ACL TOP定量检测D-二聚体在肺部疾病诊断中的应用

张灼锦 陈育贤 翁梅超

广东省梅州市人民医院检验科，广东梅州 514031

D-二聚体存在于纤溶酶降解因子×IIIa交联的纤维蛋白一（XDP）可溶性产物中。纤溶酶是一种丝氨酸蛋白酶，当游离于抑制剂时，作用于不溶性交联纤维蛋白使产生一系列的可溶性降解物。它们的分子量决定于酶的消化程度。这些可溶性纤维蛋白降解产物中含有一种原始纤维蛋白原分子中，或者它的降解产物及可溶性纤维蛋白中没有的新抗原(D-二聚体片段[1])。测定D-二聚体成了一种诊断血栓和溶栓治疗监测所广泛应用的指标。在深静脉血栓(DVT)，肺栓塞(PE)，弥散性血管内凝血(DIC)等临床状态中发现D-二聚体的水平升高。在正常妊娠过程中D-二聚体的水平也会升高，但是如果非常高的话会伴随出现并发症。怀疑患有血栓病的患者进行D-二聚体测定阴性，低临床可能性，对于深静脉血栓(DVT)及肺栓塞(PE)有高阴性预测价值[2]，现对该院2010年3月—2012年3月期间收治的136例病例数据进行分析，并报道如下。

1 一般资料

1.1 对象

肺部疾病患者136例，常见症状如呼吸困难、咳嗽、胸痛、咯血等。

1.2 仪器

美国IL公司生产的ACL TOP全自动血凝仪。

1.3 试剂

①胶乳试剂：包被有鼠单克隆抗体（MA-8D3）的聚苯乙烯胶乳颗粒冻干悬浮液，与含有牛血清白蛋白、缓冲液，稳定剂和防腐剂的D-二聚体直接对比。②反应缓冲液：磷酸缓冲液，其中含有牛血清白蛋白，稳定剂和防腐剂。

2 方法

①免疫比浊法检测DD的原理：D-二聚体胶乳试剂是一种大小均一的聚苯乙烯胶乳颗粒悬浮液，这些胶乳颗粒上包被着对纤维蛋白降解产物D-二聚体具有高度特异性的单克隆抗体，当含有D-二聚体的血浆与D-聚体测定试剂盒中的胶乳试剂和试剂缓冲液混合时，包被的胶乳颗粒会产生凝集。凝集程度与样本中D-二聚体的浓度成正比，由于凝集而引起透射光减少，通过450 nm波长处记录其变化，从标准曲线上读出结果[3]。②抽取病人新鲜全血，用109mmol/L枸橼酸钠抗凝，3000 r/min离心10 min，取得乏血小板血浆，将离心好的标本放入仪器后自动进行检测，一般10 min内出结果。③当待测标本浓度＞1050 ng/mL，仪器自动进行稀释后作进一步检测，实验结果会自动乘以稀释倍数。④质量控制：IL公司提供的低值及高值质控品。⑤据有关文献报道，D-二聚体浓度<0.5 g/L基本可排除血栓形成[4]。因此，以D-二聚体检测值是否超出0.5 g/L分为两大类，并按病种进行归类，总结D-二聚体检测结果在肺部疾病诊断中的应用价值，特别观察其在肺栓塞中的意义。

3 结果

在试验中，总计136例患者（男78例，女56例）参加检测。患者平均年龄为58岁（范围为24～90岁）。所有患者中，46例患者(33.8%)的D-二聚体检测值<0.5 g/L，全部46例患者在住院期间无任何肺栓塞及深部静脉栓塞的症状，其阴性预期值为100%；90例患者血浆中的D-聚体检测值>0.5 g/Lng^nl，其中26例患者进行过螺旋CT扫描确诊，有11例患者被证实为肺栓塞，其阳性预期值为12.2%，ACL TOP免疫比浊法的敏感性为100%。见表1。

表1 136例肺部疾病患者的D-二聚体结果分析(n)

4 讨论

从该次实验结果可以看出，D-二聚体水平升高对肺栓塞并不是特异的，血浆中的D-二聚体水平由于呼吸系统多种疾病而升高，尤其是慢性阻塞性肺镝(COPD)、呼吸衰竭和多种呼吸系统合并症。因此,D-二聚体检测的阴性结果在肺部疾病中的应用价值大于其阳性结果。

因为肺栓塞病临床症状不明显，与支气管炎、心绞痛、胸膜炎、冠心病和肺炎等极为相似，所以容易造成误诊和漏诊，如果不能及时确诊，致命性栓塞可在1～2 h内导致患者死亡，对该病应给予足够的重视，只要治疗及时，大多数患者可以完全康复，所以快速准确的诊断显得尤其重要。最新研究表明，螺旋CT扫描结果阴性能够有效地排除可疑病人的肺栓塞诊断，可以作为肺栓塞影像检查新的金标准[4]。但其价格高，技术性强，较适于对高度可疑的病人做确诊检查。如果使用ACL TOP免疫比浊法快速定量检测D-二聚体作为筛选试验，实验意义在于阴性结果可100%排除肺栓塞，阳性结果可包括为肺栓塞在内的多种疾病。因为ACL TOP免疫比浊法定量检测D-二聚体可实行全自动操作，具有准确、快速、简便的特点，适合门急诊检测，可以把它作为排除诊断肺栓塞的首选筛选试验，值得在临床推广应用。

[1]Gaffney PJ,et al.Monoclonal antibodies to crosslinked fibrin degradation products(XL-FDP)1[J].Characterization and preliminary evaluation in plasma,British Jourmal of Haematology,1988，68:83-90.

[2]郭雪梅，王鸿利.快速D-二聚体在诊断静脉血栓形成中的应用进展[J].中国实验诊断学，2000（4）:41-43.

[3]RC Gosseoin,Owings J T,JacobyRC,et al.Evaluation of a new automated quantitative D-Dimer,Advanced D-Dimer in patients suspected o fvenousthromboembolism [J].Blood Coagulation and Fibrinolysis,2002，113:323-330.

[4]Quiroz R,Kucher N,Zou KH,et al.Clinical validity of a negative computed tomography scan in patients with suspected pulmonary embolism:asystematic review[J].JAMA,2005,293:2012-2017.