薛俊龙,张伟业,张国权,王国艳,刘一飞,刘 源,薛逸绯
(1.山西省农业科学院畜牧兽医研究所,山西太原 030032;2.山西大同大学,山西大同 037009)
新城疫(ND)是禽类的一种高接触性、烈性传染病,给许多国家的养禽业带来严重的经济损失。疫苗接种是防治该病的重要措施之一,但近年来,ND并未得到有效控制,新城疫的迅速蔓延,使疫苗免疫接种成为必然的选择。而呼吸道局部免疫只有直接接触外界抗原才能引起免疫应答,循环抗体则不能运转到气管、支气管、肺等部位,利用这一原理对控制新城疫有重要意义,在生产实践中证明应用弱毒苗滴鼻、点眼、气雾免疫能刺激黏膜免疫,使呼吸道、消化道黏膜有效抵抗外界新城疫病毒的侵袭。但是局部免疫对整体循环抗体的影响尚不明确。本研究通过局部接种两种新城疫活疫苗测定其ND抗体水平用以判定对血液循环抗体滴度的影响。
2.1 试验鸡
新城疫循环抗体处于较高水平的生产期商品蛋鸡,由稷山县某养殖户提供。
2.2 试验疫苗及标准抗原
鸡新城疫COL-30冻干苗、Lasota系冻干苗市场购买;标准新城疫抗原购自哈尔滨兽医研究所。
3.1 正处于盛产期的两群母鸡各60只,共120只,各平均分成3组,共6组,每组20只。试验1组,新城疫 Lasota系冻干苗4个剂量点眼免疫;试验2组,新城疫Lasota系冻干苗6个剂量点眼免疫;试验3组,新城疫COL-30冻干苗5个剂量点眼免疫;试验4组,COL-30冻干苗10个剂量点眼免疫,同时各种疫苗组相应的各设一对照组。(Lasota系冻干苗免疫组及对照组,免疫前的平均循环抗体为10.5 log2;COL-30冻干苗免疫组及对照组,免疫前的平均循环抗体为10.4 Log2)。
3.2 免疫后1~17天,每天收集每个试验组和对照组所产鸡蛋(不低于15枚),通过实验室对蛋黄的系列处理后作为抗体检测样本。
3.3 采用血球凝集抑制试验测定鸡蛋中ND抗体水平,各组数据求得的平均值,并对数据进行方差分析。
相同新城疫弱毒冻干疫苗,在不同的免疫剂量下,通过点眼免疫血液循环抗体的变化结果见下表和图。
4.1 新城疫 Lasota系冻干苗,不同剂量点眼免疫抗体检测结果见表1。
表1 Lasota系冻干苗不同的免疫剂量抗体检测结果(log2)
4.2 新城疫COL-30系冻干苗,不同剂量点眼免疫抗体检测结果见表2。
表2 Col-30冻干苗不同的免疫剂量抗体检测结果(log2)
从表1及表2的结果可以看出,不同剂量的新城疫弱毒疫苗通过点眼局部免疫后,在连续17天的循环抗体检测期间,每组的平均抗体滴度和不免疫的对照组一样,在一定的范围内(9.3 log2~10.9 log2)波动,即没有明显的规律性变化(图1、2);无论是Lasota还是COL-30弱毒苗,不同剂量的免疫抗体变化与同批的对照组抗体相比,差异均不显著(P>0.05);相同的疫苗不同的免疫剂量抗体效价相比,差异也不显著(P>0.05)。
新城疫免疫抗体组成包括循环抗体、局部抗体和细胞免疫。循环抗体是体液免疫最主要部分,存在于血清中,可由HI实验测定,作用是阻止病毒扩散,防治感染;细胞免疫,当用Ⅳ系或Ⅰ系紧急接种时,2~3天会起到作用[1]。在实际的疫苗预防过程中,临床上鸡新城疫野毒主要是通过呼吸道等途径感染易感鸡。疫苗的使用主要遵循弱毒冻干疫苗(如Lasota系列、克隆系列)局部免疫(如滴鼻、点眼、饮水),增强局部免疫力抵抗野毒的侵袭,新城疫I系疫苗、灭活疫苗(如佐剂灭活疫苗)通过注射接种,提高血液循环抗体,减少或消灭机体内的新城疫病毒。但近年来,临床上新城疫免疫鸡群中出现了非典型新城疫病症,尽管个别患病鸡群的血液循环抗体滴度大于9 log2也未幸免。究其原因,主要是忽视了疫苗的局部免疫接种,但在加强局部免疫的同时,局部免疫是否会对原有的血液循环抗体(特别是高抗体)产生不利的影响[2],鲜有研究文献提供数据支持,为此本试验则通过设计了新城疫循环抗体处于高位时,使用不同的弱毒冻干疫苗和不同的免疫剂量进行局部免疫接种,通过连续的抗体检
测,体现循环抗体的变化,最终结果表明,对原存的循环抗体滴度几乎没有影响,这将为新城疫弱毒疫苗预防接种程序的制定提供了可靠的理论依据。
[1]贾松涛,刘星,刘炜,等.不同免疫程序ND 抗体消长规律及免疫保护临界值的测定[J].中国动物检疫,2010,27(9):51-52.
[2]王俊卿,祝丽.非典型鸡新城疫的发病原因及其防制措施[J].中国动物检疫.2007,24(9):41.