rb-bFGF联合微量激素对糖尿病性干眼眼表修复及TNF-α表达的影响

武海军

任何原因引起的泪液质量改变或者动力学异常，导致眼表泪膜稳定性降低，并伴有眼部不适，进而引起以眼表组织病变为特征的多种疾病总称为干眼〔1〕。眼表结构或功能改变与干眼的发生发展有密切联系。研究发现，干眼在糖尿病患者中也有较高的发病率〔2〕，尽管与其相关的发病因素众多，关系复杂，但控制眼表炎症、修复眼表结构以及改善患者自觉症状，仍然是治疗的根本措施。为此，我们应用重组牛碱性成纤维细胞生长因子 （recombinant bovine basic fibroblast growth factor，rb-bFGF）联合微量激素对45例糖尿病性干眼患者进行治疗，同时观察患者眼表状态以及泪液中肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）表达的变化，希望为此类疗法提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料

2010年11月—2011年8月在门诊或者在我院内分泌科住院会诊的糖尿病干眼患者45例90只眼。男性患者23人，女性患者22人；年龄54～70岁，平均年龄61岁。入选标准：（1）糖尿病病史≥5年；近2个月内无急性结膜炎、角膜炎、青光眼病史，无眼表挫伤及手术史，无其它全身免疫或代谢性疾病；（2）双眼具有明显的干眼症状〔3〕；（3）Schirmer I 试验＜10 mm/5 min；（4）泪膜破裂时间（tear break-up time，BUT）＜10 s。

1.2 药品

（1）微量激素滴眼液配制：用1 ml注射器抽取0.1 ml地塞米松注射液（5 mg/ml），用无菌注射用水稀释至1 ml，轻混匀，取0.1 ml加入至5 ml的聚乙二醇滴眼液中，4℃冰箱保存。

（2）rb-bFGF滴眼液，由珠海亿胜生物制药有限公司提供。

1.3 治疗方法

治疗前1周停止使用治疗干眼的所有滴眼液及眼膏，然后予微量激素滴眼液，每日3次，每次1滴；rb-bFGF滴眼液，每日4~6次，rb-bFGF眼膏，每晚1次。治疗2周。

1.4 观察指标

1.4.1 干眼症状及眼压：随诊了解患者干眼症状变化，并监测眼压情况。

1.4.2 SchirmerⅠ试验及泪膜破裂时间（tear breakup time，BUT）：治疗前后进行Schirmer I试验及BUT检查，记录数据。

1.4.3 泪液TNF-α检测：在同一时间段由同一人采集受检者泪液，稀释保存至消毒后的EP管中，-20℃保存备用。使用ELISA法测定泪液TNF-α浓度，于酶标仪450 nm波长处测定光密度值，然后根据标准曲线得出相应的浓度值（pg/ml）。

1.5 统计学方法

采用SPSS 17.0统计软件，应用 t检验，以 P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 干眼症状及眼压

治疗后所有患者的干眼症状均较治疗前明显改善，特别是异物感、干涩感及烧灼感有明显减轻；未发现有眼压异常者。

2.2 SchirmerⅠ试验

治疗后患者的泪液分泌量增加，与治疗前比较差异有统计学意义（t=23.968，P=0.000 0）（表 1）。

2.3 BUT

治疗2周后，所有患者的BUT均得到不同程度的延长，接近正常水平，与治疗前比较差异有统计学意义（t=26.243，P=0.000 0）（表 1）。

2.4 泪液TNF-α浓度

治疗前患者泪液TNF-α浓度较高，治疗2周后有明显下降，前后差异有统计学意义（t=42.930，P=0.000 0）（表 1）。

表1 45例糖尿病干眼患者rb-bFGF联合微量激素治疗前后的各指标结果（±s）

表1 45例糖尿病干眼患者rb-bFGF联合微量激素治疗前后的各指标结果（±s）

注：治疗前后比较，①t=26.243，P=0.000 0；②t=23.968，P=0.000 0；③t=42.930，P=0.000 0

时间 眼数/只 BUT/s SchirmerⅠ 试验/mm 泪液TNF-α浓度/（×102pg/ml）治疗前 90 5.533 3±1.029 8 5.989 9±0.771 6 9.801 6±0.763 2治疗后 90 9.890 1±1.106 2① 9.644 4±1.164 1② 5.744 9±0.507 9③

3 讨论

任何原因引起的眼表破坏及泪膜稳定性降低都可能导致干眼的发生，相关的致病因素很多，包括免疫性炎症反应、细胞的凋亡、性激素水平的降低等，具体机制复杂，其中炎症被认为是干眼发病机制中的关键性因素〔4〕。糖尿病干眼属于干眼的一种，除了上述因素外，还可能与长期高糖状态引起的角膜知觉减退有关〔5〕，后者可造成流泪反射敏感性降低，使泪液分泌减少。目前对该病的发病机制仍不十分清楚，推测众多，但泪膜的稳定性下降是不争的事实。本文对45例糖尿病干眼患者的泪膜破裂时间、泪液分泌及泪液TNF-α含量进行了检测，结果显示，所观察患者治疗前的泪膜破裂时间缩短，泪液分泌减少，泪液中可检测到TNF-α，并有较高的浓度。

TNF-α是一种重要的致炎因子，来源于单核巨噬细胞，不但有着广泛的生物活性并且可与中性粒细胞相互作用，进而促进多种促炎因子的生成（如诱导炎性细胞产生白细胞介素1），加速炎症的发展，诱导活性氧自由基和致炎性酶分子的产生与激活〔6〕。以往的研究表明，正常人的泪液中没有TNF-α的表达〔7〕，本研究结果显示糖尿病干眼患者的泪液中有高表达的TNF-α，说明致炎因子TNF在糖尿病性干眼的发生发展中发挥了重要的作用。但是这种炎症反应为非感染性炎症，应用抗生素无效，一味地应用抗生素滴眼液有可能因为抗生素本身及其滴眼液所含防腐剂的毒性作用加重眼表损害，进而加重干眼症状。

鉴于糖尿病干眼的眼表状况及泪液中TNF-α的高表达，我们使用rb-bFGF及微量激素点眼治疗。rb-bFGF对来源于中胚层和外胚层的组织具有促进修复和再生的作用，能与角膜上皮细胞、角膜内皮细胞和基质细胞特异性结合，激发细胞主动修复功能，促进角膜细胞的分裂增殖、移行和分化，加速角膜损伤愈合并改善角膜愈合质量。局部使用微量激素是受到叶锌铭等〔8〕学者的启发，予0.001%的地塞米松联合聚乙二醇滴眼液点眼，既可抑制相关的炎性因子，消除非感染性的炎性反应，又避免了激素的副作用。因为根据以往的研究，使用浓度为0.001%的地塞米松，不但对角膜没有损伤，反而会加速角膜上皮的修复。并且，聚乙二醇滴眼液是一种人工泪液，具有较好的亲水性和成膜性，能有效缓解眼部不适，还有助于其中的微量激素更好地发挥抗炎作用。

本研究结果显示了该疗法的良好效果，治疗2周后患者的自觉症状基本消除，泪膜破裂时间延长，泪液分泌增加，泪液TNF-α表达也得到了有效地抑制，与治疗前有明显差异（P＜0.05）。治疗过程中我们对患者的眼压情况进行了监测，未发现眼压异常者，这可能与患者应用激素时间较短，以及激素的含量极低有关。至于微量激素长期应用对眼压的影响，还需要做进一步地研究，目前我们已建立了微量激素对眼压影响的课题并进行了初步观察。

综上所述，微量激素联合rb-bFGF可以有效缓解干眼症状，抑制TNF-α的表达，修复眼表，维护泪膜的稳定性。因为含有激素，还是以短期应用为宜，并要注意患者的眼压变化。至于糖尿病性干眼的发病机制，以及针对糖尿病干眼的有效治疗方法，仍需进一步地研究。

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