胰腺癌组织中MMP-2、MMP-9的表达

吴俊本 张洁 成丕光 王树静 巩本刚 徐怀勇

·论著·

胰腺癌组织中MMP-2、MMP-9的表达

吴俊本 张洁 成丕光 王树静 巩本刚 徐怀勇

目的检测胰腺癌组织基质金属蛋白酶(MMP-2,MMP-9)的表达，分析其与临床病理特征的关系。方法应用免疫组化SP法检测30例胰腺癌及配对癌旁胰腺组织以及11例慢性胰腺炎、6例正常胰腺组织中MMP-2、MMP-9的表达，运用统计软件SPSS12.0分析其与临床病理特征的相关性。结果正常胰腺组织均无MMP-2及MMP-9的表达。慢性胰腺炎组织MMP-2、MMP-9的阳性表达率均为18.2%(2/11)。胰腺癌组织MMP-2、MMP-9的阳性表达率分别为63.3%(19/30)和56.7%(17/30)；配对癌旁组织的阳性表达率分别为23.3%(7/30)和40.0%(12/30)。胰腺癌组织的MMP-2及MMP-9阳性表达率均显著高于配对癌旁组织(P<0.05)；胰腺癌组织及癌旁组织中MMP-2及MMP-9的表达均显著高于慢性胰腺炎组织和正常胰腺组织(P值均<0.05)。MMP-2、MMP-9的表达与胰腺癌临床分期、肿瘤大小、分化程度及淋巴结转移相关。结论胰腺癌组织中MMP-2、MMP-9呈高表达，其高表达与肿瘤的恶性程度相关。

胰腺肿瘤； 基质金属蛋白酶-2； 基质金属蛋白酶-9； 免疫组织化学

肿瘤细胞在侵袭、转移过程中必须破坏细胞外基质等一系列自然屏障。基质金属蛋白酶类(MMPs)直接参与这一过程，其中MMP-2和MMP-9在肿瘤生长、转移过程中起重要作用[1-5]。本研究检测MMP-2、MMP-9在胰腺癌组织中的表达，探讨它们与胰腺癌临床病理特征和预后的关系。

材料与方法

一、材料

收集2005年1月至2009年9月间滨州市人民医院肝胆外科经手术及病理证实的30例胰腺癌标本，其中男17例，女13例，年龄38～82岁，平均(60±12)岁。按UICC的临床分期：Ⅰ期6例，Ⅱ期8例，Ⅲ期12例，Ⅳ期4例。组织学分级：高分化腺癌10例，中分化腺癌15例，低分化腺癌5例。以同期病理证实的11例慢性胰腺炎和6 例正常胰腺组织标本作为对照。

二、免疫组织化学染色

使用即用型快捷免疫组化MaxVisionTM检测试剂盒(福州迈新生物技术有限公司)检测MMP-2、MMP-9的表达，按照试剂盒说明书操作。抗MMP-2、MMP-9一抗购自福州迈新生物技术有限公司。 MMP-2和MMP-9蛋白表达主要定位于胞质,阳性染色为胞质内出现淡黄色至棕褐色颗粒。阳性结果判断参考Volm等[6]的方法。随机选取10个高倍视野,观察1000个细胞,按阳性细胞百分数(0、1%～、26%～、50%～)和染色强度( 无、淡黄色、棕黄色、棕褐色) 分别计为0、1、2、3分,将两分值相加，0～2 分为阴性(-)，3～4 分为弱阳性(+)，5～6分为强阳性(++)。

三、统计学处理

应用SPSS12.0统计软件包处理数据，采用χ2检验。P<0.05为差异具有统计学意义。

结 果

一、MMP-2和MMP-9在各胰腺组织中的表达

6例正常胰腺组织均无MMP-2及MMP-9的表

达。11例慢性胰腺炎组织中各有2例表达MMP-2和MMP-9，阳性表达率均为18.2%。胰腺癌组织中MMP-2、MMP-9的阳性表达率分别为63.3%(19/30)和56.7%(17/30，图1)；配对癌旁组织的阳性表达率分别为23.3%(7/30)和40.0%(12/30)，胰腺癌组织的MMP-2及MMP-9阳性表达率均显著高于配对癌旁组织(χ2=9.774、6.169，P值均<0.05)。而且胰腺癌组织及癌旁组织中MMP-2及MMP-9的表达均显著高于慢性胰腺炎组织和正常胰腺组织(P值均<0.05)。

图1胰腺癌组织的MMP-2(a)、MMP-9(b)的表达(免疫组化 ×400)

二、胰腺癌MMP-2和MMP-9的表达与临床病理特征的关系

胰腺癌组织MMP-2 和MMP-9的表达与患者性别、年龄及肿瘤部位均无关,而与肿瘤分期、大小、淋巴结转移、分化程度有关(P值均<0.05,表1)。

表1 MMP-2、MMP-9表达与胰腺癌临床病理特征的关系

讨 论

由于胰腺癌恶性程度及转移发生率高，大多数胰腺癌预后较差。淋巴转移通路是胰腺癌细胞最主要的转移方式之一，而细胞外基质(extracellular matrix, ECM) 的降解和基底膜的破坏是肿瘤浸润和转移的先决条件。MMPs能降解ECM,破坏基底膜,促进肿瘤血管新生。文献报道，MMP-2和MMP-9的表达与多种肿瘤的发生、分化、转移密切相关[7-8],人工合成的MMP抑制剂Batimastat(BB- 94)可以有效地抑制肿瘤的生长和转移[9]。

本实验结果表明，MMP-2和MMP-9在胰腺癌组织中的表达高于配对癌旁组织、慢性胰腺炎组织及正常胰腺组织的表达，提示MMP-2和MMP-9的高表达与胰腺癌的发生有关。本结果还显示，胰腺癌组织MMP-2和MMP-9表达与淋巴结转移呈正相关，表明MMP-2和MMP-9通过降解ECM，破坏基底膜，促进肿瘤转移；MMP-2和MMP-9表达与胰腺癌的分化程度和肿瘤大小相关，提示MMP-2和MMP-9表达与胰腺癌的恶性程度密切相关，而胰腺癌的恶性程度又与患者预后密切相关。因此通过检测癌组织中MMP-2和MMP-9蛋白的表达可评估胰腺癌分期、恶性程度以及患者的预后。

[1] Coussens LM, Fingleton B, Matrisian LM. Matrix metalloproteinase inhibitors and cancer: trials and tribulations. Science, 2002,295:2387-2392.

[2] Curran S, Murray GI. Matrix metalloproteinases: molecular aspects of their roles in tumour invasion and metastasis. Eur J Cancer, 2000,36:1621-1630.

[3] Egeblad M, Werb Z. New functions for the matrix metalloproteinases in cancer progression. Nat Rev Cancer, 2002,2:161-174.

[4] Hoekstra R, Eskens FA, Verweij J. Matrix metalloproteinase inhibitors: current developments and future perspectives. Oncologist, 2001,6:415-427.

[5] McCawley LJ, Matrisian LM. Matrix metalloproteinases: multifunctional contributors to tumor progression. Mol Med Today, 2000,6:149-156.

[6] Volm M, Koomagi R,Mattern J. Prognostic value of vascular endothelial growth factor and its receptor Flt-1 in squamous cell lung cancer. Int J Cancer, 1997,74:64-68.

[7] 周天保, 杨广顺.血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-9在原发性肝细胞癌中的表达及临床意义.中国现代普通外科进展,2006,9:278-280.

[8] 李春龙，崔云甫，杜雪飞，等. VEGF和MMP-9在胰腺癌侵袭转移中的表达及临床意义.世界华人消化杂志,2008,16:1012-1016.

[9] 何旭,李玉林,张丽红.乳腺癌MMP-2表达与间质微血密度和肿瘤转移的关系.临床与实验病理学杂志,2002,18:279- 281.

Expressionofmatrixmetalloproteinases(MMP-2、MMP-9)inthepancreaticcarcinoma

WUJun-ben,ZHANGJie,CHENGPi-guang,WANGShu-jing,GONGBen-gang,XUHuai-yong.
DepartmentofHepatobiliarysurgery,BinzhouCityPeople′sHospital,Binzhou256610,China

ZHANGJie,Email:whl918@126.com

ObjectiveTo study the expression of matrix metallopro-teinase-2 (MMP-2), matrix metalloproteinase-9(MMP-9) in the pancreatic carcinomas.MethodsMMP-2,MMP-9 expression were detected by immunohistochemistry in surgically resected specimens (cancer tissues, cancer-adjacent tissues and normal tissues) from 30 PC patients，11 pancreatitis patients and 6 normal patients. the results were analyzed combined with clinical pathologic characteristics. The data was analyzed by Chi-Square test.ResultsThere was no expression of MMP-2,MMP-9 in normal pancreatic tissues. Both of MMP-2 and MMP-9 expressions were 18.2% in chronic pancreatitis titssues. Expression of MMP-2, MMP-9 were higher in cancer tissues than in cancer-adjacent tissues(63.3%vs23.3%,56.7%vs40.0%,P<0.05). There were positive correlation between MMP-2,MMP-9 expression and lymph nodal metastasis,tumor sizes,clinical stage and differentiation of tumor(P<0.05).ConclusionsThe expression of MMP-2 and MMP-9 was high, and linked to its unfavorable prognosis.

Pancreatic neoplasms; Matrix metalloproteinase-2; Matrix metalloproteinase-9; Immunohistochemistry

10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2011.06.010

山东省医药卫生科技发展计划(2009HW001)

256610 山东，山东省滨州市人民医院肝胆外科

张洁，Email:whl918@126.com

2011-03-15)

(本文编辑：吕芳萍)