BCL11A、LKB1在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

王凤玲,王桂丽

(佳木斯大学附属第一医院老年病科,黑龙江 佳木斯 154003)

肺癌是当前危害人类生命和健康最严重的恶性肿瘤之一。其中,非小细胞肺癌 (Nosmall-eenlungcancer N SCLC)占所有肺癌的60%～80%,是肺癌治疗的重点。它的发生是一个多基因、多因素、多阶段的过程。BCL11A(B细胞淋巴白血病 /淋巴瘤11A)首先是作为逆转录病毒结合的一个位点于小鼠中发现的,它在多种肿瘤组织中表达增加并和肿瘤恶性程度相关。LKBl/STK11(serine/threonine kinase 11)(丝 /苏氨酸蛋白激酶11)基因为从 peutz-Jeghers综合征(黑色素斑-胃肠多发性息肉综合征,PJS)患者中鉴定的抑癌基因。本课题旨在探索 BCL11A与 LKB1在肺癌发生及演变过程中的作用及两者之间的关系,为临床有效评估肺癌恶性程度及预后提供科学依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

病例选择:佳木斯大学附属第一医院2011-02～2012-05间病理资料完整,其间未经放疗、化疗,行手术切除并经病理确诊的非小细胞肺癌(NSCLC)60例,同时加取远离癌的非肿瘤性肺组织作为对照40例。按美国联合癌症分类委员会(AJCC)和国际抗癌联盟(UICC)2002年制订的 TNM分期标准[1]对全部资料进行统一命名和分类:男39例,女21例。年龄35～70岁 ,平均 52.6岁。其中鳞癌 28例 ,腺癌 32例。有淋 巴结转移 31例,无淋巴结转移 29例。低分化 17例,中分化 22例,高分化 21例。TNM分期标准:Ⅰ 期17例,Ⅱ 期 26例,Ⅲ 期 17例。所有标本经10%中性福尔马林固定,石蜡包埋后在轮转式切片机上做4μ m切片,每例连续切片 3张,经苏木素-伊红染色,由两名病理科医师做出病理诊断。

1.2 实验方法

应用免疫组织化学方法检测 BCL11A及 LKB1在肺癌中的表达。

1.3 统计学处理

所有数据用 SPSS17.0统计软件进行统计分析,组间比较采用i2检验,两因子比较采用相关性分析,P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 BCL11A及 LKB1在肺癌组织及癌旁正常肺组织表达情况

BCL11A在癌组织及癌旁组织的阳性表达率分别为70.00%和35.00%,差异有统计学意义 (P＜0.01);LKB1在癌组织及癌旁组织的阳性表达率分别为38.33%和70.00%,差异有统计学意义 (P＜0.01)。BCL11A及 LKB1在肺癌组织中的表达均与性别、年龄、肿瘤大小、病理分型无关 (P＞ 0.05),与临床分期、分化程度及淋巴结转移有关(P ＜ 0.05)。见表1。

表1 肺癌组织中 BCL11A、LKB1的表达与临床病理因素的关系

2.2 BCL11A和 LKB1蛋白表达的关系

BCL11A、LKB1两者在肺癌组织中的表达呈负相关(r=- 0.43,i2= 5.64,P ＜ 0.05)。见表2。

表2 非小细胞肺癌中 BCL11A、LKB1表达的关系

3 讨论

肺癌的发生发展过程中存在多层次的基因表达调控异常。越来越多的分子表达调控异常与肿瘤特定的细胞周期、生长分化、细胞移动、凋亡调节等生物学过程改变相关。阐明具有驱动作用的特定基因表达调控变异机制及抑癌基因的失活有助于阐明肿瘤特定阶段生物学行为,而非小细胞肺癌发生过程中经常伴有抑癌基因杂合性丢失及癌基因的活化,因此基因水平研究有助于针对变异靶点进行临床干预。

BCL11A基因定位于人类染色体 2pl6.1区,基因全长约102kb,首次是在 t(2;14)(p16;q32.3)异位的慢性淋巴细胞白血病中发现[2]。BCL11A基因在物种间高度保守,编码一种 Kr ü ppel样锌指蛋白,这种蛋白 N末端有一个恒定的C2HC锌指,c末端有6个 C2HC锌指的结构[3]。之前研究发现BCL11A能与靶基因启动子区的5’-GGCCGG-3’基序结合,影响组蛋白 H3/H4的去乙酸化,从而抑制靶基因的转录[4]。BCL11A主要表达于生发中心 B细胞和脑组织中,而本研究显示 BCL11A在非小细胞肺癌组织中高表达。这提示BCL11A原癌基因异常活化可能参与非小细胞肺癌的发生发展。同时有研究报道 BCL11A的表达能上调 V EGF(血管内皮生长因子)的表达,后者能促进肿瘤的发生发展。

LKB1基因定位于人 19p13.3带,cDN A全长 2158bp,编码区1302bp,有9个外显子。编码的 LKB1为一种60KD的由433个氨基酸组成的丝氨酸 /苏氨酸蛋白激酶,含有一个激酶区域(位于 50-337密码子),其 N端含有一个核定位信号区和胞浆定位区。LKBI广泛的表达于人体多种组织。Rowan[5]等采用原位杂交技术对成人、胎儿组织以及肿瘤组织进行LKB1mRNA检测,发现几乎所有组织均有表达,而肿瘤组织中的表达高于相应的正常组织或 /和良性病变。最近研究表明 LKBI基因的突变、杂合型缺失及启动子5’-CpG岛的甲基化,可导致多种恶性肿瘤的发生[6]。近年来的研究表明LKB1的功能异常不仅是 PJS的致病因素 ,同时它还是一个重要的抑癌基因。LKB1作为一种抑癌基因对肿瘤细胞的增殖分化起负性调控作用,通过 LKB1-SP1-VEGF的调节通路,抑制肿瘤血管生成及其转移,因此,被认为是抑癌基因。众所周知,肿瘤的生长与转移有赖于新生血管的形成,然而肿瘤细胞本身在代谢的过程中亦分泌血管内皮生长因子并表达其受体,加速肿瘤新生血管的形成,从而促进肿瘤的发生发展。BCL11A、LKB1两者基因的表达均对 V EGF基因的表达产生影响,但是机制不同,两者失衡可能促进肿瘤的发生、发展。本研究显示 BCL11A在肺癌组织及癌旁组织中的阳性表达率分别为70.00%和35.00%,差异有统计学意义(P＜0.01),提示 BCL11A在肺癌中高表达,表明 BCL11A高表达与肺癌的发生有关;LKB1在肺癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为38.33%和70.00%,差异有统计学意义(P ＜0.01)。BCL11A及 LKB1在肺癌组织中的表达均与性别、年龄、肿瘤大小、病理分型无关 (P＞ 0.05),而与临床分期、分化程度、淋巴结转移有关 (P＜0.05)。且二者在肺癌中的表达呈负相关。因此,二者的联合检测可以作为评估肺癌恶性程度及预后的指标。

[1]陆再英.内科学 [M].北京:人民卫生出版社,2008,125-126

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