4种白带涂片检查方法对念珠菌检出率分析

苏悦兴，张满娥，陈梅英，陈淮林，张园满（福建省龙岩市第二医院检验科 364000）

白带检查主要观察清洁度及有无滴虫、念珠菌、淋病奈瑟菌、加德纳菌等。本院常用方法为盐水法和革兰染色法，文献报道改良方法有生理盐水＋5%冰醋酸［1］和生理盐水＋10%氢氧化钾（KOH）［2］。4种方法对念珠菌检出率如何，作者将所在医院妇科门诊300份白带分别采用以上4种方法对比分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 采集2012年1～12月院妇科门诊患者白带标本300份，患者年龄16～61岁。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 用无菌棉拭子采集患者阴道后穹窿处、宫颈口等处分泌物，直接放进装有生理盐水的试管立刻送检。

1.2.2 检测方法 每份标本涂片4张，1张用盐水涂片法镜检，1张用革兰染色法，1张用生理盐水＋5%冰醋酸法，另一张用生理盐水＋10%KOH法涂片法镜检。（1）生理盐水涂片法：取标本直接涂片，镜检，显微镜下见卵圆形孢子或假菌丝与出芽细胞相连接，即可报告阳性结果。（2）革兰染色法：干燥，加入染色龙胆紫液染色10s之后水洗、甩干；加入染液碘溶液染色10s之后水洗、甩干；加入染液脱色液脱色10～15s之后水洗、甩干；最后加沙黄溶液复染10s之后水洗，以滤纸吸干或在空气中干后镜检。（3）5%冰醋酸法：将生理盐水涂片后加1滴5%冰醋酸溶液溶解透明后再镜检，显微镜下见卵圆形孢子或假菌丝与出芽细胞相连接，可报告阳性结果。（4）10%KOH溶液透明法：将生理盐水涂片后加1滴10%KOH溶液溶解透明后再镜检，显微镜下见卵圆形孢子或假菌丝与出芽细胞相连接，可报告阳性结果。

2 结 果

4种白带涂片检查方法对念珠菌的检出率结果见表1。由表1可见，其他3种方法与盐水法比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。

表1 300份白带标本念珠菌检出率比较

3 讨 论

3.1 正常生理状态下，阴道本身有自净作用，形成自然防御功能。假如自然防御功能遭到破坏，则易受病原微生物的侵袭，导致阴道炎症如非特异性阴道炎、真菌性阴道炎、滴虫性阴道炎等［3］。本文述及的念珠菌即为阴道炎的常见病原微生物。

3.2 300份阴道棉拭子标本生理盐水涂片法检测念珠菌检出率为21.0%，革兰染色法为33.0%，与生理盐水涂片法相比检出率提高12.5%，与文献［1］报道真菌检出率17.6%（52／296）提高到30.1%（89／296）一致。生理盐水＋10%KOH法、生理盐水＋5%冰醋酸法检出率分别为31.3%、32.7%，与生理盐水涂片法相比检出率分别提高10.3%、11.7%，与文献［1－2］报道一致，差异有统计学意义（P＜0.05）。革兰染色法与冰醋酸法、10%KOH法结果差异无统计学意义（P＞0.05）。结果显示4种方法检测念珠菌临床可根据各实验条件选择应用。

3.3 阴道分泌物中念珠菌孢子常附着于上皮细胞边缘，量少时观察效果佳。当发生炎性反应时标本背景较杂，细胞成分较多，生理盐水涂片法不易观察到芽生孢子和假菌丝，易造成漏检，所以检出率不高。生理盐水＋5%冰醋酸涂片法是根据阴道正常pH值保持在4.0～4.5，而5%醋酸的pH值约为5，可以溶解白带中的红细胞和不定形成分，而上皮细胞和白细胞、念珠菌、滴虫、杆菌、球菌不被溶解，因此视野清晰，各种成分易直接涂片观察［1］。生理盐水＋10%KOH法可以溶解白带中的红细胞和白细胞，上皮细胞等不定形成分，而念珠菌不被溶解，因此视野清晰，更易直接涂片观察。革兰染色法染色后念珠菌呈深蓝色，可见芽生孢子，菌丝长而直、有分枝、着色不均，能清晰辨认念珠菌。

3.4 从试验结果来看生理盐水涂片法念珠菌的检出率较低，与文献［4］报道一致，其他3种方法检出率较高且相近。由于染色法操作复杂、费时、成本高，患者费用大［5］，因此在实际工作中，可采用操作简单、快捷、成本低的盐水法＋酸、碱法替代。

［1］ 林凤金.白带生理盐水涂片改良法在妇科白带检查中的临床价值［J］.上海煤炭工业医学杂志，2009，12（11）：1741.

［2］ 任爱英.如何提高白带涂片检查念珠菌阳性率［J］.标记免疫分析与临床，2010，17（2）：119.

［3］ 郭素芳，张文坤.妇女生殖道感染的控制［J］.国外医学：妇幼保健分册，2001，12（1）：3－5.

［4］ 俞碧霞.妇科白带涂片快速染色法与盐水法的比较［J］.上海医学检验杂志，2001，16（1）：51，53.

［5］ 徐旭娟，张建林.白带多项检查快速染色技术在妇科白带检查中的应用［J］.南通大学学报：医学版，2007，27（2）：66－67.