枸杞多糖对骨质疏松大鼠血清PICP、ICTP及钙、磷、镁和碱性磷酸酶水平的影响

马进峰，王一农，金 锐

1)银川市第一人民医院骨科 银川 750004

2)宁夏人民医院骨二科 银川 750010

3)银川市妇幼保健院生殖中心 银川 750001

近年来，中草药在治疗骨质疏松症方面引起了广泛关注。枸杞多糖是宁夏特产枸杞子的有效提取成分，中医学把骨质疏松归于“虚劳”、“骨瘘”等，经常用含有枸杞的方剂治疗[1]。Ⅰ型胶原蛋白约占骨组织有机成分的80% ～90%[2-3]，对维持骨结构的完整及骨生物力学特性具有十分重要的意义。该研究建立骨质疏松症大鼠模型，观察在枸杞多糖干预下模型大鼠血清Ⅰ型前胶原羧基端前肽(pro-collagen type Ⅰ carboxy-terminal propertied，PICP)、Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(carboxyterminal cross linked telopeptide of type Ⅰ collagen，ICTP)及钙、磷、镁、碱性磷酸酶等骨转换生化指标水平的变化，以探讨枸杞多糖治疗骨质疏松症的具体作用机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器 枸杞多糖由宁夏启元药业提供，批号H22023655;已烯雌酚由天津市金耀氨基酸有限公司提供，批号H12020536;生理盐水由宁夏启元国药有限公司提供，批号100221-1;PICP和ICTP酶联免疫检测试剂盒为银川易琳燊科贸有限公司进口分装产品。BIO-RAD1575型洗板机、Model-680型酶标仪、DHP-9082型电热恒温培养箱、Olympus AU2700全自动生化分析仪、TD5A-WS台式低速离心机等由宁夏医科大学提供。

1.2 实验分组与造模方法 3月龄雌性SD大鼠45只，体质量280～230 g，由宁夏医科大学实验动物中心提供。随机数字表法分为5组，每组9只。30 g/L戊巴比妥钠1 mL/kg腹腔注射麻醉大鼠，假手术组切除卵巢周围少量脂肪组织;余4组均切除双侧卵巢，参照文献[2]的方法制作骨质疏松大鼠模型，常规饲养2个月后开始药物干预。假手术组和模型组按5 mL/(kg·d)灌胃生理盐水，枸杞多糖低、高剂量组分别按10、40 mg/(kg·d)灌胃枸杞多糖，已烯雌酚组按0.1 mg/(kg·3 d)腹腔注射已烯雌酚。药物干预时间为3个月。

1.3 检测指标 干预3个月后，各组大鼠麻醉后取心脏血 5 mL，3500 r/min离心 15 min，取血清，ELISA法测定样品中PICP和ICTP水平，利用全自动生化分析仪测定钙、磷、镁和碱性磷酸酶水平。

1.4 统计学处理 采用SPSS 11.0处理，所有数据先行正态性和方差齐性检验。5组大鼠血清PICP、ICTP及钙、磷、镁、碱性磷酸酶水平的比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK-q检验，检验水准 α =0.05。

2 结果

2.1 各组大鼠血清PICP和ICTP水平比较 见表1。

表1 各组大鼠血清PICP、ICTP水平的比较

2.2 各组大鼠血清钙、磷、镁、碱性磷酸酶水平比较见表2。

表2 各组大鼠血清钙、磷、镁、碱性磷酸酶水平比较

3 讨论

PICP是在原胶原形成过程中由内切酶从前胶原的羧基端切下的附加肽段，其血清水平主要反映Ⅰ型胶原合成速率及骨转换情况，其水平升高提示Ⅰ型胶原的合成速率加快，骨转换活跃。Tahtela等[4]的研究表明，在对绝经后妇女应用双磷酸盐治疗的监测过程中，PICP是最有效的监测指标。ICTP是Ⅰ型胶原分解过程中释放的惟一免疫性蛋白，与Ⅰ型胶原蛋白以1∶1的比例释放入血，由肾脏清除，反映骨吸收情况，在其他组织中含量很少，可特异地反映骨的病变[5]，也是目前国际上公认的代表骨吸收的生化指标[6]。碱性磷酸酶在以往常被用作评价骨代谢，但由于它是同工酶，血清中的碱性磷酸酶只有50%来源于骨组织，因此其对骨组织代谢的反映缺乏特异性和敏感性[7]。血清钙、镁、磷作为衡量骨矿化的常用指标，可以间接反映骨组织的代谢情况[8]。

该研究结果显示:枸杞多糖低、高剂量组血清PICP、ICTP水平均较模型组显著下降，且高剂量组下降更为显著，表明枸杞多糖可以有效降低骨质疏松大鼠骨胶原的代谢水平，抑制其骨代谢的高转换状态，从而对骨质疏松大鼠的骨代谢起调节作用。枸杞多糖低、高剂量组血清钙和镁水平的变化表明枸杞多糖同样可以影响骨质疏松大鼠血清钙、镁水平值，对骨的矿化过程也有一定的调节作用。

综上所述，枸杞多糖可以显著降低高转换型骨质疏松症的高代谢状态，从而对骨质疏松症具有一定的调节作用，为进一步研究枸杞多糖治疗骨质疏松症的作用机制提供了理论依据。

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