白芍配伍桂枝抗炎的药理学作用及机制

唐 菲，於建鹏，张 松

（湖北省黄石市第一医院药剂科，湖北 黄石 435001）

白芍为毛茛科植物芍药的干燥根，具有养血敛阴等功效[1]。张仲景《伤寒论》中提及，白芍与桂枝配伍可以调和营卫，缓中和里[2]。近几年，多于白芍的抗炎作用研究比较多，但仍有很多问题不清楚[3]。本实验通过角叉菜胶造模大鼠胸膜炎模型，检测白芍与桂枝配伍的抗炎作用，并探讨其作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 100只昆明系小鼠，雌雄各半，体质量（30±5）g，动物由锦州医学院实验动物中心提供，动物许可证号：SCXK（辽）2003～0007。

1.1.2 药物及配制方法 白芍、桂枝均购自广州致信中药饮片有限公司；弹性蛋白酶底物、磷酸二酯酶抑制剂、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、角叉菜胶，均购自Sigma公司；丙二醛（MDA）测定试剂盒，购自南京建成生物工程研究所。白芍与桂枝饮片，加适量蒸馏水煎煮至沸腾，倒出煎液，放冷后，缓缓加入95%乙醇，4℃下放置24 h，取上清液。

赛多利斯电子分析天平、BIO-RAD 550型酶标仪、紫外分光光度计、日立SCR20BA高速冷冻离心机。

1.2 方法

1.2.1 角叉菜胶大鼠胸膜炎造模及抗炎实验方法 100只SD大鼠，雌雄各半，随机分为5组：对照组（生理盐水）、角叉菜胶组（1%角叉菜胶，0.05 mL）、白芍组（白芍，100 mg/kg）、桂枝组（桂枝，100 mg/kg）、配伍组（白芍与桂枝1 : 1，100 mg/kg）。各组给药30 min后，分别注入0.05 mL角叉菜胶。造模5 h后，眼球采血检测。

1.2.2 血浆丙二醛（MDA）含量的检测 按照试剂盒说明书进行具体操作，于532 nm波长，检测其吸光度。

1.2.3 血浆弹性蛋白酶含量检测 血浆弹性蛋白酶的检测方法，参考文献进行[4]。弹性蛋白酶标准品用PBS稀释（μg/mL），做出标准曲线，计算小鼠血浆弹性蛋白酶含量。

1.2.4 中性粒细胞环磷酸腺苷-磷酸二酯酶（CAMP-PDE）活性检测 中性粒细胞Camp-PDE活性影响的检测方法，参考张冰等的方法[5]。

2 结果

2.1 各组小鼠丙二醛（MDA）含量的变化

与对照组相比，角叉菜胶组丙二醛含量明显升高（P＜0.05）。与角叉菜胶组相比，白芍组和桂枝组，抑制角叉菜胶组丙二醛含量的升高（P＜0.05）；白芍桂枝配伍组，明显抑制角叉菜胶组丙二醛含量的升高（P＜0.01）。见表1和图1。

2.2 各组小鼠弹性蛋白酶含量的变化

与对照组相比，角叉菜胶组弹性蛋白酶含量明显升高（P＜0.05）。与角叉菜胶组相比，白芍组和桂枝组，抑制角叉菜胶组弹性蛋白酶含量的升高（P＜0.05）；白芍桂枝配伍组，明显抑制角叉菜胶组弹性蛋白酶含量的升高（P＜0.01）。结果见图2。

2 结果

2.1 各组小鼠丙二醛（MDA）含量的变化

与对照组相比，角叉菜胶组丙二醛含量明显升高（P＜0.05）。与角叉菜胶组相比，白芍组和桂枝组，抑制角叉菜胶组丙二醛含量的升高（P＜0.05）；白芍桂枝配伍组，明显抑制角叉菜胶组丙二醛含量的升高（P＜0.01）。见表1和图1。

2.2 各组小鼠弹性蛋白酶含量的变化

与对照组相比，角叉菜胶组弹性蛋白酶含量明显升高（P＜0.05）。与角叉菜胶组相比，白芍组和桂枝组，抑制角叉菜胶组弹性蛋白酶含量的升高（P＜0.05）；白芍桂枝配伍组，明显抑制角叉菜胶组弹性蛋白酶含量的升高（P＜0.01）。结果见图2。

2.3 各组对中性粒细胞CAMP-PDE活性的影响

3 讨论

发生炎症时，活化的白细胞促使活性氧自由基的生成，诱发组织细胞的脂质过氧化。丙二醛作为脂质过氧化过程中的主要产物，丙二醛增多，可以造成细胞毒性，使细胞功能受损。而且，丙二醛含量，通过作为机体内脂质过氧化程度的反应指标， 间接反应细胞损伤的程度。本研究结果表明（见图1），致炎因子（角叉菜胶）可以使机体产生过量的氧自由基。白芍抑制模型小鼠血浆MDA含量的升高，表明白芍的抗炎作用与此有关。桂枝也抑制模型小鼠血浆M D A含量的升高，表明桂枝的抗炎作用也与此有关。而且，白芍与桂枝（1 : 1）配伍，明显抑制丙二醛含量的升高，可能抑制炎症细胞CAMP-PDE活性，从而抑制炎症细胞功能。弹性蛋白酶能够较为准确地反映该组织脏器损伤的严重程度[6]。本研究中结果表明（见图2），白芍与桂枝配伍，与抑制中性粒细胞弹性蛋白酶的释放有关。

表1 各组对中性粒细胞CAMP-PDE活性的影响（n=100）

图1 各组小鼠的丙二醛含量变化

图2 各组小鼠弹性蛋白酶含量变化

现代药理学证实，桂枝能够扩张血管，改善血液循环。白芍的主要活性成分为芍药苷，能够增强心肌对缺血缺氧的耐受力作用。白芍与桂枝配伍，寒温结合，具有启发心阳，以及益阴止汗的功效。本研究结果表明，白芍和桂枝配伍后，抗炎作用显著增强，两者具有协同作用。

[1]陈镜宇,吴华勋,陈 尹,等.胶原性关节炎大鼠滑膜组织G蛋白偶联受体激酶的表达及白芍总苷对其的影响[J].中国药理学通报,2008,24(6):715-717.

[2]林跃虹,李惠民,张晓民,等.白芍配伍桂枝抗炎作用的实验研究[J].实用临床医药杂志,2008,12(7):22-24.

[3]张大昌,叶海林,朱电波.白芍苦苷联合来氟米特治疗类风湿性关节炎40例疗效观察[J].蚌埠医学院学报,2007,32(3):307.

[4]姜代勋,巩忠福,陈益山,等.白芍注射液抗炎效果观察[J].中国兽医杂志,2009,45(11):90-91.

[5]张 冰,姜代勋,陈 武,等.犬中性粒细胞磷酸二酯酶活性及清热药对其影响的观察[J].中国兽医杂志,2009,45(2):85-87.

[6]陈桂敏,代林刚,贺 金.类风湿性关节炎相关机制研究进展[J].海南医学院学报,2007,13(3):292.