Tiam1和CD44v6在宫颈癌中的表达及其相互关系研究

吕红梅 魏双梅

宫颈癌是全球妇女恶性肿瘤中最常见的疾病之一，故探讨宫颈癌发生、发展和转移的相关因素，已成为当今宫颈癌研究的热点[1]。本研究通过免疫组织化学方法检测宫颈正常组织、CIN组织及宫颈癌组织中CD44V6、Tiam1的表达，并分析两者与宫颈癌临床病理特征的关系，从而为临床治疗提供新的思路。

1 资料与方法

1.1 一般材料 收集佳木斯市妇幼保健院病理科2010～2011年间妇科手术切除，并经病理证实、资料完整的100例标本。其中宫颈癌57例、CIN28例及正常宫颈15例。全部病例手术前均未做任何治疗。57例宫颈癌中≥45岁者42例，＜45岁15例；鳞癌46例、腺癌11例；Ⅰ～Ⅱ期21例，Ⅲ～Ⅳ期36例；高中分化者34例、低分化者23例；其中27例伴有不同程度的淋巴结转移。

1.2 试剂和方法 采用链霉素-生物素免疫组织化学技术，主要试剂为兔抗人Tiam1多克隆抗体，鼠抗人Tiam1单克隆抗体、通用型超敏S-P试剂盒等。

1.3 免疫组化结果判定 细胞浆和（或）细胞膜呈棕黄色颗粒为Tiam1、CD44v6阳性细胞，无着色或与背景着色一致为阴性细胞。

1.4 统计学方法 各组间比较采用χ2检验及Fisher’s精确概率法检验；CD44v6及Tiam1相关性分析采用spearman等级相关检验，P<0.05差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 Tiam1及CD44v6在正常宫颈组、CIN组、宫颈癌组中的表达（表1） Tiam1及CD44v6在三组中的阳性表达率分别为6.67%、42.86%、77.19%及20%、46.43%、71.92%。在正常宫颈组与CIN组间Tiam1的阳性表达有统计学意义（P＜0.05），而CD44v6的表达无统计学意义（P＞0.05）；在正常宫颈组与宫颈癌组、CIN组与宫颈癌组间Tiam1及CD44v6的表达则均有统计学意义（P＜0.05）。

表1 Tiam1及CD44v6在正常宫颈组、CIN组、宫颈癌组中的表达

2.2 Tiam1及CD44v6在宫颈癌中的表达及与临床病理特征的关系（表2） Tiam1及CD44v6在宫颈癌的表达与患者年龄、组织学类型、临床分期无相关性(P>0.05)，与组织学分化程度及有无淋巴结转移密切相关（P＜0.05）。

2.3 宫颈癌组织中Tiam1与CD44v6表达间的相互关系 57例宫颈癌组织中Tiam1与CD44v6同时阳性表达者37例，同时阴性表达者9例，两者在宫颈癌中的表达呈正相关性（r=0.498，P<0.01）。

表2 Tiam1及CD44v6在宫颈癌组织中的表达及与肿瘤临床病理特征的关系

3 讨论

Tiam1是由荷兰癌症研究所Habets等采用前病毒插入致突变的原理，由BW5147小鼠T淋巴瘤细胞高侵袭变异株中分离鉴定出来的，是一种原癌基因[2]。作为Dbl家族成员之一，Tiam1有多个比较重要的结构区域，如DH功能区及2个PH功能区，这些功能区在肿瘤的侵袭、转移及信号传导方面具有重要的作用。它主要参与调节Rho类蛋白的活性，诱导肌动蛋白微丝在质膜上的聚集，实现调节细胞骨架结构重组，促进细胞运动和迁移，参与基因表达调控、细胞增殖与凋亡等生物学功能[3-5]。粘附分子CD44是单基因编码的糖蛋白家族，广泛地分布于细胞表面。人类CD44基因分为CD44s和CD44v。其中CD44v6是一类具有高度异质性的单链膜表面糖蛋白，它的高表达与人类许多恶性肿瘤，如乳腺癌、食管癌、胃癌等的发生、发展、侵袭和转移密切相关。

本实验结果表明，Tiam1与CD44v6在正常宫颈组织→CIN→宫颈癌组织，它们的表达是逐渐提高的，说明Tiam1与CD44v6基因表达的紊乱贯穿于整个过程，与宫颈癌的发生、发展密切相关；同时Tiam1与CD44v6在宫颈癌中的表达与患者年龄、组织学类型以及临床分期无关，而与肿瘤分化程度、有无淋巴结转移密切相关（P＜0.05），表明有淋巴结转移、分化差的癌细胞有更强的诱导Tiam1与CD44v6基因表达的能力，具有更强的浸润和转移能力。

本研究结果提示，宫颈癌组中Tiam1与CD44v6两者间有显著的正相关性，说明Tiam1与CD44v6在宫颈癌病理演变及侵袭转移过程中可能起协同作用或相互间存在正调控影响。现已证实Tiam1的PHn-CC-Ex有对CD44V特异的结合作用区，CD44通过与Tiam1的PHn-CC-Ex区结合，激活Tiam1催化的Racl信号，实现了CD44-Tiam1-Racl功能上的偶联。Tiam1基因表达产物还能促进异型细胞之间、细胞与基质之间的相互作用，与CD44共同促进细胞骨架重组，参与细胞伪足形成，介导肿瘤细胞的转移。

[1]蒋蓉.对宫颈癌患者的健康教育指导[J].当代医学，2011,17(25):114.

[2]Habets GG，Scholtes EH,Zuydgeest D,et a1.Identification of an invasion-inducing gene,Tiam-1,that encodes a protein with homology to GDP-GTP exchangers for Rho-like proteins [J].Cell,1994,77(4):537-549.

[3]Lambert JM,Lambert QT,Reuther GW,et al.CD44v6 mediates Ras activation of Rac by a PI(3)K-independent mechanism[J].Nat Cell Biol,2002,4(8):621-625.

[4]Kawauchi T,Chihama K,Nabeshima Y,et al.The in vivo roles of STEF/CD44v6,Rac1 and JNK in cortical neuronal migration[J].EMBO J,2003,22(16):4190-4201.

[5]Kunda P,Paglini G,Quiroga S,et al.Evidence for the involvement of CD44v6 in axon formation[J].J Neurosci,2001,21(7):2361-2372.