肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞数目的变化及其临床意义

石艳芬，陈梅英，苏文芳（福建省龙岩市第二医院检验科 364000）

有研究表明，在机体抗肿瘤免疫中细胞免疫是关键，特别是细胞的数量及质量是宿主对肿瘤细胞的免疫监控异常重要的指标［1］。本研究就肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群和自然杀伤（NK）细胞数目的变化进行分析，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2011年8～12月在本院住院的肿瘤患者，把同类病种患者数达到11人以上的进行分组，患者数低于11例的病种不进行统计，总共52例，分为3组：肺肿瘤组（22例）、乳腺肿瘤组（17例）、胃肿瘤组（13例），该分组患者的平均年龄（56±11）岁，其中男27例，女25例，年龄40～78岁，中位年龄57岁。另外选取这期间住院的肿瘤患者88例，分为肿瘤早、中期组（62例）与肿瘤晚期组（26例），该分组的患者平均年龄（52±13）岁，其中男54例，女34例，年龄36～81岁，中位年龄55岁。同时选取19例健康体检者作为健康对照组，年龄（48±11）岁。

1.2 仪器与试剂 所用试剂盒为MultiTEST IMK四色、免洗淋巴细胞亚群分析试剂盒，美国BD公司产品。仪器为FACSCalibur型流式细胞分析仪。

1.3 方法 采集所有研究对象的静脉全血2mL，乙二胺四乙酸抗凝备用。取100μL抗凝全血置于专用流式试管，加入20 μL单克隆抗体，充分混匀后避光反应20min。随后按操作说明分别加入溶血剂，溶解未标记细胞及红细胞。采用流式细胞术检测外周血中的淋巴细胞亚群，按操作程序上机检测。

1.4 统计学方法 研究资料采用SPSS16.0统计软件处理，结果以表示，两组间比较采用两样本均数t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 不同类型肿瘤组淋巴细胞亚群的检测结果 见表1。肺肿瘤组与对照组比较，CD3＋T淋巴细胞、CD4＋Th淋巴细胞及CD4＋／CD8＋较对照组明显减少，差异有统计学意义（P＜0.05），CD8＋Ts较对照组明显增多，差异有统计学意义（P＜0.05）。胃肿瘤组NK细胞数较对照组明显减少，差异有统计学意义（P＜0.05）。乳腺肿瘤组与对照组间免疫功能差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.2 不同级别肿瘤组淋巴细胞亚群的检测结果 见表2。晚期肿瘤组与早、中期肿瘤组比较，CD3＋T、CD4＋Th淋巴细胞及CD4＋／CD8＋明显减少，差异有统计学意义（P＜0.05）。

表1 各类肿瘤组与健康对照组的T淋巴亚群及NK细胞比较（）

表1 各类肿瘤组与健康对照组的T淋巴亚群及NK细胞比较（）

注：与健康对照组比较，＊P＜0.05。

组别 n CD3＋（%） CD4＋（%） CD8＋（%） CD4＋／CD8＋ NK（%）肺肿瘤组 22 62.95±11.32＊ 31.04±11.79＊ 32.15±9.42＊ 0.97±0.72＊19.43±13.1乳腺肿瘤组 17 68.35±6.09 41.75±7.17 24.29±8.13 1.99±0.96 18.73±9.86胃肿瘤组 13 66.73±9.13 40.71±6.79 24.70±9.46 1.91±0.82 11.88±4.70＊健康对照组 19 70.42±8.21 39.71±8.16 20.05±6.51 1.78±0.53 18.68±5.25

表2 早、中期肿瘤组与晚期肿瘤组的T淋巴亚群及NK细胞比较（）

表2 早、中期肿瘤组与晚期肿瘤组的T淋巴亚群及NK细胞比较（）

注：与晚期肿瘤组比较，＊P＜0.05。

组别 n CD3＋（%） CD4＋（%） CD8＋（%） CD4＋／CD8＋ NK（%）早、中期肿瘤组 62 69.15±9.44＊ 37.34±9.61 32.15±9.42＊ 1.82±0.81＊19.43±13.1晚期肿瘤组 26 60.28±7.13 28.31±7.17 24.29±9.23 0.93±0.96 18.73±9.86

3 讨 论

3.1 肿瘤的发生与发展不仅与肿瘤细胞的基因改变有关，而且还与细胞所在的周围环境相关，肿瘤宿主的免疫状况便是内环境之一［2］。T细胞亚群之间的细微平衡是维持免疫系统内部环境稳定的一个中心环节。CD3＋T细胞的数量代表了机体总的细胞免疫状态；CD4＋Th细胞为辅助性T细胞，辅助机体完成抗肿瘤免疫；CD8＋Ts细胞为抑制性T细胞，抑制机体的免疫应答；CD4＋／CD8＋（Th／Ts）保持动态平衡，以维持机体细胞免疫功能的稳定，当其比值降低，则患者的免疫功能低下，从而有利于肿瘤的增殖［3］。NK细胞则是特殊性质的细胞群体，其杀伤肿瘤作用不需主要组织相容性复合体限制，在机体的抗肿瘤免疫中发挥重要作用［4］。故T淋巴细胞亚群及NK细胞的数量可直接反映机体细胞免疫的状况。

3.2 肺肿瘤的发病率在我国居于各恶性肿瘤之首位，达38.46／10万，而且预后差，肺肿瘤的总体5年生存仅占8%～14%［5］。本实验结果显示，肺肿瘤患者CD3＋T淋巴细胞、CD4＋Th淋巴细胞、CD4＋／CD8＋（Th／Ts）细胞数量较健康对照组明显下降，CD8＋Ts细胞数量较健康组明显增多，差异均有统计学意义（P＜0.05），而且 CD4＋／CD8＋（Th／Ts）出现倒置，由此提示肺肿瘤有较严重的免疫功能紊乱，抗肿瘤免疫水平低下，处于免疫抑制状态。乳腺肿瘤是女性最常见的肿瘤之一，但其总体5年生存率可以达到75%以上，甚至有些患者可以长期带瘤生存。在本次实验中也发现，乳腺肿瘤的T淋巴细胞亚群、NK细胞与健康对照组相比差异无统计学意义，显示乳腺肿瘤患者的免疫功能较好，抗肿瘤免疫水平正常，这是否与其能较长生存有关联，还需进一步研究。胃肿瘤患者与健康对照组相比，NK细胞明显减少，差异有统计学意义（P＜0.05），其他数值没有明显差异，由此表明胃肿瘤患者的抗肿瘤免疫减低。

3.3 本文也从早中期肿瘤组和晚期肿瘤组患者间的比较发现，晚期肿瘤组较早、中期肿瘤组的CD3＋T淋巴细胞、CD4＋Th淋巴细胞、CD4＋／CD8＋（Th／Ts）细胞具有下降的倾向，表明T细胞与肿瘤患者的临床病程具有一定的关联性。因此认为，肿瘤患者的机体免疫功能随肿瘤病情的发展逐渐下降，但对评价疾病的预后，尚有待于进一步研究。

3.4 目前国内外关于肿瘤患者体内亚类T淋巴细胞改变的报道是不尽相同的，提示T细胞在机体肿瘤免疫中的作用和地位不能单从T细胞数量上来判断机体的免疫状态，还应从T细胞功能，如分泌细胞因子、细胞毒性、细胞活性等方面综合考虑分析。因此，今后关于肿瘤患者T细胞的研究应该从多方面、多角度来分析总结，为肿瘤的免疫治疗提供一些线索。

［1］ 王成龙，谭家麟.直肠癌患者外周血细胞和淋巴细胞亚群数目的变化及其临床意义［J］.中国普通外科杂志，2001，10（3）：228－230.

［2］ Coussens LM，Werb Z.Inflammation and cancer［J］.Nature，2002，420（6917）：860－867.

［3］ Ohwada S，Iino Y，Nakamura S，et al.PeripheralbloodT cell subsets as a prognostic factor in gastric cancer［J］.Jpn J Clin Onco，1994，24（1）：7－11.

［4］ Pilla L，Squarcina P，Coppa J，et al.Natural killer and NKLike T－cell activation in colorectal carcinoma patients treatedwith autologous tumor－derived heat shock protein 96［J］.Cancer Res，2005，65（9）：3942－3949.

［5］ 邹静.肺肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群变化特点及临床意义［J］.中国免疫学杂志，2010，26（11）：1017－1020.