硝唑尼特混悬液对鸡柔嫩艾美尔球虫病治疗效果研究

王英俊，郝智慧，2，邱 梅，沈 巍

(1.青岛康地恩药业股份有限公司，山东青岛 266061;2.青岛农业大学化学与药学院，山东青岛 266111)

鸡球虫病是由艾美耳科艾美耳属的球虫寄生于鸡肠上皮细胞内所引起的一种危害极为严重的一种流行性寄生虫病。该病分布广泛，发生普遍，危害十分严重，在病初无明显症状，当观察到症状，如死亡、拉血便时一般已到了晚期，其发病率30% ～100%，死亡率 20% ～ 80%，甚至更高［1－2］，严重威胁着养鸡业的发展。目前市场上抗球虫药物的过量使用使其产生耐药性，严重制约了其在防治球虫病方面的应用，开发新的球虫药势在必行。硝唑尼特(nitazoxanide，NTZ)是一种硝噻柳酸酰胺的衍生物，由Romark实验室于1976年首次报道作为一种新型抗寄生虫药物［3］。它具有广谱、耐受性好、安全剂量高、毒副作用低等优点，而且还具有抗细菌、抗病毒活性［4］。董靖等［5］以往报道硝唑尼特主要是用在抗原虫和蠕虫等方面，在抗球虫方面少有报道。为了能将硝唑尼特混悬液开发为新的抗球虫药，并检验其对肉仔鸡球虫病的治疗效果，进行了以下试验。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂 试验药物:硝唑尼特混悬液，含量5%，生产批号:20110413，康地恩药业有限公司产品。对照药物:癸氧喹酯溶液(含量3%，生产批号20110323)、妥曲珠利溶液(含量5%，生产批号20110112)，均为菏泽普恩药业有限公司产品。饱和生理盐水为实验室自制。

1.2 试验虫卵 鸡柔嫩艾美尔球虫卵囊由国家动物用保健品工程技术研究中心提供。

1.3 试验动物 1日龄AA肉鸡，购于青岛正大种鸡场，出壳后立即运回实验室，全程在经火焰消毒的无球虫环境内饲养，饲喂无抗球虫药的全价饲料，自由采食和饮水，24 h光照。饲养至14日龄经粪检无球虫后用于试验。

1.4 试验设计 选用210只14日龄健康AA肉鸡，逐只称重后随机分为7组，每组30只(表1)。将含重铬酸钾溶液的卵囊，离心洗涤去除重铬酸钾，调整至7×104/mL孢子化卵囊，经嗉囊灌胃感染，每只鸡感染7×104个孢子化柔嫩艾美尔球虫卵囊。试验期间，每天观察记录鸡的精神状态、食欲、饮水、排粪、发病鸡和死亡数。死亡鸡称重后剖检，以确定病死鸡是否死于球虫病。感染当天为第1天，感染后第4天开始检查粪便，每天记录各组血粪堆数(仅有血丝不算)。第5天开始收集每组的粪便，检查每组鸡排出的卵囊总数，直至第8天剖杀为止。第8天将所有剩余试验鸡扑杀、称重、剖检。观察盲肠病变，取盲肠内容物，计算盲肠内的卵囊数。

表1 试验分组及处理方法

1.5 检测指标

1.5.1 相对增重率 相对增重率(%)=(感染用药组或感染不用药组平均增重/不感染不用药组平均增重)×100%。不感染不用药组鸡的相对增重率为100%。

1.5.2 存活率 存活率(%)=(组内存活鸡数/组内总鸡数)×100%。

1.5.3 血便记分 参照Morehouse和Baron［6］的方法，对各组鸡的粪便进行评定记分。

1.5.4 盲肠病变记分 参照 Johnson和 Reid［7］的标准对盲肠病变进行评定记分，病变值=每组平均病变记分×10。

1.5.5 卵囊值 参照角田清［8］介绍的方法进行。

1.5.6 抗球虫指数(ACI)ACI=(相对增重率+存活率)－(病变值+卵囊值)［9］。判断标准:ACI在180以上为高效，160～180为中效，160～120为低效，120以下为无效。

1.5.7 数据分析 试验结果采用 SPSS13.0统计分析，采用邓肯氏(Duncan)法进行差异显著性检验［10］。

2 结果

2.1 攻虫后临床症状及剖检病变 试验鸡攻虫3 d后主要表现为精神沉郁，反应迟钝，羽毛蓬乱，无光泽，双翅下垂，闭目缩颈，拥挤;4 d后部分雏鸡排出血样粪便，或暗红色、西红柿样粪便，饮食废绝，体质消瘦，全身贫血，冠、肉囊、皮肤颜色苍白。健康对照组临床观察状况良好，粪便正常，剖检正常。

剖检攻虫病死鸡，胸肌、腿肌发白，心肝正常，肠道发白，肠壁增厚，盲肠肿胀2～3倍，呈暗红色，充满大量血液，盲肠内集有大量血液、血凝块，盲肠壁增厚。

2.2 治疗试验结果 各试验组的存活率、相对增重率、病变值、卵囊值、粪便记分、抗球虫指数各项指标见表2。在表2中分别对不同组之间的存活率、相对增重率和抗球虫指数等三项主要指标进行了差异显著性检验。

表2 治疗试验结果

从表2可以看出，硝唑尼特混悬液高、中剂量组的相对增重率与癸氧喹酯溶液组和妥曲珠利溶液组相比差异不显著(P＞0.05)，与低剂量组相比差异显著(P＜0.05)，与空白对照组相比差异显著(P ＜0.05)。

存活率统计结果显示，硝唑尼特混悬液高、中剂量组与低剂量组相比差异显著(P＜0.05)，与癸氧喹酯溶液组差异显著(P＜0.05)，与妥曲珠利溶液组差异不显著(P＞0.05)。空白对照组与癸氧喹酯溶液组相比差异不显著(P＞0.05)。

硝唑尼特高、中剂量组的抗球虫指数分别为168.3和 163.6，极显著高于低剂量组(ACI为137.9)和不给药组(P＜0.01)，与癸氧喹酯相比差异显著(P ＜0.05)，与妥曲珠利相比差异不显著(P ＞0.05)。

与阳性对照组比较，药物添加后各用药组仍出现血便，但是除硝唑尼特低剂量组外，其余组与感染不给药组的比较，血便记分有所降低。

3 讨论

从治疗试验结果可以看出，硝唑尼特混悬液的中、高剂量组在抗球虫指数、存活率及增重率方面差异不显著，且都表现出优秀的抗球虫效果，从抗球虫指数上看属于中效抗球虫药，此结果与张西臣等［11］的报道基本相同。

三种药物均对鸡球虫病有治疗效果，能有效减轻球虫病对鸡的损害。硝唑尼特混悬液高、中剂量组的相对增重率明显高于感染不给药对照组，与癸氧喹酯组和妥曲珠利组相比差异不显著(P＞0.05)。从抗球虫指数上看，硝唑尼特混悬液属于中效抗球虫药，若采用合理的给药时间和给药剂量，可以降低鸡球虫病对雏鸡生长性能的负面影响，有效的抑制卵囊的排出，可以避免造成球虫卵囊的循环感染，同时球虫又是自身限制性疾病，从而可以在未使用该药的鸡场中利用该药达到净化球虫的目的。

综上所述，硝唑尼特混悬液对鸡柔嫩艾美耳球虫病具有一定的治疗效果，硝唑尼特中剂量组属中效抗球虫药，按360 mg/kg剂量给药可以达到与妥曲珠利推荐剂量相同的效果，有望开发为新的抗球虫药物。

［1］宁长申，张龙现，菅复春，等.中药防治人工感染鸡柔嫩艾美尔球虫病药效试验［J］.中兽医医药杂志，2006，25(3):31－33.

［2］王 星，陈 庄，覃宗华，等.中药“艾球康”煎剂防治鸡柔嫩艾美耳球虫病药效试验［J］.中国兽医寄生虫病，2007，15(5):15－17.

［3］张可煜，王国友，薛飞群.抗寄生虫新药硝唑尼特研究进展［J］.兽医导刊，2007(12):30231.

［4］Rao R U，Huang Y F，Fischer K，et al.Brugia malayi:Effects of nitazoxanide and tizoxanide on adult worms and microfilariae of filarial nematodes［J］.Exp Parasitol，2008，121(1):38245.

［5］董 靖，邓旭明，邓彦宏.抗寄生虫新药硝唑尼特研究进展［J］.中国兽医杂志，2010，44(5):51 －53.

［6］Morehouse N F，Baron R R.Coccidiosis evaluation of coccidiostats of mortality，weight gains and fecal scores［J］.Experimental Parasitology，1970，28(1):25 －29.

［7］Johnson J，Reid W M.Anticoccidia drugs:Lesion scoring techniques in battery and floorpan experiment［J］.Exp Parasitol，1970，28:30－36.

［8］角田清.鸡球虫病［M］.陈 宜，明如镜，译.上海:上海科技出版社，1986:91.

［9］杨茂生.几种抗球虫药对鸡球虫病的防治效果试验［J］.中国兽医科技，2001，31(12):47 －49.

［10］谭荣波，梅晓仁.SPSS统计分析实用教程［M］.北京:科学出版社，2007.

［11］张西臣，李建华，宫鹏涛，等.硝唑尼特在制备抗艾美耳球虫药物中的用途:中国，CN101574342［P］.2009 －11－11.