天津市南开医院(300100)马顺英
绿原酸为茵陈中抗菌、消炎、利胆的主要有效成分。绿原酸提取方法主要有水提、水提醇沉、水提石灰乳沉淀法、醇提等[1]。本实验中比较不同浓度水提乙醇沉淀对茵陈中绿原酸提取率的影响。
植物茵陈为菊科植物滨蒿Artemisia scoparia Waldst.et Kit.或茵陈蒿Artemisiacapillaries Thunb.的干燥的地上部分,绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所,批号:1110753-200413),LC-10A型高效液相色谱仪;岛津SPD-10A紫外检测器;威玛龙色谱数据工作站;AGT C18柱(4.6mm×250mm,5μm),分析天平(岛津AEG-120)。
附表 对照品与样品溶液的测定结果
2.1 样品的制备 取茵陈0.1kg加水1L和0.8L煎煮两次,每次1h,过滤液浓缩至0.1L清膏,均分成4份各加入95%乙醇28mL、43mL、70mL、133mL,使药液含乙醇浓度分别为50%、60%、70%、80%,静置24h,过滤,回收乙醇,残渣蒸干,研细备用。
2.2 总固体测定 取上述固体适量,相当于茵陈10g,置干燥至恒重的蒸发皿中,于105℃干燥5h至恒重后取出,置干燥器中冷却30min后称重,以干燥品计算样品中固形物的含量(%)。
2.3 色谱条件 色谱柱为AGT C18柱,乙 腈-1 %醋 酸-水(9∶51∶40)为流动相,流速1mL/min。
2.4 对照品溶液及供试品制备 精密称取绿原酸适量,加甲醇溶解并加流动相稀释得66μg /μL对照品溶液,精密取样品适量,用甲醇溶解,转移至50mL量瓶中稀释至刻度,摇匀,即得供试品溶液。
2.5 结果 分别取对照品及样品溶液10μL,进样依次测定,结果见附表。
绿原酸提取量:水提醇沉70%乙醇沉淀>60%乙醇沉淀>80%乙醇沉淀>50%乙醇沉淀,故采用水提醇沉法工艺,用70%浓度乙醇醇沉。80%乙醇沉淀比:70%乙醇沉淀绿原酸含量低,且绿原酸易分解,故在生药样品提取物分析过程中应注意避光。由于绿原酸分子中含有5个羟基,使得绿原酸具有一定的水溶性,选择水提乙醇沉淀为精制茵陈的有效方法。