MCH、α-HBDH联合检测在巨幼红细胞性贫血中的诊断价值

栾正云，张立新，叶 军，陈静波，陆桃红，李 林

(泰州市人民医院临床医学研究所，江苏 泰州 225300)

贫血(Anemia)是指外周血中单位体积内血红蛋白(Hb)浓度、红细胞计数和(或)红细胞比积低于正常值，其中以血红蛋白浓度最为重要[1]。目前红细胞形态学指标在贫血鉴别中已被广泛应用，红细胞平均体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白含量(MCH)、红细胞体积分布宽度(RDW-CV)为常用的几个参数[2]，由于缺铁性贫血(IDA)为小细胞低色素性贫血，在和正常细胞、大细胞性贫血(MCV>92 fl)鉴别时，采用MCV、MCH、RDW-CV进行诊断效率很高[3-4]。但在贫血鉴别中存在不足，尤其是大细胞贫血之间鉴别诊断，尽管巨幼红细胞性贫血(MA)为最常见的大细胞性贫血，但溶血性贫血(HA)、骨髓增生异常综合征(MDS)等大细胞性贫血也较多见[5]，因为它们的MCV、RDW-CV均增高，因此鉴别较为困难。骨髓诊断尽管价值更高，但因创伤操作较为复杂，而叶酸、维生素B12检测需特殊的仪器，因此寻找简单的外周血检测指标，提高MA在大细胞性贫血中的鉴别诊断能力成为一个重要问题。

α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH，下以HBDH代表)是H亚型乳酸脱氢酶(LDH)，常用来代表血清中LDH1、LDH2同工酶活性[6]，含LDH-1多的组织有红细胞、心肌，血清HBDH水平明显低于细胞组织，红细胞破坏增加，寿命缩短等可导致HBDH增高[7]。MA、MDS、HA三种贫血MCV均高于正常[4，6]，它们的HBDH活性也高于正常[7-8]，但程度有所不同。我们拟通过分析三种大细胞性贫血红细胞形态学参数(MCV、MCH、RDW-CV)和HBDH活性，进行回归分析，绘制ROC曲线，确定诊断点以提高MA诊断效率。

1 材料与方法

1.1 研究对象 2005年12月至2011年4月本院住院贫血患者75例，平均年龄61岁，根据诊断标准[9]，MA 34例，Hb：(60.8±20.3)g/L；HA 16例，Hb：(64.1±14.7)g/L ；MDS 25例，Hb：(61.1±19.9)g/L。 正常对照40例，Hb：(127.21±12.81)g/L。

1.2 仪器 日立-7600生化分析仪，SF-3000血球计数仪，日本东亚公司产品。

1.3 试剂 α-羟丁酸脱氢酶检测采用RANDOX生化试剂。

1.4 标本采集 清晨空腹采血。MCV、MCH、RDW检测使用EDTA-K2抗凝的静脉血2 ml，混匀；α-HBDH检测使用血清。标本2 h内检测。

2 结果

2.1 大细胞贫血红细胞形态学参数及α-HBDH比较 MA、HA、MDS组的 MCV、MCH、RDW 和α-HBDH值均高于正常组(P<0.05)；但它们之间的MCV和RDW比较差异无统计学意义(P>0.05)，MA组与HA组的MCH值比较，MDS组与MA、HA组的α-HBDH活性比较差异均有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 大细胞贫血红细胞形态学参数及α-HBDH比较(±s)

表1 大细胞贫血红细胞形态学参数及α-HBDH比较(±s)

注：(1)与正常组比较，a:Q=7.98；b:Q=4.47；c:Q=4.68；d:Q=7.654；e:Q=3.233；f:Q=4.858；h:Q=7.004；i:Q=5.448；j:Q=5.544；k:Q=8.428；l:Q=6.387；m:Q=4.062；P均<0.05。此两种统计值为One Way ANOVA检验时方差不齐时采用秩和检验，H为Kruskal-Wallis方法分析四组总差异的统计值，Q为Dunn's Method两两比较的统计值。(2)g:MA与HA比较，Q=2.734，P<0.05；n:MA与MDS比较Q=3.531，P<0.05；o:MDS与HA比较，Q=2.667，P<0.05。

组别正常对照MA HA MDS α-HBDH(U/L)121.0±38.6 1003.5±612.2k 782.5±440.7l 335.0±255.7mo 83.860<0.001例数40 34 16 25 HP MCV(fl)85.7±3.6 118.3±17.1a 105.2±16.3b 103.7±15.8c 67.901<0.001 MCH(pg)28.4±1.9 39.8±5.3d 34.2±6.0eg 35.7±5.7f 61.875<0.001 RDW-CV(%)12.9±1.2 20.5±3.5h 20.5±4.2i 19.4±4.3j 63.898<0.001

2.2 回归分析 采用MCV、MCH、RDW、α-HBDH作为自变量，大细胞贫血类型作为因变量(MA=1，HA和MDS病例合并=0)，进行Logistic回归分析，结果MCV、RDW被剔除，MCH和HBDH进入，见表2；Logistic回归方程为P=1/{1+e-[-7.953+0.168(MCH)+0.002(HBDH)]}。

表2 Logistic回归入选自变量回归系数、标准误和P值

2.3 ROC曲线 分别采用MCH、HBDH、MCH联合HBDH作为指标绘制ROC曲线，结果显示MCH、HBDH、MCH联合HBDH的三条曲线线下面积分别为0.746，0.719，0.801，MCH联合HBDH线下面积最大，见图1。

图1 ROC曲线图

2.4 确定诊断点 采用MCH联合HBDH作为诊断方法，确定诊断点。取假阳性R=10%(即R=0.100)，根据ROC曲线坐标点，可得P(R=0.100)时诊断点为0.484 8，大于或等于此诊断点即判为MA。

3 讨 论

MA为大细胞性贫血，而MDS和HA亦为常见的大细胞性贫血，尽管MCV是用来描述平均红细胞体积的参数，对体积变化敏感，但本研究结果显示MA、MDS和HA之间差异无统计学意义，这意味着MCV并不能作为这三种大细胞性贫血的鉴别要素；这三种贫血按照Bassman等[10]的分类方法均属于大细胞不均一性贫血，RDW均增高，统计结果也显示它们之间差异无统计学意义；由于MA血红蛋白产生充足，因此MCH增高明显。

MA患者血清中α-HBDH升高，这与它的病因密切相关，MA为叶酸，VitB12缺乏引起的造血功能紊乱，出现核幼浆老，骨髓中出现巨幼红细胞，外周血出现巨大红细胞，骨髓巨噬细胞负责清除有内在缺陷的成熟过程中的前体细胞，而周围循环中的巨大红细胞在循环中易于受伤，然后被肝或脾巨噬细胞清除，导致细胞中的α-HBDH释放到血液中。而HA与MDS的α-HBDH水平也高于正常，HA常见血管外溶血[11]，MDS也易见红系巨幼变，并存在骨髓无效造血及幼红细胞原位溶血、破坏增加或寿命缩短现象。

在外周血指标均未见高特异性的状况下，选择指标联合诊断可提高MA诊断效率。本研究通过Logistic回归从以上四种指标中选出MCH、α-HBDH两个指标，确立了Logistic回归方程，并采用MCH、HBDH、MCH联合HBDH作为指标绘制ROC曲线。结果显示MCH联合HBDH线下面积最大，同时得到了诊断点(P)。个体患者如果发现为大细胞性贫血，可以将MCH和α-HBDH结果代入Logistic回归方程，得到P值，比较诊断点，可提高MA诊断效率。因为此诊断点(P)为设定假阳性率为10%，因此保证了诊断MA较高的特异性，而敏感性相对较低，为61.8%。

综上所述，MCH、α-HBDH联合检测对于从常见大细胞性贫血中帮助鉴别诊断出MA是更加有效的方法。当然，由于其诊断点偏重了特异性，导致一部分MA漏诊，因此诊断性治疗疗效观察、骨髓穿刺检查仍是重要的诊断手段。

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