高效液相色谱法测定盐酸林可霉素预混剂中林可霉素的含量

朱曦　刘引兰　董文婷

摘要:兽药盐酸林可霉素预混剂含量测定收载于《进口兽药质量标准》1999年版,是采用生物效价管碟法测定,该方法操作步骤复杂,影响因素多,检测时间长。参考《中国兽药典》2010年版收载的盐酸林可霉素检测方法,利用HPLC法进行检测,使用C18色谱柱,柱温(30±5)℃,以0.05mol/L硼砂溶液∶甲醇(1∶1)为流动相,检测波长为214nm。林可霉素峰与林可霉素B峰分离良好,林可霉素峰与相邻杂质峰的分离度符合要求,变异系数(RSD)小于1.5%。结果表明通过高效液相色谱法(HPLC)能快速准确地测定兽药盐酸林可霉素预混剂中林可霉素的含量。

关键词:高效液相色谱;盐酸林可霉素预混剂;含量测定

中图分类号:S859.79+6文献标识码:B文章编号:1007-273X(2012)10-0004-02

盐酸林可霉素(Lincomycin Hydrochloride)又称洁霉素,化学式C18H34N2O6S,为林可胺类药物,属窄谱抗生素。作用机理为抑制细菌细胞蛋白质的合成,有较好的抗革兰氏阳性菌作用,特别是对葡萄球菌、溶血性链球菌和肺炎链球菌有较强的抑制作用,但其作用效果不及青霉素类和头孢类[1]。临床主要用于敏感菌引起的各种感染,如呼吸系统、免疫系统、皮肤及泌尿系统等组织的感染。用作饲料添加剂时可促进肉鸡和育肥猪生长,提高其饲料利用率。随着兽药行业的发展,其监督制度日益完善,为了适应兽药生产单位质量自控与监督检验机构逐渐增加的监督检验任务的需要,本试验利用高效液相色谱(HPLC)检测原理,建立了快速、准确的用高效液相色谱(HPLC)法测定兽药盐酸林可霉素预混剂中林可霉素含量的方法。

1材料与方法

1.1主要仪器与试剂

2结果

2.1适应性试验结果

适应性试验结果表明林可霉素与林可霉素B两峰完全分离,相邻之间的分离度为4.35(表1)。色谱峰峰形较好,两峰系统适应性良好(图1)。积分基线在同一水平,表明其积分稳定,样品主峰保留时间与标准品主峰保留时间一致,说明所测物质相同。由于样品是预混剂,物质成分复杂,杂质峰容易影响主物质峰,此方法中样品主峰与杂质峰分离较好(图2)。空白溶液中主峰出峰时间无杂质峰和溶剂峰,表明流动相及溶剂对本方法无干扰。

3结论

本试验建立了高效液相色谱(HPLC)法测定兽药盐酸林可霉素预混剂中林可霉素的含量。试验结果表明,样品溶液与对照品溶液出峰时间一致,积分稳定,林可霉素峰与林可霉素B峰分离度达到规定要求,与杂质峰完全分离,系统稳定性好。该方法测出样品峰面积的对数与浓度呈良好的线性关系,平均回收率为97.9%,相对标准偏差(RSD)为1.0%。采用本法检测与国内现行的《进口兽药质量标准》所采用的抗生素微生物测定法(生物效价法)相比,检测结果相对一致,且本法具有快速、简便、准确、稳定性和重现性好、能够批量检验等优点。适用于实际生产、质量监督等过程中对盐酸林可霉素预混剂中林可霉素含量的测定,为该产品的质量控制与分析提供了有力的技术保障。

参考文献:

[1]中国兽药典委员会.兽药使用指南化学药品卷[S].北京:中国农业出版社,2005.

[2]中华人民共和国农业部.进口兽药质量标准[S].北京:中国农业出版社,1999.

[3]中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典[S].北京:中国农业出版社,2010.