血清学方法检测肌肉注射Rho(D)免疫球蛋白初探

蔡于旭(海南省血液中心，海南海口570311)

血清学方法检测肌肉注射Rho(D)免疫球蛋白初探

蔡于旭(海南省血液中心，海南海口570311)

血清学方法；Rho(D)免疫球蛋白；Rho(D)阴性

1 病例简介

孕妇丁某，29岁，ABO血型为O型，Rho(D)阴性，曾产一胎，于2009年3月10日来我中心检查血型抗体(孕第二胎，孕期20周)，孕妇血清未检出抗D抗体，2 d后行羊水穿刺检查唐氏综合征，为了避免产生Rho(D)抗体，穿刺24 h内注射1支Rho(D)免疫球蛋白(强生Rhogam，300 μg/1 500 IU)，1周后，抽取静脉血，检查血清抗D抗体。

2 血型血清学检查

2.1 样本孕妇注射Rho(D)免疫球蛋白前2 d EDTA抗凝全血3 ml，不抗凝全血10 ml；注射Rho(D)免疫球蛋白1周后不抗凝血10 ml。

2.2 试剂抗-A、抗-B试剂(20091222长春博德生物技术有限责任公司)；抗-D试剂(20090729上海血液生物医药有限责任公司、1905010 Biotest、BMC0702C Millipore)；ABO试剂红细胞(20105308上海血液生物医药有限责任公司)；谱红细胞(20105604上海血液生物医药有限责任公司)；抗IgG+C3d试剂(20090828上海血液生物医药有限责任公司)；乙醚(分析纯)。

2.3 方法均按照相关标准操作规程[1]进行。ABO血型鉴定用常规试管法检测；Rho(D)阴性确认用3种不同批号、不同厂家的抗-D试剂做抗球蛋白试验；血清和放散液抗体筛选鉴定选用抗球蛋白法检测(反应血清量增加为4滴)；抗体吸收放散试验：抗体吸收(5 ml血清+1 ml Rho(D)阳性洗涤压实红细胞，37℃水浴1 h)，抗体乙醚放散(1 ml洗涤的抗体吸收红细胞+1 ml盐水+2 ml乙醚，颠倒摇匀10 min，离心，取下层作抗体筛选鉴定)，取孕妇注射Rho(D)免疫球蛋白前2 d血清作同步对照实验。

3 结果

3.1 血型鉴定结果孕妇注射Rho(D)免疫球蛋白2 d血液血型鉴定为ABO血型为O型，Rho(D)确认阴性。

3.2 血型抗体筛选鉴定结果孕妇注射Rho(D)免疫球蛋白前2 d血清抗球蛋白法不规则抗筛选阴性(反应血清量增加为4滴)；孕妇注射Rho(D)免疫球蛋白1周后血清常规不规则抗筛选阴性(反应血清量为2滴)，当把血清量增加为4滴时，可检出抗-D特异性抗体；孕妇注射Rho(D)免疫球蛋白1周后血清与O型、Rho(D)阳性红细胞做抗体吸收放散试验，放散液可检出抗-D特异性抗体(孕妇注射Rho(D)免疫球蛋白前2 d血清同步对照实验未检出抗-D调抗体)。血型抗体鉴定结果见表1。

表1 孕妇血清及血清吸收放散液与谱红细胞反应格局

4 讨论

实验结果表明，孕妇丁某肌肉注射Rho(D)免疫球蛋白1周后，常规血清学方法未能检出血清中的抗-D抗体，当把血清量增加为4滴时，可检出抗-D抗体，血清抗体吸收放散试验也证实抗-D特异性抗体的存在，比对注射前血清抗体情况，可以确定检测到的抗-D特异性抗体为1周前注射的Rho(D)免疫球蛋白。

Rh(D)阴性妇女要避免Rho(D)不相合的血液输注以及流产、刮宫等引起的“经胎盘出血”产生的同种免疫[2]，而在“经胎盘出血”72 h内注射Rho(D)免疫球蛋白是避免发生同种免疫产生抗-D抗体的一种有效的方法[3]。肌肉注射Rho(D)免疫球蛋白后，通过增加反应血清量，血清学方法也可检出血清中注射的抗-D特异性抗体，为说明注射的有效性提供直接证据。因该抗D为被动免疫获得，半衰期短，所以，注射Rho(D)免疫球蛋白后血清中是否检测出抗D及抗体的量与抽样检测时间有很大关系。

[1]叶应妩,王毓三,申子瑜.血型血清学检查[M]//全国临床检验操作规程.3版.南京:东南大学出版社,2006:246-270.

[2]朱传福,王玫.Rh(D)阴性孕产妇IgG抗体检测分析[J].中国输血杂志,2006,19(2):128-129.

[3]黄飞.静脉注射Rho(D)免疫球蛋白可成功地防止Rh引起的同种免疫[J].国外医学输血及血液学分册,1999,22(4):276.

R446.11

A

1003—6350(2012)08—107—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2012.08.050

2011-10-10)

蔡于旭(1976—)，男，海南省海口市人，技师，学士。

注射Rho(D)免疫球蛋白是Rho(D)阴性血型产妇在生产、流产或羊水穿刺后避免产生Rho(D)抗体的有效手段，笔者尝试用常规血清学方法检测孕妇血清中注射的Rho(D)免疫球蛋白，探讨建立一种较为简单有效的协助诊断的检测方法。