参黄散对腹部术后小鼠小肠动力障碍的影响

张 琪，魏 星，张 杰，裘华森

参黄散对腹部术后小鼠小肠动力障碍的影响

张 琪1，魏 星1，张 杰2，裘华森1

目的：探讨参黄散对小鼠腹部术后小肠动力障碍的治疗效果。方法：取90只健康雄性ICR小鼠，随机分模型组、参黄散组和假手术组，每组再随机分为2、4、6 h组，每组10只。模型组和参黄散组小鼠制备成小肠动力障碍模型，假手术组仅行剖腹探查术。造模成功后30 min，治疗组予以参黄散敷脐治疗，假手术组和模型组予以等体积量细沙包敷脐。在2、4、6 h点检测血清胃动素和生长抑素水平及墨汁推进率。结果：参黄散组在6 h点墨汁推进率明显高于模型组（P＜0.05），血清胃动素和生长抑素水平在2 h和4 h点明显高于假手术组和模型组（P＜0.05）。结论：参黄散敷脐能改善腹部术后小鼠小肠动力障碍。

参黄散;小鼠;腹部手术;小肠动力障碍;胃肠激素

手术后小肠动力障碍（intestinal motility disorder，IMD）是腹部手术后常见但目前尚无法避免的临床难题。我们采用参黄散敷脐对小鼠腹部术后IMD进行治疗，观察墨汁推进率，血清胃动素(motilin,MOT)及生长抑素(somatostatin,SS)含量。

1 材料与方法

1.1 动物 健康SPF级ICR小鼠90只，体质量20～25 g，雄性，浙江中医药大学动物实验中心提供。合格证编号：SCXK（浙）2009-0002。

1.2 药物与试剂

1.2.1 参黄散 根据徐志瑛[1]对术后小肠功能恢复治疗经验及辨证论治的原则，对术后早期最为常见的气滞血瘀型IMD制定，由人参、丹参、大黄、枳实、厚朴、丁香、吴茱萸等药组成，属纯中药制剂。由浙江省中医院制剂室制作提供。

1.2.2 透皮剂 从复方参黄散中提取，采用微量胡椒粉辅助。用法用量：使用药包或细沙包前，用一次性注射器取3～4滴液体滴入药包或细沙包，充分浸透均匀后，帖敷于小鼠腹部。由浙江省中医院制剂室制作提供。

1.2.3 MOT试剂盒、SS试剂盒 购自南京建成生物工程研究所。MOT试剂盒生产批号为20091130，SS试剂盒生产批号为20091205。1.3 方法

1.3.1 动物分组 取90只SPF级雄性ICR小鼠，通过随机数字表法，随机分为模型组、参黄散治疗组和假手术组，每组30只。各组再随机分为2、4、6 h组，每组10只。

1.3.2 动物模型制备[2]术前24 h各组小鼠禁食，自由饮水，在无菌操作下，取腹部正中切口打开腹腔，将小肠翻向左侧，置于生理盐水浸湿的纱布上，用生理盐水浸湿的捋肠器沿小肠的长轴自十二指肠直至回盲部推挤，模拟临床上常见的全小肠探查操作。假手术组仅行开腹翻肠不行推挤操作。然后将小肠按顺序还纳，关闭腹腔。模型组和治疗组小鼠手术过程均在10 min左右完成，手术时间没有统计学差异。

1.3.3 药物敷脐治疗 造模成功后30 min，取参黄散药包，滴上数滴透皮剂直至药包湿透，用纸胶环绕式以脐为中心将其固定于治疗组小鼠腹部。假手术组和模型组用细沙包代替，余相同。每隔2 h换1次药包或细沙包。

1.3.4 墨汁灌胃 各组小鼠到各自治疗的时间点后，用灌胃针给予墨汁灌胃（0.5 mL/只）。

1.3.5 观察指标及检测方法 血清中MOT、SS含量：灌胃后30 min，行摘眼球采血1 mL，置于含30 μL 10%EDTA二钠的1.5 mL离心管中混匀，4℃下在离心机中离心15 min（3500 r/min），用微量移液器取血清置于另一1.5 mL离心管中，置于-20℃冰箱保存。用ELISA法测血清中MOT、SS含量。

小肠墨汁推进率测定：灌胃后30 min脱颈处死。打开腹腔分离肠系膜，剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管，置于托盘上，轻轻将小肠拉成直线。测量肠管长度为“小肠总长度”，从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”。计算墨汁推进率[2，3]：墨汁推进率(%)=墨汁推进长度(cm)/小肠总长度(cm)×100%。

1.4 统计学分析 数据整理后录入SPSS 16.0，计量资料结果用样本均数±标准差(±s)表示，多个样本均数比较采用ONEWAY ANOVA程序进行单因素方差分析 (若方差齐性，采用最小显著差异LSD法。若方差不齐，则采用Tsmhane’s T2法)。P＜0.05表示差异具有显著性。

2 结果

2.1 墨汁推进率 模型组墨汁推进率在2 h、4 h、6 h时间点明显低于假手术组（P＜0.01）。生黄散组2 h、4 h时间点明显低于假手术组（P＜0.01，P＜0.05），6 h点两组间相比无明显差异（P＞0.05）。治疗组6 h点明显高于模型组（P＜0.05），其余时间点两组间相比无明显差异（P＞0.05）。治疗组的墨汁推进率随着时间的延长而增加，2 h与6 h相比差异有显著性意义（P＜0.01）。见表 1。

表1 各组小鼠术后30 min墨汁推进率的比较(±s，%，n=10)

表1 各组小鼠术后30 min墨汁推进率的比较(±s，%，n=10)

注：与假手术组比较，aP＜0.05，aaP＜0.01；与模型组比较，bP＜0.05；治疗组2 h与6 h相比，cP＜0.01

2 h 4 h 6 h假手术组30.63±8.401 32.01±9.784 32.57±10.209模型组19.56±6.219aa 18.66±5.789aa 19.15±8.548aa治疗组18.48±7.874aa 22.92±3.588a 28.18±6.400b、c

2.2 血清MOT 血清MOT含量,模型组2 h点明显低于假手术组（P＜0.05），其余时间点两组间相比无明显差异（P＞0.05）。治疗组在2 h和4 h点明显高于假手术组（P＜0.05,P＜0.01），6 h点两组间相比无明显差异（P＞0.05）。治疗组在2 h和4 h点明显高于模型组（P＜0.01,P＜0.05），6 h点两组间相比无明显差异（P＞0.05）。治疗组血清MOT含量随着时间的延长而降低，2 h与6 h相比差异有显著性意义（P＜0.05）。见表2。

2.3 血清SS 血清SS含量,模型组在2 h、4 h、6 h时间点与假手术组相比无明显差异（P＞0.05）。治疗组2 h和4 h点明显高于假手术组（P＜0.01），6 h点两组间相比无明显差异（P＞0.05）。治疗组在2 h和4 h点明显高于模型组（P＜0.01,P＜0.05），6 h点两组间相比无明显差异（P＞0.05）。治疗组的血清SS含量随着时间的延长而下降，2 h与6 h相比差异有显著性意义（P＜0.01）。见表3。

表2 各组小鼠手术后30 min后血清胃动素的比较(pg/mL,±s,n=10)

表2 各组小鼠手术后30 min后血清胃动素的比较(pg/mL,±s,n=10)

注：与假手术组比较，aP＜0.05，aaP＜0.01；与模型组比较，bP＜0.05，bbP＜0.01；治疗组2 h与6 h相比，cP＜0.05

2 h 4 h 6 h假手术组239.50±68.417 83 194.00±53.622 13 267.00±62.872 89模型组156.83±10.303 72a 215.50±55.597 66 206.50±29.797 65治疗组325.00±43.464 93a、bb 295.50±89.710 09aa、b 243.50±79.764 03c

表3 各组小鼠手术后30 min后血清生长抑素的比较(mIU/mL,±s,n=10)

表3 各组小鼠手术后30 min后血清生长抑素的比较(mIU/mL,±s,n=10)

注：与假手术组比较，aP＜0.01；与模型组比较，bP＜0.05，bbP＜0.01；治疗组2 h与6 h相比，cP＜0.01

2 h 4 h 6 h假手术组14.535 5±4.231 17 12.394 4±3.019 15 15.768 5±1.945 84模型组10.054 7±0.904 05 14.611 6±3.882 86 15.179 0±1.629 65治疗组21.111 0±3.816 53a、bb 19.137 5±6.401 21a、b 14.273 6±2.859 91c

3 讨论

手术后IMD是腹部术后常见的并发症，导致住院时间延长和医疗费用增加[4]。随着快速康复外科的开展，多数学者已认识到，术后IMD是影响患者术后康复的核心环节，早期干预尤为重要[5]。目前临床上一般采取禁食、持续胃肠减压，鼓励早期活动等措施[6]，IMD发生率仍然居高不下。既往试图通过胃管给药的办法，有增加肠道负担之嫌，其安全性和有效性不能确定。总的来说，目前仍缺乏对术后胃肠功能恢复的主动干预措施。

中医药在术后IMD的治疗方面体现较大优势,中医学认为，术后IMD的病机主要是手术祛邪的同时也损伤正气，克伐后天之本，气机不畅血行瘀滞，导致脾胃气机失和，腑气不通。我院徐志瑛教授运用人参、大黄等药制成参黄散，贴敷于患者脐部，具有调畅气机，标本兼治之功效。临床疗效显著。且通过外治法治疗术后IMD，不仅用药安全，更具有“简，廉，易”的优势。如能明确其作用具体机制，则可更合理科学发挥其优势，推广其临床应用。

墨汁推进率是反映小鼠肠蠕动功能的一个最客观最直接的指标。本研究显示，治疗组有随时间延长墨汁推进率增加的趋势，6 h点明显高于模型组，提示参黄散敷脐治疗确能促进小鼠术后小肠动力的恢复。胃肠激素MOT和生长抑素SS与术后IMD的发生有一定的关系。近年来研究表明，其含量改变会引起术后IMD患者的小肠动力改变[7-9]。本研究显示，治疗组血清中MOT和SS在2 h和4 h点明显高于模型组和假手术组，提示参黄散能在较短时间内提高后小鼠血清中MOT和SS含量，从而刺激肠道蠕动。后期6 h点两组间无明显差异，提示随着时间的延长，IMD逐渐恢复，体内自身的调节机制使血清中MOT和SS慢慢下降，最终趋于达到一个正常的水平。因此，我们推测，胃肠激素是参黄散促进术后肠蠕动的主要机制之一。

参黄散作为名老中医经验方，疗效可靠，在外科术后胃肠道早期促康复治疗方面颇具前景。但其作用机制并不明确，极有可能是多途径的，除了胃肠激素之外，还有可能和炎症介质及某些蛋白质、基因的表达有关，值得进一步研究。

[1]胡秋未.徐志瑛温通法临床运用经验[J].中医药学刊,2006,24(12)：2188-2189.

[2]崔生辉,李业鹏,李玉伟,等.抑制肠蠕动的小鼠模型的建立 [J].卫生研究,2000,29(6)：385-386.

[3]谢甲琦,于蒲,张坤,等.食用黑米替代墨汁灌注测定大鼠排便时间方法的建立[J].第四军医大学学报,2006,27(24)：2233-2334.

[4]Holte K,Kehlet H.Postoperative ileus：a preventable event[J].Br J Surg,2000，87(11)：1480-1493.

[5]江志伟,李宁,黎介寿.术后肠麻痹临床表现及病理生理机制 [J].中国实用外科杂志,2007,27（5）：682-683.

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Effect of Shenhuang Powder on Intestinal Motility Disorder in Mice after Abdominal Surgery

ZHANG Qi,WEI Xing,ZHANG Jie,et al.The First Affiliated Hospital of Zhejiang Traditional Chinese Medicine Univer⁃sity,Hangzhou(310006)，China

ObjectiveTo investigate the effect of Shenhuang Powder on intestinal motility disorder after ab⁃dominal surgery in mice.MethodsNinety healthy male ICR rats were randomly divided into the model group,Shenhuang powder group and the sham operation group.The model group and Shenhuang powder group were pre⁃pared into the intestinal motility disorder models.In the sham operation group only exploratory laparotomy was applied.The above-mentioned groups were then randomly divided into 2 h、4 h and 6 h groups.Thirty minutes after the model was successfully established,in the Shenhuang powder group Shenhuang powder oblatum was ap⁃plied on bellybutton while equal volume of fine sandbag were used in the sham operation group and the model group.At the end of 2 h、4 h and 6 h after treatment，the serum levels of motilin and somatostatin and car⁃bon-ink transit rate were detected.ResultsThe carbon-ink transit rate in Shenhuang powder group was sig⁃nificantly higher than that in model group at 6 hours after operation.The serum levels of motilin and somatosta⁃tin were significantly higher than those in sham operation group and model control group at 2 and 4 hours after operation（P＜0.05）.ConclusionShenhuang powder can promote the recuperation of enterokinesia in mice after abdominal surgery.

Shenhuang Powder；Mice；Abdominal surgery；Intestinal motility disorder；Gastrointestinal hor⁃mones

R285.5；R656.7

A

1007-6948(2012)03-0255-03

10.3969/j.issn.1007-6948.2012.03.011

“十一五”国家科技支撑计划重点项目(2008BAI53B02)

1.浙江中医药大学附属第一医院胃肠外科（杭州 310006）

2.浙江中医药大学附属第二医院泌尿外科（杭州 310012）

裘华森，E-mail：qhs86@163.com

（收稿：2011-10-20 修回：2012-04-10）

（责任编辑 刘洪斌）

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