燥者濡之、润之”的原则制定的方药，以增液汤为基础进行加味；而活血通络方是根据中医久病必瘀、久病入络的病因病机而制定的。研究结果显示，养阴生津中药和活血通络中药均可降低模型大鼠的免疫球蛋白水平，与强的松功效相当，这为养阴生津法和活血通络法治疗干燥综合征提供了实验室依据。而相对于西药而言，中药具有良好的安全性和价格低廉等优势，可长期而广泛应用。按照中医“治未病”理论，在干燥综合征的早期就应该干预治疗，防止疾病进一步进展，但目前畏于西药的副反应，多数西医主张有明确内脏累及的时候再进行用药，这不符合《内经》“不治已病治未病，不治已乱治未乱”的理念。《灵枢•逆顺》篇中谓：“上工刺其未生者也；其次，刺其未盛者也，……上工治未病，不治已病，此之谓也”，也是强调在疾病发作之先，把握时机，予以治疗，从而达到“治未病”的目的。因此，在干燥综合征的中早期，可以积极的使用中药进行治疗，来控制病情进展。实验结果还显示，两组中药在降低免疫球蛋白表达方面并无显著性差异，从现代药理学角度[7]，无论是以养阴生津为主的生地、麦冬，还是以活血通络为主的当归、丹参，均具有双向免疫调节作用，提示我们在临床即使是同一种疾病，也不可拘泥于一法。根据燥证的疾病进展特点，可以在不同阶段分别采用养阴生津法或活血通络法。

[1]曾小峰.干燥综合征的临床诊治[J].实用老年医学,2002,16(4):172-175.

[2]郝伟欣,董振华.干燥综合征106例中医证候分类回顾性研究[J].中医杂志,2006,47(7):528-530.

[3]魏强华,傅红卫. 清热活血法与养阴生津法治疗干燥综合征的比较研究[J].中医杂志,2006,47(7): 509-511.

[4]杨军,杨彦春,肖林,等. 舍格伦综合征动物模型的探讨[J].临床口腔医学杂志,2007,23(1):17-18.

[5]周唯.阴虚血瘀证探析[J].山东中医药大学学报,2007,31(3):2.

[6]王秦,刘秀梅. 原发性干燥综合征患者血清免疫球蛋白水平分析[J].山西医药杂志,2007,36(8):745.

[7]周世文,徐传福.多糖的免疫药理作用[J].中国生化药物杂志,1994,15(2):143.