广泛耐药结核病快速检测方法的探讨

江西省武宁县人民医院（332300）余勤慧 兰兰

肺结核是严重危害人类健康的传染病，是全球关注的公共卫生和社会问题。随着卡介苗和抗结核病化疗药物的发明，结核病发病率有所减少，但由于大量耐药菌株的出现和结核分枝杆菌与HIV的合并感染，结核病又有上升趋势。广泛耐药结核病（XDR-TB）是指患者所感染的结核分支杆菌除同时对异烟肼、利福平耐受外，还对二线抗结核注射药物（卷曲霉素、卡拉霉素、阿米卡星）中的至少一种耐受。近年来开发出多种耐药结核病的快速诊断方法，指导临床用药和流行病调查有重要意义。

1 临床资料与方法

1.1 临床资料 本院2005年3月～2006年5月住院肺结核患者100例，多为复治病人，痰菌涂片阳性。

1.2 实验方法 将受检者痰标本转移到无菌玻璃瓶中，根据痰标本粘稠度加入2～5倍标本体积的2%NaOH溶液，用小玻璃棒仔细搅拌，处理20min后各取0.15mL处理液，分别接种对照斜面、PNB琼脂培养斜面和各含药斜面，置36℃温箱培养。

2 结果分析

2.1 痰结核菌分离培养与菌型鉴定 100例痰涂片阳性标本，抗酸杆菌培养阳性63例。痰结核菌经匡氏PNB琼脂培养基直接分型鉴定，并结合其生长物菌落形态与特征，判定为结核菌分支杆菌生长物56例，结核分支杆菌与非结核分支杆菌混合生长物5例；非结核分支杆菌生长物3例。

2.2 匡氏双相琼脂培基痰菌直接药敏试验临床痰结核生长物对二线抗痨药物氧氟沙星的耐药率高达90%，且显著高于其余3种二线抗痨药物的耐药率（P＜0.01）。

2.3 临床XDR-TB快速检测 55例结核生长物中共检到9例XDR-TB，XDR-TB发生率为16.4%。报告药敏实验结果时间分别为：直接试验第16天4例，第21天4例，第28天1例；匡氏双相琼脂痰菌直接药敏试验法临床XDR-TB平均检出时间为19.6天。

3 讨论

因结核分支杆菌生长十分缓慢，分离培养平均需要3周以上，药物敏感试验需要3～4周，MDR-TB的鉴定时间将在2个月以上。本实验室采用匡氏PNB琼脂直接分型鉴定技术，临床检出XDR-TB平均检出时间为19.6天。MDR-TB为16.6天。由于该技术不需要结核菌纯培养物，这快于目前已见于报道的其他快速药敏试验方法[1]，且不存在假阳性和假阴性，为XDR-TB传染源的快速鉴定提供了可靠手段。

总之，XDR-TB的控制是一件长期的艰苦工作，需要全球范围的合作与支持[2]，因此，要不断更新诊断工具和诊断方法，及临床应用新药新疫苗。